[发明专利]一种酶法联合微生物发酵制备大豆低聚肽的方法及其应用

权利要求书

1.一种酶法联合微生物发酵制备大豆低聚肽的方法，其特征在于，包括：

步骤一、大豆分离蛋白预处理：以大豆分离蛋白粉为原料，大豆分离蛋白按质量体积比1：8～1：10加入纯化水，常温下剪切30～60min，剪切速度600～1000r/min；得到蛋白匀浆液；

步骤二、复合酶酶解：在所述蛋白匀浆液中滴加碱液调节体系pH至8.0～8.5,采用复合酶A和复合酶B梯度酶解：先添加复合酶A，通过控制体系pH维持在8.0～8.5，酶解温度50～60℃，酶解2～3小时；再加入复合酶B，酶解1～2小时，高温灭菌，再降温至30～38℃；得到复合酶酶解液；所述复合酶A或所述复合酶B为碱性蛋白酶Alcalase 2.4L、胰酶、胶原酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶中的任意一种酶与果胶酶的复合酶，复配比例为5：1；

步骤三、微生物发酵：控制发酵温度30～38℃；在复合酶酶解液中加入碳源以及无机盐氯化铵缓冲体系，再加入活性干酵母发酵发酵，活性干酵母添加质量按发酵液体积的0.05％～0.4％，发酵3～5h，控制酒精度1～3％Vol；再加入东方醋酸菌发酵，东方醋酸菌添加质量按发酵液体积的0.1％～1.0％，发酵1～3h，控制产乙酸5～20g/L；再加入枯草芽孢杆菌及植物乳酸菌发酵，枯草芽孢杆菌和植物乳酸菌添加质量按发酵液体积的0.1％～0.8％，发酵4～8h；东方醋酸菌产酸富集，待发酵体系的pH＝4.4～4.8，终止发酵；枯草芽孢杆菌和植物乳酸菌的质量组分比为2：1；

步骤四、分离纯化：发酵结束后灭菌，通过东方醋酸菌代谢产酸的富集让分散型的蛋白变性沉淀，离心机分离2000～4000r/min，得到发酵清液和固体渣，所述固体渣通过高温灭菌，冻干后，得到大豆发酵粉；所述发酵清液通过活性炭脱色脱味、板框过滤、纳滤脱盐浓缩、UHT杀菌、喷雾干燥工序，得到大豆低聚肽。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤二中，所述复合酶A添加量为大豆分离蛋白粉质量的0.8％～2.0％，所述复合酶B添加量为大豆分离蛋白粉质量的0.3％～1.0％。

3.一种组合物，其特征在于，包括以下重量份数的组分：如任一权利要求1-2所述的大豆发酵粉25～35份、多聚果糖15～25份、桑葚发酵粉15～25份、β-环糊精10～15份、麦芽糊精10～15份、菊粉5～10份、维生素C1.5～2份。

4.一种组合物，其特征在于，包括以下重量份数的组分：如任一权利要求1-2所述的大豆低聚肽25～35份、山梨糖醇15～20份、低聚异麦芽糖15～20份、珠肽粉10～15份、燕麦10～15份、硬脂酸镁1～5份、Na-CMC 1～5份。