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[发明专利]带有GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体及其构建方法-CN202311205212.9在审
发明人：李凡;何鹏;兰平秀;谭冠林;陈小姣;罗恒明 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2023-09-19 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明涉及一种带有GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体及其构建方法，属于植物病毒学和基因工程领域。本发明中带GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体，是利用酵母重组的方法，将PMNV全基因组RNA对应的cDNA全长序列克隆至pCB301‑HDV‑2µ载体的双35S启动子和终止子NOS之间，并把绿色荧光蛋白报告基因插入到PMNV的NIb蛋白和CP蛋白之间，即获得pCB301‑PMNV‑GFP重组载体。本发明利用酵母同源重组技术构建的PMNV侵染性克隆载体是重楼上植物病毒的第一个侵染性克隆，本发明中构建的pCB301‑PMNV‑GFP载体能稳定高效系统侵染模式植物本生烟，并在本生烟体内高效表达GFP。
带有 gfp 基因重楼花叶坏死病毒侵染克隆载体及其构建方法

[发明专利]PEMV-1、BYMV、BrYV一步法多重RT-PCR检测试剂盒及检测方法-CN202311042146.8在审
发明人：蔡红;余淑婷;李凡;兰平秀;陈小姣;谭冠林 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2023-08-18 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明目的在于提供一种PEMV‑1、BYMV、BrYV一步法多重RT‑PCR检测引物组、试剂盒及方法，涉及病毒检测技术领域，本发明可同时检测PEMV‑1、BYMV、BrYV三种病毒。具体包括：提取待测样品总核酸作为模板，采用针对PEMV‑1、BYMV、BrYV三种病毒的特异性检测引物，一步法多重RT‑PCR技术扩增目的片段，可高效、快速、灵敏地检测出样品中的PEMV‑1、BYMV、BrYV。本发明具有操作简单高效、节省时间、节约成本、稳定性高等优点，为PEMV‑1、BYMV、BrYV的快速检测和防治提供技术支持。
pemv bymv bryv 一步法多重 rt pcr 检测试剂盒方法

[发明专利]一种PEMV-1和PEMV-2的RT-PCR同步检测试剂盒及检测方法-CN202211241715.7在审
发明人：李凡;龙昌芳;兰平秀;陈小姣;谭冠林 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2022-10-11 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明申请是关于一种PEMV‑1和PEMV‑2的RT‑PCR同步检测试剂盒及检测方法，基于一步法多重RT‑PCR检测方法，属于植物保护领域。本发明通过设计PEMV‑1、PEMV‑2两种病毒的特异性检测引物，并采用CTAB法提取染病样品总核酸作为模板，利用一步法多重RT‑PCR技术实现对PEMV‑1、PEMV‑2两种病毒的同步检测。通过对反应体系和反应条件的优化，该方法可以高效、快速、准确地实现对PEMV‑1、PEMV‑2两种病毒的特异性检测，较传统RT‑PCR检测方法一次只能检测单一病毒更具高效性，且显著降低了检测成本，极大地节约了检测时间。
一种 pemv rt pcr 同步检测试剂盒方法

[发明专利]基于PEMV-1和PEMV-2侵染性克隆高效筛选抗病毒种质资源的方法-CN202211567418.1在审
发明人：陈小姣;陈泓霖;谢敏;兰平秀;谭冠林;李凡 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2022-12-07 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于PEMV‑1和PEMV‑2侵染性克隆高效筛选抗病毒种质资源的方法；包括：农杆菌浸根步骤。本发明具有以下优点：1、本发明方法操作简便，具有比人工摩擦接种更省时、更方便的优点；2、本发明方法可以通过调节侵染性克隆的浓度来控制病毒的接种量，同一批次的不同植株之间接种量误差小；3、本发明方法中一种侵染性克隆只具有一种病毒的侵染活性，解决了毒源不纯的问题，满足了要求特定病原接种的实验条件；4、本发明方法接种效果好，对植株的侵染率高；5、本发明方法使植株获毒时间早，病毒在植株体内积累的时间长；6、本发明方法成本相对较低，接种操作时间短。
基于 pemv 侵染克隆高效筛选抗病毒种质资源方法

[发明专利]一种同步检测ZYMV、PRSV和ZTMV的方法-CN202010294114.7有效
发明人：李凡;柳勤海;肖龙;谭冠林;陈小姣;兰平秀 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2020-04-15 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种同步检测ZYMV、PRSV和ZTMV的方法，属于植物保护领域，本发明通过设计ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒的特异性检测引物，并采用CTAB法提取感病样品总核酸作为模板，利用一步法多重RT‑PCR技术实现同时检测ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒。通过反应体系与反应条件的优化，该方法可以高效、准确实现对ZYMV、PRSV和ZTMV 3种病毒的特异性检测，较传统RT‑PCR检测过程中只能检测单一病毒具有更高的效率，降低了检测成本，又可以保证检测结果的准确性，在上述3种病毒病检测中具有广阔的应用前景。
一种同步检测 zymv prsv ztmv 方法

[实用新型]一种多功能教育技术学科用展示讨论装置-CN201920813601.2有效
发明人：郭睿南;谭冠林 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2019-05-31 - 公布日： 2020-08-25 - 主分类号： G09B5/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种多功能教育技术学科用展示讨论装置，包括边框，所述边框的左右两侧均固定装配有支架，所述边框的内壁固定装配有第一写字板，所述第一写字板的前侧面底端开设有滑槽，所述滑槽的内壁左右两侧均滑动卡接有滑块，所述滑块的前表面固定装配有第二写字板。通过边框和支架的配合，通过第一写字板和第二写字板的配合，通过滑槽和滑块的配合，滑块和滑槽的配合能够调节第二写字板在第一写字板上的位置，在学习的过程中进行分组讨论时，在进行对比的过程中移动至中间的位置进行对比讨论，使用扩音器说出讨论的看法，便于更多的人听见，能够促进学生之间对自身看法的交流，锻炼学生的语言组织能力，实用性能更强。
一种多功能教育技术学科展示讨论装置

[发明专利]一种同步检测PnVY和TYLCCNV的方法-CN201911262660.6在审
发明人：李凡;杨馨;柳勤海;谭冠林;兰平秀;陈小姣 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2019-12-11 - 公布日： 2020-04-24 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种同步检测PNVY和TYLCCNV的方法，属于植物保护领域，本发明涉及到的两种病毒的核酸类型不同，设计合成检测PnVY和TYLCCNV的引物，并筛选适用于两种病毒复合侵染的特异性引物；用CTAB法提取染病植物组织的总核酸，既能保证所提核酸中有DNA和RNA，也能降低检测成本；优化一步法双重检测体系，达到对PnVY和TYLCCNV的同步快速检测。该方法整个检测过程所用时间短，减少了试剂污染和反应中的影响因素，能够有效单一或复合识别PnVY、TYLCCNV，保证了检测结果的准确性。
一种同步检测 pnvy tylccnv 方法

[发明专利]一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法-CN201710182795.6有效
发明人：兰平秀;李如慧;李凡;李月月;谭冠林;马向丽;陈小姣;马龑;谭松涛;熊锋;何英云 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2017-03-24 - 公布日： 2020-02-04 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种同步检测SPVG、SPLV和SPMMV的方法，属于植物保护领域；通过分别设计合成SPVG、SPLV和SPMMV的正向引物、反向引物和探针，建立同时检测三种病毒的实时荧光多重RT‑PCR方法，检测植物细胞色素氧化酶基因（COX）的引物和探针被作为内参纳入实时荧光多重RT‑PCR的体系构建，避免因模板核酸质量差导致的假阴性结果。本发明对SPVG的检测灵敏度达到10
一种同步检测 spvg splv spmmv 方法

[发明专利]一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法-CN201611174200.4有效
发明人：李凡;李月月;谭冠林;肖龙;马龑;熊锋;兰平秀;陈小姣;何英云;谭松涛 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2016-12-19 - 公布日： 2020-02-04 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学和病毒学技术领域，具体涉及一种烟草花叶病毒属病毒通用检测引物及其方法；所述的烟草花叶病毒属病毒通用检测引物对序列为：正向引物TobamodF：5’‑TKGAYGGNGTBCCNGGNTGYGG‑3’，反向引物TobamodR：5’‑ACNGAVTBNABCTGTAATTGCTAT‑3’；本发明中的检测引物是基于烟草花叶病毒属中的32种病毒基因组保守区序列进行设计，用该属中的7种病毒对该对引物进行扩增效果验证，扩增效果均较好；从而建立了一种能够检测至少7种烟草花叶病毒属病毒的通用检测引物及方法，且具有检测效率高、灵敏度高、成本低的特点。
烟草花叶病毒通用检测引物病毒扩增效果保守区序列病毒基因组分子生物学反向引物检测引物正向引物对引物灵敏度检测验证

[发明专利]利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法-CN201410544959.1有效
发明人：李凡;张水英;李月月;李梅蓉;谭冠林;杨耀珠;马庆 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2014-10-16 - 公布日： 2015-01-07 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明提供一种利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法，属于植物保护领域。该发明通过对灰飞虱的采集和研磨后，利用水稻条纹病毒单克隆抗体，建立检测单头介体灰飞虱携带水稻条纹病毒的dot-ELISA体系。该检测方法灵敏度高、特异性强，适用于大批量的单头灰飞虱样品检测，且不需要特殊仪器设备，具有结果判定简单易行、检测结果便于长期保存等特点，可对田间灰飞虱携带水稻条纹病毒的带毒率进行大规模调查和检测，为田间水稻条纹叶枯病的爆发流行进行预测预报并采取相应的防控措施提供技术支撑。
利用 dot elisa 检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒方法

[发明专利]同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法-CN201210492173.0无效
发明人：李凡;刘芳;陈海如;谭冠林;兰平秀;王海宁;李晓静;朱静;吴德喜;蔡红 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2012-11-28 - 公布日： 2013-03-06 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法，属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物，CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA，采用一步法四重RT-PCR，达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强，能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA，既能保证所提RNA的质量，也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成，极大地节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点，能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测，具有广阔的应用前景。
同步检测 tbtv tvdv sat tvdvarna 方法

[发明专利]同步检测SPFMV、SPVC、SPVG和SPV2的方法-CN201110156722.2无效
发明人：李凡;陈海如;许东林;王海宁;左瑞娟;谭冠林;包改丽 -专利权人：云南农业大学
申请日： 2011-06-10 - 公布日： 2011-11-02 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种同步检测SPFMV、SPVC、SPVG和SPV2的方法，属植物保护领域。通过分别设计合成SPFMV、SPVC、SPVG和SPV2特异性的正向引物和四种病毒的通用反向引物，CTAB法提取病组织总核酸，采用一步法四重RT-PCR，达到对这四种病毒的同步检测。所设计的引物特异性强，且四种病毒共用一条反向引物，显著减少了引物间的相互作用。将CTAB法应用到RNA病毒侵染植物组织的核酸提取中，既能保证RNA质量，又有效降低了检测成本。反转录与多重PCR一步完成，节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点，能一次实现四种甘薯病毒的同步检测，具有广阔的应用前景。
同步检测 spfmv spvc spvg spv2 方法

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