[发明专利]核酸组合物、肠道致病菌的检测试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种核酸组合物，其特征在于，包括检测引物对，所述检测引物对包括如下引物对中的至少两种：

序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2所示的沙门氏菌引物对、序列如SEQ ID No.4及SEQID No.5所示的金黄色葡萄球菌引物对、序列如SEQ ID No.7及SEQ ID No.8所示的艰难梭菌引物对、序列如SEQ ID No.10及SEQ ID No.11所示的志贺氏菌引物对、序列如SEQ IDNo.13及SEQ ID No.14所示的肺炎克雷伯菌引物对、和序列如SEQ ID No.16及SEQ IDNo.17所示的铜绿假单胞菌引物对。

2.根据权利要求1所述的核酸组合物，其特征在于，还包括与所述检测引物对对应的检测探针，与所述检测引物对对应的检测探针包括：

序列如SEQ ID No.3所示的沙门氏菌探针、序列如SEQ ID No.6所示的金黄色葡萄球菌探针、序列如SEQ ID No.9所示的艰难梭菌探针、序列如SEQ ID No.12所示的志贺氏菌探针、序列如SEQ ID No.15所示的肺炎克雷伯菌探针、序列如SEQ ID No.18所示的铜绿假单胞菌探针；

与所述检测引物对对应的检测探针上连接有荧光基团。

3.根据权利要求2所述的核酸组合物，其特征在于，所述检测引物对包括所述沙门氏菌引物对、所述金黄色葡萄球菌引物对、所述艰难梭菌引物对、所述志贺氏菌引物对、所述肺炎克雷伯菌引物对和所述铜绿假单胞菌引物对；所述检测引物对分为多组，同一组内的不同检测引物对对应的检测探针上连接的荧光基团不同。

4.根据权利要求3所述的核酸组合物，其特征在于，所述检测引物对分为两组；第一组包括所述沙门氏菌引物对、所述金黄色葡萄球菌引物对和所述艰难梭菌引物对，第二组包括所述志贺氏菌引物对、所述肺炎克雷伯菌引物对和所述铜绿假单胞菌引物对。

5.根据权利要求3所述的核酸组合物，其特征在于，各组内的各检测引物对对应的所述检测探针上连接的荧光基团选自FAM、HEX、VIC、CY5、ROX、Texsa Red及Quasar 705中的一种。

6.根据权利要求5所述的的核酸组合物，其特征在于，所述第一组内的对应的检测探针上的荧光基团分别为ROX、HEX和FAM；所述第二组内的对应的检测探针上的荧光基团分别为ROX、HEX和FAM。

7.根据权利要求2～6任一项所述的核酸组合物，其特征在于，所述核酸组合物还包括序列如SEQ ID No.19及SEQ ID No.20所示内参引物对和内参探针，所述内参探针的序列或其互补序列如SEQ ID No.21所示；所述内参探针上连接有与所述检测探针不同的荧光基团。

8.一种肠道致病菌的检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～7任一项所述的核酸组合物。

9.根据权利要求8所述的肠道致病菌的检测试剂盒，其特征在于，还包括PCR反应缓冲液、核酸提取试剂、PCR稳定剂及PCR增强剂中的至少一种。

10.一种肠道致病菌的检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

提取待测样本的核酸，得到核酸样本；

以所述核酸样本为模板，加入权利要求8～9任一项所述的肠道致病菌的检测试剂盒中的检测引物对和对应的检测探针，进行实时荧光PCR扩增反应；及

在实时荧光PCR扩增反应过程检测荧光信号，得到检测结果。