[发明专利]一种高通量检测食源性致病菌的方法有效
| 申请号： | 201210322582.6 | 申请日： | 2012-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN103667251A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 王慧;储瑞蔼;谢东;韩雪松;周贤;邱红玲;李井泉;尹珺;王寿利;王奕然 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/10;C12Q1/06;C12Q1/04;A61K45/00;A61P31/04 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 杨昀 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种高通量检测食源性致病菌的方法，所述方法包括：采用针对多种致病菌标志性DNA序列的通用引物对对样品进行PCR扩增，从而获得所述致病菌的标志性DNA序列；使得所述致病菌的标志性DNA序列与分别针对所述致病菌标志性DNA序列的特异性捕获探针接触，获得带有不同可检测标记物的杂交产物；检测可检测标记物的信号以确定样品中致病菌的存在或数量。本发明还提供了用于检测致病菌的试剂盒。本发明的方法和试剂盒可准确快速、高通量地检测致病菌，具有易操作、特异性强、灵敏度高等优点，其应用前景广泛。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通量 检测 食源性 致病菌 方法 | ||
【主权项】：
一种获得样品中致病菌的标志性DNA序列的方法，所述致病菌为选自下组中的至少两种：大肠杆菌(E.coli)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimorium)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、单增李斯特菌(L.monocytogenes)、小肠结肠耶尔森菌(Yersima enterocolitica)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)，所述方法包括：(i)获得针对SEQ ID NO：22所示序列ACGCGAAGAA CCTTACC的通用上游引物和针对SEQ ID NO：23所示序列TGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAG的通用下游引物；(ii)采用所述通用上游引物和通用下游引物对所述样品进行PCR扩增，从而获得所述致病菌的标志性DNA，其中，所述标志性DNA序列位于所述致病菌的16S rDNA中，且包含所述一种或多种致病菌各自独有的特异性序列。
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