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[发明专利]一种制备水稻根原生质体的组合物和方法-CN201910986194.X有效
发明人：谷晓峰;刘青 -专利权人：中国农业科学院生物技术研究所
申请日： 2019-10-16 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备水稻根原生质体的组合物和方法。本发明首先公开了一种制备水稻根原生质体的组合物，所述组合物包括纤维素酶、半纤维素酶、离析酶和果胶酶。本发明进一步公开了用于制备水稻根原生质体的酶解液和方法。通过本发明水稻根原生质体的体系和方法，600个(约0.15g)水稻幼苗种子根根尖分生区可以制备出约30000个原生质体，利用台盼蓝染色镜检，活力达到90％以上，为后续进行单细胞测序及原生质体转化等实验提供了充足材料。
一种制备水稻原生质体组合方法

[发明专利]一种万寿菊花粉诱导培养基及诱导培养方法-CN201910941149.2有效
发明人：李传传 -专利权人：中科瑞晟芳香产业研究院（湖北）有限公司
申请日： 2019-09-30 - 公布日： 2021-08-20 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种万寿菊花粉诱导培养基，该培养基由一定浓度的大量元素、微量元素、Na2‑EDTA、FeSO4·7H2O、肌醇、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、叶酸、5’‑单磷酸腺苷、色氨酸、脯氨酸、水解干酪素、玉米冷浸液、没食子酸、6‑BA、2,4‑D、头孢噻胯、硝普钠、胰岛素、DMSO及麦芽糖配制而成。本发明还提供了一种万寿菊花粉诱导培养方法，包括以下步骤：花蕾采集、花蕾预处理、小孢子分离以及诱导培养。本发明显著提高了万寿菊花粉小孢子愈伤诱导效率，建立了万寿菊小孢子诱导培养体系，为今后万寿菊单倍体育种的开展奠定基础。
一种万寿菊花粉诱导培养基培养方法

[发明专利]一种快速提高短叶对齿藓原丝体生物量的液体培养方法-CN202110581121.X在审
发明人：赵东平;王丹;王丽红;杨倩 -专利权人：内蒙古大学
申请日： 2021-05-25 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速提高短叶对齿藓原丝体生物量的液体培养方法，包括如下步骤：取短叶对齿藓孢子，在固体Knop培养基上进行植物组织快繁培养后，将继代用的固体培养基上的无菌培养短叶对齿藓材料在24℃，12h光照，12h黑暗，光强3000lx的培养箱中培养1周后，取其材料，经机械打磨粉碎后移液枪接种于改良液体Knop培养瓶中，24℃，12h光照，12h黑暗，光强3000lx的培养箱中培养一个月，期间利用显微镜进行原丝体生长状态观测，并进行原丝体生物量测量统计。本发明能在短时间内获得大量的短叶对齿藓原丝体材料，极大的提高了后续作为转基因材料的应用潜力。
一种快速提高齿藓原丝体生物量液体培养方法

[发明专利]一种生产高含量矿物质元素的植物细胞培养方法-CN202110462542.0在审
发明人：张泮良;赵华东 -专利权人：陶氏益农生物工程（青岛）有限公司
申请日： 2021-04-27 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供一种生产高含量矿物质元素的植物细胞培养方法，涉及植物细胞培养领域。该生产高含量矿物质元素的植物细胞培养方法，包括培养方法包括以下步骤：在无菌操作台中把待培养植物的种子进行一些预处理(灭菌)，然后再把它接种到事先配好的培养基中，培养出植物的植株苗；在无菌操作台中，把待培养植物的植株苗的几个部位分别接种到培养基中，并标记相应的植株位置。本发明通过培养基中增大矿物质含量，并筛选出优质细胞培养成植株，并将优质植株进行取多部位培养，如此多次循环，从而筛选出高矿物质含量的植物细胞，该方法简单方便，易于实施，并且可以有效地获得提升植物细胞中矿物质的含量，在健康产业中具有非常重要的影响。
一种生产含量矿物质元素植物细胞培养方法

[发明专利]一种植物器官高活性线粒体的快速提取方法及其专用提取液-CN201810146220.3有效
发明人：王若涵;张出兰;刘丽娅;李静;王众司 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2018-02-12 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物器官高活性线粒体的快速提取方法及其专用提取液。该方法包括如下步骤：将植物器官、提取液和研磨介质混合，匀浆，收集滤液并差速离心分离植物器官的线粒体，然后采用线粒体呼吸缓冲液保存。提取液中含有蔗糖、焦磷酸钠、EDTA、磷酸二氢钾、BSA、半胱氨酸、抗坏血酸和pvp‑40。实验证明，本发明提供的方法具有如下优点：高效，即线粒体活性高；适用性广，可适用于多种被子植物花部器官线粒体的提取；保存时间长，在冰盒上可保持活性5h，可满足大量关于线粒体能量代谢和呼吸的研究；操作简单耗时短。本发明提供的方法为线粒体呼吸链及能量代谢的研究奠定坚实基础，具有重要的实际应用价值。
一种植物器官活性线粒体快速提取方法及其专用

[发明专利]一种茶树新鲜组织原生质体的分离与纯化方法-CN202110737134.1在审
发明人：彭传燚;徐学丰;朱海燕;蔡荟梅;宛晓春 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2021-06-30 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种茶树新鲜组织原生质体的分离与纯化方法，属于木本植物原生质体制备技术领域。本发明以茶树自然茶园中茶树根、嫩茎和叶片(嫩叶和老叶)等新鲜器官组织及多品种嫩片(紫鹃、黄山白茶、黄魁和舒茶早)为研究材料进行复合酶解，释放后经纯化获得的原生质直径小于20μm，细胞器清晰可见；原生质体数量大于106/g(FW)，不同茶树器官的原生质体活力均大于88％。该制备方法具有稳定、高效、操作简单和茶树材料要求低等优点，为茶树基因改良和基因功能等研究提供了技术支持。
一种茶树新鲜组织原生质体分离纯化方法

[发明专利]一种分离单子叶植物保卫细胞的方法-CN201810496120.3有效
发明人：王俊斌;谢晓东;吴天文;李扬;陈小强;丁博;李明;苗琛 -专利权人：天津农学院
申请日： 2018-05-22 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种分离单子叶植物保卫细胞的方法，包括以下步骤：(1)取小麦种子，诱导萌芽；(2)步骤(1)中的小麦种子生长到第一片叶未展开前，将胚芽鞘从种胚处剪断、剥离，将胚芽鞘纵切均分成两半，撕取表皮条；(3)将步骤(2)制得的表皮条置于酶解液中进行酶解；(4)清洗步骤(3)制得的表皮条；(5)将洗好的表皮条置于显微镜下镜检。本发明所述方法，通过使用含有较少类型细胞的小麦胚芽鞘，撕取表皮细胞，再经酶解液的酶解处理，经酶解处理后的胚芽鞘经过清洗，最终获得了高纯度、高活性的哑铃形的小麦保卫细胞，分离出的保卫细胞可用于转录组、蛋白质组和代谢组学研究。
一种分离单子叶植物保卫细胞方法

[发明专利]通过组织培养获得栀子苷的方法-CN201811563779.2有效
发明人：陈建荣;刘芳;赵晨曦;唐伟卓;唐映红 -专利权人：长沙学院
申请日： 2018-12-20 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：栀子中含多余种生物活性物质，国内外公认的栀子有效成分为环烯醚萜类物质，其中含量最高的为栀子苷，又称为京尼平苷。由于栀子是栀子果实是栀子苷的唯一天然获得来源，栀子苷的获取完全依赖于栀子果实，通过植物细胞工程筛选产栀子细胞进行规模化培养是解决栀子来源短缺的有效途径之一。目前还未见有通过细胞培养生产栀子苷的报道。本发明有效的解决了栀子细胞生长与栀子苷含量下降之间的矛盾，可以在短期内以内获得富含栀子苷的新鲜细胞，培养所得细胞的栀子苷含量是种子细胞中栀子苷含量的数倍，且不受自然条件的影响和限制。
通过组织培养获得栀子方法

[发明专利]一种植物原生质体单细胞悬液的制备方法及其应用-CN202011605111.7有效
发明人：周煌凯;高川;陈飞钦;夏昊强;徐毓璇;梁国霞 -专利权人：广州基迪奥生物科技有限公司
申请日： 2020-12-29 - 公布日： 2021-08-06 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种植物原生质体单细胞悬液的制备方法及其应用。本发明提供的制备方法，通过将植物原生质体处理、孵育、酶解、过滤、离心、活性检测等过程，最终制成单细胞悬液。采用本发明所述方法制成的植物原生质体单细胞悬液，细胞活性高达95％以上，可满足各类高通量单细胞测序平台的细胞悬液质量要求，应用价值高。
一种植物原生质体单细胞制备方法及其应用

[发明专利]人参形成层干细胞分离培养方法-CN201910066835.X有效
发明人：吴冬;代陈胜;成丽丽;陈怀德;刘民宪;侯丽丽;江灼和;刘雨佳;凌远建 -专利权人：深圳先声科技发展有限公司
申请日： 2019-01-24 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及人参形成层干细胞的分离培养方法，所述方法包括用本发明的式I化合物处理含有人参形成层的组织的步骤。本发明还涉及根据本发明的方法获得的人参形成层干细胞及其在制备用于人参悬浮培养的产品中的用途。本发明中提供的人参形成层细胞分离及培养方法可以有效地分离人参的形成层细胞，形成层细胞具有无限分裂能力，生长快速，抗逆能力强，为超大体积的液体培养提供基础，可以显著减少生产成本。
人参形成层干细胞分离培养方法

[发明专利]一种芳樟组织培养方法及其培养基-CN201810018956.2有效
发明人：吴炜 -专利权人：福建省永安林业（集团）股份有限公司
申请日： 2018-01-09 - 公布日： 2021-07-30 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种芳樟组织培养方法及其培养基，包括如下培养基：芽的诱导培养基为MS+0.5‑1.2mg·L‑16‑BA+0.1‑0.2mg·L‑1NAA+蔗糖30g·L‑1+琼脂5g·L‑1，初始PH值为5.4‑5.8；芽继代增殖培养基的配方：2/3MS+0.4‑1.0mg·L‑16‑BA+0.1‑0.2mg·L‑1KT+0.1‑0.2mg·L‑1NAA+蔗糖30g·L‑1+琼脂5g·L‑1初始PH值为5.4‑5.8；生根培养基的配方：改良MS+0.2‑0.6mg·L‑1IBA+0.4‑0.8mg·L‑1ABT+0.2‑0.6mg·L‑1NAA+蔗糖20g·L‑1+琼脂6g·L‑1初始PH值为5.4‑5.8；经外植体选择、消毒、芽诱导、芽继代增殖培养、生根培养、瓶苗炼苗、移栽，得到组培苗。本发明在芽诱导阶段经继代3次后即可形成芽丛，在芽继代增殖培养阶段，芳樟增殖快，生长快，褐化较少发生，在生根培养阶段，选取茎杆通直，叶片舒展的植株进行生根培养，生根率为90％以上。
一种组织培养方法及其培养基

[发明专利]一种植物来源外泌体及其制备方法和应用-CN202010037118.7有效
发明人：高建青;李黎明;陈家宸;李平 -专利权人：浙江大学
申请日： 2020-01-14 - 公布日： 2021-07-27 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物来源外泌体及其制备方法和在制备用于动物组织再生治疗的药物或支架中的应用。所述制备方法包括步骤：(1)取天然植物的任意部位进行2‑(N‑吗啡啉)乙磺酸缓冲液浸泡与渗透处理，然后弃去上清液，收集处理后的湿润样品冷冻离心提取得到非原质体液；所述浸泡与渗透处理具体为：浸泡6～24h后进行2～5次抽真空，每次抽真空时间独立为5～15s，相邻两次抽真空之间的间隔时间独立为10s～1min；(2)将所述非原质体液超高速离心得到所述植物来源外泌体；所述超高速离心的条件为：离心力不小于100000g，离心时间1～7h，温度0～4℃。
一种植物来源外泌体及其制备方法应用

[发明专利]铁基纳米颗粒在促进植物茎尖生长中的应用-CN201910983863.8有效
发明人：邓灿辉;粟建光;戴志刚;程超华;唐蜻;许英;杨泽茂;刘禅;陈小军 -专利权人：中国农业科学院麻类研究所
申请日： 2019-10-16 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及农作物组织培养技术领域，尤其涉及铁基纳米颗粒在促进植物茎尖生长中的应用。本发明提供了一种可促进工业大麻茎尖生长的材料为铁基纳米颗粒，研究表明，通过在工业大麻茎尖的培养过程中添加不同化学态铁基纳米颗粒的水分散液，能够促进工业大麻茎尖的生长，促进效果显著，可达104％。
纳米颗粒促进植物生长中的应用

[发明专利]一种千层塔叶片原生质体的制备方法-CN201710538688.2有效
发明人：郭斌;姚凯;宋敏;李梦青;任静宇;尉亚辉 -专利权人：西北大学
申请日： 2017-07-04 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种千层塔叶片原生质体的制备方法，该方法通过将叶片进行在含有Vc和甘露醇的培养基上预处理之后，再在低压环境中进行酶液处理，从而获得较高的原生质体得率，并且明显提高了原生质体的活力，可用于千层塔原生质体的制备和细胞融合。
一种千层塔叶片原生质体制备方法

[发明专利]用于西洋梨组培苗的培养基、培养方法和其应用-CN201910685738.9有效
发明人：孙清荣;关秋竹;孙洪雁;陶吉寒 -专利权人：山东省果树研究所
申请日： 2019-07-28 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：一种用于西洋梨组培苗的培养基、培养方法和其应用，包含有芽启动培养基，生根培养基，具有基本培养基为QL及外源激素为BA、TDZ、2ip和NAA的增殖培养基，可以有效防止了西洋梨继代增殖过程中常发生的试管苗顶端枯死、肥胖及扁茎等异常生长现象的发生，从而获到健壮的组培苗。
用于西洋梨组培苗培养基培养方法应用