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[发明专利]一种人参干细胞的制备方法-CN201710435874.3有效
发明人：黄涛 -专利权人：厦门鹭港兆康生物科技有限公司
申请日： 2017-06-12 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种人参干细胞的制备方法，包括取样、制备干细胞原生质体、离体培养、看护培养、单细胞克隆培养及继代培养步骤，本发明可以有效地分离和培养人参的干细胞，也可以为其它块茎及根茎类植物干细胞的分离提供一个新的可行途径。本发明培养的人参干细胞具有无限分裂的能力，生长速度快，抗逆能力强，为超大体积的液体悬浮培养提供了基础，可以显著减少生产成本。
一种人参干细胞制备方法

[发明专利]用于金姜花离体培养的培养体系及其应用-CN202010834330.6有效
发明人：李永泉;胡秀;谭嘉川 -专利权人：仲恺农业工程学院
申请日： 2020-08-18 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了用于金姜花离体培养的培养体系及其应用，属于植物组织培养技术领域；所述培养体系包括小根茎诱导培养基，所述小根茎诱导培养基为含有1.0～3.0mg/L的BA、0.5～1.5mg/L的NAA、0.1～0.5mg/L的TDZ、25～30g蔗糖以及7～8g/L琼脂的无菌MS培养基；本发明通过在移栽的前一阶段诱导丛芽的基部膨大、增殖为小根茎(将无菌苗诱导为小根茎)，增加了无菌苗的营养和水分储备能力，增强了无菌苗适应性，从而提高移栽的成活率；本发明获得的无菌苗对育苗基质和空气湿度具有较强的适应能力，移栽成活率较常规无菌苗高5～10％，移栽4周后成活率可达96～100％。
用于金姜花离体培养体系及其应用

[发明专利]一种诱导七叶一枝花愈伤组织直接成苗的培养基及方法-CN202011242624.6有效
发明人：许娟;石云平;苏祖祥;李小泉 -专利权人：广西壮族自治区农业科学院
申请日： 2020-11-09 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开一种诱导七叶一枝花愈伤组织直接成苗的培养基及培养方法，培养基包括改良MS培养基和诱导剂，以及壮苗生根剂；诱导剂为：PIC 0.2～1.0+6‑BA 1.0～2.0 +NAA 0.05～0.2，pH5.8～6.5；壮苗生根剂为：BS 0.01～0.2+IAA 0.2～0.5，pH5.8～6.5；配制培养基，将改良MS培养基和诱导剂配制成半固体愈伤成苗培养基，并调节pH值为6.0，高压灭菌后备用；将壮苗生根剂使用真空过滤器灭菌后备用，培养后期加入。采用本发明培养基及培养方法，只配制一次培养基，在培养中途加入一次壮苗生根剂，就可以将七叶一枝花愈伤组织到成苗一次性完成，并保持高增殖倍数（12倍以上），丛生小苗生长健壮、根系发达，移栽成活率达78.6%，极大地提高了七叶一枝花种苗获得的效率。
一种诱导七叶一枝花组织直接培养基方法

[发明专利]一种山苍子叶肉细胞原生质体的制备方法-CN201910756254.9有效
发明人：陈昊;王阳;张付豪 -专利权人：中南林业科技大学
申请日： 2019-08-16 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开的一种山苍子叶肉细胞原生质体的制备方法，包括以下步骤：获取无菌山苍子叶片；将无菌山苍子叶片切成条状碎块，置于酶解液中，黑暗条件下静置酶解6‑12小时，条状碎块与酶解液的质量体积比为1‑3：30‑50；将酶解完成后的酶解液进行过滤，取滤液经离心处理，弃上清液，得原生质体；在所得原生质体中加入原生质体洗涤液A，重悬原生质体；随后加入原生质体洗涤液B，离心后，收集液面分界处的原生质体细胞，即得。本发明提供的制备方法能够高效获取山苍子叶肉细胞原生质体，所得原生质体形态正常，无破损，每克鲜叶组织可获得(8.69±0.57)×106个原生质体，为山苍子的基础研究和应用研究提供重要的技术支持。
一种山苍子叶肉细胞原生质体制备方法

[发明专利]制备单细胞核悬液的方法、单细胞测序方法及试剂盒-CN202010223881.9在审
发明人：宗亮;付杰;陈虹杰;徐怀前;陈翠;田志坚 -专利权人：武汉华大医学检验所有限公司
申请日： 2020-03-26 - 公布日： 2021-09-28 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种制备单细胞核悬液的方法、单细胞测序方法及试剂盒。所提供的制备单细胞核悬液的方法包括(1)基于组织样本，进行酶解处理，分离获得原生质体；(2)将所述原生质体利用第一溶液进行裂解处理，以便获得裂解产物，所述第一溶液包括盐酸盐缓冲液、钠离子、镁离子、表面活性剂、洋地黄皂苷和牛血清蛋白；(3)基于所述裂解产物，分离获得单细胞核悬液。所提供的单细胞测序方法包括利用上述方法制备的单细胞核悬液，进行单细胞测序。通过本发明的方法能够获得稳定的高活力的单细胞核悬液，使得细胞损伤小，可以直接用于单细胞测序实验。
制备细胞核方法单细胞试剂盒

[发明专利]一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基以及培养方法-CN202010541168.9有效
发明人：张丽丽;李荣;乔海明;王玉祥;李世芳;曲志华;杨绕华;刘晶晶;李爱荣;马建富;郭娜;刘栋 -专利权人：张家口市农业科学院（河北省高寒作物研究所）
申请日： 2020-06-15 - 公布日： 2021-09-24 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于垂果亚麻花药和子房的培养基以及培养方法，属于野生亚麻生物技术领域。该培养方法包括基因型选择、外植体低温处理、外植体表面消毒、愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽伸长和生根培养。本发明以垂果亚麻的花药和未受精子房为材料，建立了一套适合垂果亚麻的单倍体再生植株培养体系，直接获得了垂果亚麻的单倍体植株，为亚麻的单倍体育种提供一定的参考价值，同时，对亚麻遗传改良的种质资源保存和新品种选育都具有一定意义，也是保存野生遗传资源的一种手段，为今后的科研工作提供帮助。
一种适用于亚麻花药子房培养基以及培养方法

[发明专利]一种珍珠彩桂组培苗继代培养基配方及其应用-CN201811593819.8有效
发明人：孙红英;辛全伟;罗海凌;严少娟 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2021-09-21 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种珍珠彩桂组培苗继代培养基配方及其应用，培养基组成成分包括木本植物培养基WPM、细胞分裂素6‑BA、激动素KT及赤霉素GA3，还包括终浓度6.5g·L‑1的琼脂和终浓度30g·L‑1的蔗糖；经过分析得出，珍珠彩桂增殖最佳培养基为：木本植物培养基WPM、终浓度4.0 mg·L‑1的细胞分裂素6‑BA、终浓度2.0 mg·L‑1的激动素KT、终浓度0.5 mg·L‑1的赤霉素GA3、终浓度6.5g·L‑1的琼脂、终浓度30g·L‑1的蔗糖；在此条件下珍珠彩桂组培苗的增殖系数可达到5.8。
一种珍珠彩桂组培苗继代培养基配方及其应用

[发明专利]一种珍珠彩桂组培苗瓶内生根培养基配方及应用-CN201811593844.6有效
发明人：孙红英;辛全伟;罗海凌;严少娟 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2021-09-21 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种珍珠彩桂组培苗瓶内生根培养基配方及应用，培养基组成成分包括1/2WPM培养基及吲哚丁酸，其中培养基中吲哚丁酸的终浓度为0.5‑4.0mg/L。将此培养基应用于促进珍珠彩桂生根中，可显著促进珍珠彩桂组培苗生根，在IBA终浓度为3.0mg L‑1时,平均根长及平均根数都达到最大，生根率达到89.5%，对珍珠彩桂组培苗具有显著促生根作用。
一种珍珠彩桂组培苗瓶内生根培养基配方应用

[发明专利]一种木本植物苹果果实细胞液泡蛋白的提取方法-CN202110708573.X在审
发明人：胡大刚;向莹;王菲;陈修正;孙翠慧 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2021-06-25 - 公布日： 2021-09-17 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种木本植物苹果果实细胞液泡蛋白的提取方法，包括以下步骤：(1)以苹果果实为实验试材，从苹果果实细胞中提取出原生质体；(2)对步骤(1)中得到的原生质体进行分离得到液泡；(3)对步骤(2)中得到的液泡进行超低温冻融处理，得到苹果果实细胞液泡蛋白；(4)对步骤(3)中得到的液泡蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，最终确定获得苹果果实细胞液泡蛋白。本发明通过反复研究和试验在苹果果肉细胞中提取出液泡蛋白，提取方法效率高。
一种木本植物苹果果实细胞液泡蛋白提取方法

[发明专利]一种梨叶原生质体的提取方法-CN202110725839.1在审
发明人：许建锋;高成昱;马辉;张海霞;于新乐;李英丽;张江红;张玉星 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2021-06-29 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种梨叶原生质体的提取方法。属于原生质体技术领域。本发明采用梨组培苗叶片，解决了田间苗易褐化、无法制备完整原生质体的问题，打破了梨原生质体制备的瓶颈；采用本发明酶解液，提高了提取效率并保证了原生质体的结构完整；采用本发明的方法制备梨叶原生质体，可提高原生质体的浓度，保持原生质体的完整性及活性，制备的梨叶原生质体浓度可达106个/ml。
一种原生质体提取方法

[发明专利]苦瓜外泌体的提取方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用-CN202010090930.6有效
发明人：齐素华;马萍;王斌;顾兵;王婉 -专利权人：徐州医科大学
申请日： 2020-02-13 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种苦瓜外泌体的提取方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用，提取步骤如下：取适量新鲜云南山野苦瓜，去籽洗净并晾干；榨取苦瓜汁，将苦瓜汁连续离心，离心后取上清，弃沉淀；将取得的上清超速离心，弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1‑2mL的磷酸缓冲盐溶液中；将悬浮液用0.22μm的滤膜过滤，滤液再次于超速冷冻离心机中离心，弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1‑2mL的磷酸缓冲盐溶液中。提取的苦瓜外泌体可用于制备抗肿瘤药物。本发明的提取方法方便有效，提取纯度高，提取的苦瓜外泌体能够抑制肿瘤细胞的增殖和迁移浸润，同时能够促进肿瘤细胞的凋亡，达到有效治疗肿瘤疾病的效果。
苦瓜外泌体提取方法及其制备肿瘤药物中的应用

[发明专利]一种苦瓜外泌体及其提取方法与应用-CN202010090819.7有效
发明人：齐素华;顾兵;蔡恒;黄琳燕;王彦玲 -专利权人：徐州医科大学
申请日： 2020-02-13 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种苦瓜外泌体及其提取方法与应用，提取步骤如下：取适量新鲜云南山野苦瓜，去籽洗净并晾干；榨取苦瓜汁，将苦瓜汁连续离心，离心后取上清，弃沉淀；将取得的上清超速离心，弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1‑2mL的磷酸缓冲盐溶液中；将悬浮液用0.22μm的滤膜过滤，滤液再次于超速冷冻离心机中离心，弃上清，取沉淀，沉淀悬浮于1‑2mL的磷酸缓冲盐溶液中。提取的苦瓜外泌体可用于制备治疗缺血性脑中风药物。本发明的提取方法方便有效，提取纯度高，提取的苦瓜外泌体具有脑卒中后神经损伤的保护作用。
一种苦瓜外泌体及其提取方法应用

[发明专利]一种植物外泌体的提取方法-CN202010144341.1在审
发明人：潘丽英;胡金波;邓林涛 -专利权人：上海察雅生物科技有限公司
申请日： 2020-03-04 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物外泌体的提取方法，包括如下步骤：S1，取植物的地上部分，切小段，浸入NA溶液；S2，从S1的NA溶液中取出叶片，PBS冲洗后，再浸入VIB1溶液中；S3，将叶片从S2的VIB1溶液转移至VIB2溶液中；S4，将S3的叶片转移至LY溶液中，摇晃以形成混合体系；S5，将S4中的混合体系进行滤膜过滤，滤液离心两次，收集上清液；S6，对S5收集后的上清液再次离心，收集上清液；S7，对S6获得上清液进行离心，去除上清液，获得水稻外泌体；本发明的提取方法操作简单，无需大量的细胞培养液即可获得尺寸在100nm左右的植物外泌体。
种植物外提取方法

[发明专利]一种广藿香生根培养专用培养基及其配制方法和应用-CN202010796313.8有效
发明人：张炜;张华通 -专利权人：张炜
申请日： 2020-08-10 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种广藿香生根培养专用培养基及其配制方法和应用，该广藿香生根专用培养基包括以下成分：花宝1号、花宝2号、硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠、钼酸钠、硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、氯化钴、硼酸、α‑萘乙酸、活性炭、纳米银溶液、青霉素、链霉素和卡拉胶，培养基的配制过程无需进行高温消毒即可直接使用；利用该广藿香生根培养专用培养基进行广藿香组培苗生根炼苗培养，通过组培过程中保鲜膜封口和控制环境因素，直接在塑料大棚自然环境进行生根炼苗，可大幅度减少生根炼苗时的污染率，并减少炼苗时间，结合本发明中的广藿香生根培养专用培养基，能有效地缩短广藿香组织培养工厂化育苗过程中的生长周期，繁殖快、移栽存活率高、污染率低、综合成本低。
一种广藿香生根培养专用培养基及其配制方法应用

[发明专利]风雨兰组织培养的方法-CN202010505497.8有效
发明人：罗青文;谭嘉娜;官锦燕;罗剑飘;黄海英;陈顺 -专利权人：广州甘蔗糖业研究所湛江甘蔗研究中心
申请日： 2020-06-05 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明属于组织培养技术领域，是以风雨兰种球为外植体，对消毒方式、不同激素配比等因素对其组培繁殖的影响因素进行了较深入和系统的研究，成功构建风雨兰无性繁殖体系，所述无性繁殖体系包括芽诱导培养基、增殖培养基、生根培养基；所述芽诱导培养基为MS+0.5～3.0mg/L 6‑BA+0.01～0.02mg/L IBA；所述增殖培养基为MS+1.0～2.0mg/L 6‑BA+0.01～0.02mg/L IBA，且6‑BA与IBA的用量比为100～200；所述生根培养基为1/2MS+0.01～0.05mg/L NAA或1/2MS+0.25～0.5mg/L IBA或1/2MS+0.05～0.2mg/L NAA+0.05～0.2mg/L IBA；在此无性繁殖体系上并形成了完整的风雨兰无性繁殖方法，为提供大量的风雨兰组培种苗提供技术基础。
风雨组织培养方法