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[发明专利]基于杂交、延伸连接反应的核酸捕获文库制备方法-CN201910318823.1在审
发明人：马晓玲;刘冬梅 -专利权人：上海三誉华夏基因科技有限公司
申请日： 2019-04-19 - 公布日： 2019-09-17 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明通过设计捕获探针引物，然后与基因组DNA进行杂交反应，得到目的DNA片段后进行延伸、连接反应，后对目的DNA片段进行PCR扩增，纯化后即可进行文库测序。本发明的靶向区域捕获建库方法比较灵活，特异性高，捕获效率高，操作简单，耗时较短，并且能够尽量减少因PCR扩增效率差异造成的捕获区域均一性很差的现象。
连接反应文库核酸捕获制备捕获延伸杂交核酸检测技术基因组DNA 靶向区域捕获区域捕获探针效率差异杂交反应均一性测序建库引物耗时灵活

[发明专利]CD3^-CD56⁺NK细胞高效扩增培养系统的构建方法-CN200810155073.2无效
发明人：束永前;居颂文 -专利权人：江苏省人民医院
申请日： 2008-10-31 - 公布日： 2009-03-18 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明的CD3^-CD56⁺NK细胞高效扩增培养系统的构建方法，主要是提供一种由Poly-D-Lysine或Poly-L-Lysine作为黏附剂，黏附anti-CD137mAb和IL-15构成的体外大量扩增CD3^-CD56⁺NK细胞的培养系统，与现有的用其它方法相比，明显具有：方法简单合理，易于推广，所需原材料少，成本低，制备周期较短，扩增效率高和对肿瘤细胞的杀伤效率高等优点。实验证明，采用本发明的方法扩增的CD3^-CD56⁺NK细胞与用其他已知的细胞因子或细胞因子组合扩增的CD3^-CD56⁺
cd3 sup cd56 nk 细胞高效扩增培养系统构建方法

[发明专利]一种巢式PCR试剂盒-CN201910987413.6在审
发明人：彭志勇;祝令香;郭永;芮孝;王栋;杨文军;高娜 -专利权人：北京新羿生物科技有限公司
申请日： 2019-10-17 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： C12Q1/6848 文献下载
摘要：本发明提供一种巢式PCR试剂盒，所述试剂盒包括进行第一轮PCR扩增的一对外部引物和进行第二轮扩增的一对巢式引物，第一轮扩增的产物作为第二轮扩增的模板，然后再使用所述巢式引物进行第二轮扩增；其中第一轮的一对外部引物的上游和/或下游引物对于所述第二轮扩增的特异性有影响，所述一对外部引物的上游和/或下游引物中dT全部用dU代替，并且第二轮PCR扩增体系中包括UNG酶，其在第二轮扩增前用于消化所述一对外部引物的上游和/或下游引物本发明的试剂盒操作简单快捷、扩增效率高和污染风险低。
扩增外部引物下游引物巢式引物试剂盒上游试剂盒操作扩增效率巢式PCR 再使用消化污染

[发明专利]一种基于六聚体随机引物高效滚环扩增方法-CN202210072066.6在审
发明人：翁国武;杨立桃 -专利权人：杭州飞时达生物科技有限公司
申请日： 2022-01-21 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于六聚体随机引物高效滚环扩增方法，本发明涉及分子生物学领域，涉及核酸扩增以及生物检测领域，包括以下步骤；将单链DNA进行硫代修饰，再进行环化；使单链环状DNA与包含DNA聚合酶、分子拥挤剂、脱氧核糖核苷三磷酸和具有3'末端和5'末端的引物的反应溶液接触；经由滚环扩增来扩增所述单链环状DNA以形成扩增的DNA产物，包括六聚体随机引物设计、快速检测体系配制、一管式扩增检测方法，本发明引物设计为非特异性引物，六聚体随机引物理论上能够结合环型模板的任意位点，从而相比传统的滚环扩增检测具有超高扩增效率，对扩增靶标的选择性广，本方法可为常规核酸检测提供技术方法，具有广泛的潜在应用前景。
一种基于六聚体随机引物高效扩增方法

[发明专利]一种增加多重PCR引物兼容性的方法-CN201811597559.1在审
发明人：李艳艳;张通;靖相密 -专利权人：山东艾克韦生物技术有限公司
申请日： 2018-12-26 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明针对每个靶基因设计一对特异性引物Fs、Rs以及通用引物Fg、Rg；先采用带有通用引物标签的特异性引物Fg+Fs、Rg+Rs进行富集扩增；然后采用通用引物标签Fg、Rg进行指数扩增；最后根据检测平台采取探针杂交或非探针杂交方式进行检测此方法通过控制每一步PCR扩增使用的各反应组分浓度，如引物浓度、Mg²⁺浓度等，控制PCR扩增的反应条件，如：退火温度、退火时间等来实现多靶标基因的特异、灵敏扩增。本发明特异性强，可以保证不同病原体核酸的扩增效率相似，避免了传统多重PCR扩增的偏斜性；在进行检测时就不需要进行变性以解链。
扩增通用引物退火多重PCR引物特异性引物探针杂交兼容性检测标签生物检测领域多重PCR扩增病原体核酸靶标基因反应条件扩增效率特异性强一步PCR 靶基因变性富集解链偏斜引物灵敏保证

[发明专利]一种植物基因启动子BSP片段的高效扩增方法-CN201910181512.5在审
发明人：薛涛;晁秋杰;段永波;朱艳芳;藤井通;薛建平;盛玮;张爱民 -专利权人：淮北师范大学
申请日： 2019-03-11 - 公布日： 2019-05-03 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明属于分子生物技术领域，特别涉及一种植物基因启动子BSP片段的高效扩增方法，包括以下步骤：根据基因启动子的GC岛和高GC含量区域设计并人工合成相应的引物对数；选择最外侧的两端引物组合对基因启动子进行第一轮PCR扩增，高保真酶扩增33个循环，得第一轮PCR产物；第一轮PCR产物用水稀释10倍体积作为模板，选择靠内侧的两端引物组合进行第二轮PCR扩增，高保真酶扩增35个循环，得扩增产物。本发明提高了植物基因启动子BSP片段的扩增效率，为重亚硫酸盐测序法分析植物基因启动子甲基化修饰提高保障。
基因启动子扩增高保真酶两端引物种植物植物基因启动子分子生物技术甲基化修饰分析植物扩增产物扩增效率区域设计亚硫酸盐测序法稀释引物

[发明专利]一种数字PCR扩增设备-CN202211472638.6在审
发明人：蒙作艺;王红春;汪建德 -专利权人：深圳市锦瑞生物科技股份有限公司
申请日： 2022-11-17 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种数字PCR扩增设备，包括用于核酸扩增时保持温度恒定的保温模块；用于核酸扩增时实时检测温度的温度传感器；用于样本扩增之前封膜、分离样本的封膜模块；用于支撑整个装置、保持装置处于水平状态的底板；用于热量传递的加热块；用于核酸扩增时升温、降温的加热制冷装置；用于存放样本并可搬运的样本架。本发明采用温度传感器可以保持样本温度的均一性；采用加热制冷装置可以更好的把控温度，节约扩增时间，更改样本架的大小可以提高样本扩增效率，封膜模块可以实现防止交叉污染，整体设备体积比较小，但是却有着极高的通量
一种数字 pcr 扩增设备

[发明专利]一种用于核酸提取扩增的检测装置-CN202211061816.6在审
发明人：龚培超;钱力;龚靖轩 -专利权人：汇鸿健康（苏州）有限公司
申请日： 2022-09-01 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于核酸提取扩增的检测装置，包括承载平台、进样模块、破孔模块、封口模块、移液换向模块、温变扩增模块、超声波破壁混匀模块、磁珠捕获模块；核酸提取扩增试剂盒通过进样模块依次经过破孔模块、移液换向模块、超声波破壁混匀模块、磁珠捕获模块、封口模块以及温变扩增模块后完成对采样样本的提取与扩增。解决了核酸检测必须依赖P2实验室的问题；全自动全过程无人工干预，节省宝贵检测人力资源；全过程全封闭，零气溶胶污染，假阴性假阳性结果几率大大降低；薄板式薄膜加热，扩增效率大大提升，可比传统技术节省一半时间；支持传统变温和新兴的恒温扩增技术，兼容性、检测灵活性强；集成度高且体积减小，方便携带。
一种用于核酸提取扩增检测装置

[发明专利]一种用于鼻腔菌群检测的方法及检测试剂盒-CN201810927305.5有效
发明人：邓浩浩;郭弘妍;王辉;邢婉丽;程京 -专利权人：博奥生物集团有限公司
申请日： 2018-08-15 - 公布日： 2022-03-04 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明提了一种用于样本菌群检测的成套引物，包括扩增细菌16S rDNA的V4‑V5区域的引物和扩增细菌16S rDNA的V1‑V9区域的引物；本发明先采用扩增效率高、特异性强、人源同源性低的V1‑V9引物先对16S rDNA片段进行富集，然后利用巢式PCR扩增出目的区段V4V5双片段，这样克服了直接用V4V5区段扩增引物与人源基因组序列同源性较高，在针对人源gDNA含量较高的鼻腔拭子样本进行扩增时，会出现严重的非特异扩增现象的问题
一种用于鼻腔检测方法试剂盒

[发明专利]SNP检测技术拆分混合样本的方法-CN201710599784.8有效
发明人：曹彦东;赵雪莹 -专利权人：安塞斯（北京）生物技术有限公司;上海市刑事科学技术研究院
申请日： 2017-07-21 - 公布日： 2021-03-09 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：该方法使用高通量基因测序平台(NGS)，通过扩增子测序同时检测多个单核苷酸多态性位点(SNPs)，能够解决刑事物证鉴定、民事司法鉴定、临床中遇到的双人混合样本无法拆分的问题。该方法的技术要点：1)为了保证扩增子扩增效率相对均一且稳定，经过严格条件设计和筛选，得到219个扩增子实现同一管中同时扩增。2)为了保证降解样本(160bp DNA片段长度)也能扩增成功，选择SNPs作为生物学标志物，SNPs位于140bp扩增子中部位置。
snp 检测技术拆分混合样本方法

[实用新型]一种改善温度均一性的PCR模块-CN202220055721.2有效
发明人：钟要齐;吕才树;吴林涛;邱一航 -专利权人：深圳麦科田生物医疗技术股份有限公司
申请日： 2022-01-10 - 公布日： 2022-08-26 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种改善温度均一性的PCR模块，包括扩增模块和用于调节扩增模块温度的温控部，所述扩增模块由导热金属材料制成，包括拼接的上半部和下半部，并于上半部和下半部之间夹设有均温加热层；所述扩增模块上均匀排布设置有用于放置反应杯的反应孔阵列本实用新型的PCR模块，可以提高扩增模块四周温度较低孔位的温度，使得扩增模块的整体温度差异控制在极小的范围内，保证了各个孔位的扩增效率的一致性，使检测结果更精准。
一种改善温度均一 pcr 模块

[发明专利]ADGRG1作为生物标志物在制备检测造血干细胞体外扩增效率试剂盒中的应用-CN202011330728.2在审
发明人：郭滨;陈燕丹;姚纯旭 -专利权人：上海交通大学医学院
申请日： 2020-11-24 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明提供ADGRG1作为生物标志物在制备检测造血干细胞体外扩增效率和移植效果的试剂或试剂盒中的应用。本发明发现了一个全新标志物ADGRG1可有效标记体外扩增培养应激条件下的功能性造血干细胞。一方面可以检测功能性造血干细胞的扩增效率，另一方面可以筛选促进ADGRG1阳性细胞群体的相关药物用于临床上造血干细胞的移植效率。
adgrg1 作为生物标志制备检测造血干细胞体外扩增效率试剂盒中的应用

[发明专利]一种利用尿苷提高聚合酶链式反应扩增效果的方法-CN201010622361.1有效
发明人：张治洲;郑嘉祺;徐仲;吕志伟;王有志 -专利权人：山东大正医疗器械股份有限公司
申请日： 2010-12-30 - 公布日： 2011-09-14 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：一种利用尿苷(Uridine)提高聚合酶链式反应(PCR)扩增效果的方法，涉及生物技术领域，该方法是在原有的PCR扩增方法基础上，通过向体系中添加一定量的尿苷来实现的。本发明优化扩增的效果明显，操作简便，易于掌握。
一种利用提高聚合链式反应扩增效果方法

[发明专利]KRAS基因检测试剂盒及检测方法-CN201710153617.0在审
发明人：盛司潼;姚瑶 -专利权人：广州康昕瑞基因健康科技有限公司
申请日： 2017-03-15 - 公布日： 2018-05-25 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本试剂盒针对KRAS 2号外显子、3号外显子区域的特定位点，设计了特异性的扩增引物序列，使得对待测位点的检测假阳性率低，灵敏度高，能够检测出突变比例为5%以上的基因突变；在含待测位点的KRAS核酸片段两端分别F接头和R接头获得文库分子，F接头和R接头上均含有扩增引物结合位点，当对多个含待测位点的KRAS核酸片段进行测序时，统一了对文库分子进行扩增的扩增引物，保证了扩增效率的一致性，降低了引物设计难度；R接头设计为发夹结构，能够对扩增产物的末端进行封闭，从而有效避免F接头连接在R接头上，提高了连接效率。
测位检测核酸片段检测试剂扩增引物文库分子分子生物学领域扩增引物序列发夹结构基因工程基因突变假阳性率接头连接接头设计结合位点扩增产物扩增效率连接效率引物设计灵敏度试剂盒子区域测序扩增位点突变封闭保证统一

[发明专利]一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法-CN201611174200.4有效
发明人：李凡;李月月;谭冠林;肖龙;马龑;熊锋;兰平秀;陈小姣;何英云;谭松涛 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2016-12-19 - 公布日： 2020-02-04 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：，反向引物TobamodR：5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’；本发明中的检测引物是基于烟草花叶病毒属中的32种病毒基因组保守区序列进行设计，用该属中的7种病毒对该对引物进行扩增效果验证，扩增效果均较好；从而建立了一种能够检测至少7种烟草花叶病毒属病毒的通用检测引物及方法，且具有检测效率高、灵敏度高、成本低的特点。
烟草花叶病毒通用检测引物病毒扩增效果保守区序列病毒基因组分子生物学反向引物检测引物正向引物对引物灵敏度检测验证