[发明专利]一种筛选黑果枸杞棘刺相关MSAP位点的方法在审
| 申请号： | 201810286524.X | 申请日： | 2018-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN108441545A | 公开（公告）日： | 2018-08-24 |
| 发明（设计）人： | 王钦美;王皓;周永斌;秦胜金;崔建国;林梅 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6855;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人： | 张铁生;刘延军 |
| 地址： | 110866 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种筛选黑果枸杞棘刺相关MSAP位点的方法，它包括以下步骤：1）获得遗传背景一致的无性系组培植株并移栽；2）通过盆栽控水/营养获得遗传背景一致的黑果枸杞无刺和有刺型；3）提取有刺和无刺黑果枸杞叶片总DNA；4）对提取的总DNA进行双酶切并连接接头；5）对酶切连接产物进行PCR预扩增；6）对预扩增产物进行选择性PCR扩增；7）选择性PCR扩增产物的毛细管电泳；8）筛选无刺节叶片特异性MSAP位点；9）特异性条带的回收、测序和分析；本发明筛选出的黑果枸杞棘刺相关MSAP位点稳定，为培育黑果枸杞无刺品种、调控黑果枸杞株型和产量打下基础；可以丰富植物抗旱理论、植物表型可塑性理论。 | ||
| 搜索关键词： | 黑果枸杞 位点 棘刺 筛选 选择性PCR 扩增产物 遗传背景 总DNA 叶片 毛细管电泳 特异性条带 连接产物 连接接头 营养获得 植物表型 植物抗旱 盆栽 植株 可塑性 双酶切 无性系 预扩增 测序 刺型 控水 扩增 酶切 株型 组培 移栽 回收 调控 培育 分析 | ||
【主权项】：
1.一种筛选黑果枸杞棘刺相关MSAP位点的方法，它包括以下步骤：1）获得遗传背景一致的无性系组培植株并移栽；2）通过盆栽控水/营养获得遗传背景一致的黑果枸杞无刺和有刺型；3）提取有刺和无刺黑果枸杞叶片总DNA；4）对提取的总DNA进行双酶切并连接接头；5）对酶切连接产物进行PCR预扩增；6）对预扩增产物进行选择性PCR扩增；7）选择性PCR扩增产物的毛细管电泳；8）筛选无刺节叶片特异性MSAP位点；9）特异性条带的回收、测序和分析。
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- 2019-05-13 - 2019-09-20 - C12Q1/6858
- 本发明公开了一种OsNramp5基因特定位点突变的高分辨率溶解曲线检测方法，通过敲除OsNramp5基因可快速创制低镉水稻品系，在常规CRISPR/Cas9介导的基因敲除中，转化植株当代突变体的鉴定和后代去除标记纯合突变体基因型的筛选若采用常规的测序方法进行检测，耗时费力，成本较高。为了克服如上所述缺点，本发明提供了一种利用CRISPR/Cas9敲除OsNramp5基因的工作中，可以在转化植株当代快速检测是否发生突变，并在突变体分离后代快速鉴定纯合突变个体的高分辨率溶解曲线检测方法。本发明提供的方法具有通量大，速度快，成本低的优点。
- 一种基于二代测序的30个Multiple-allele SNP位点的检测技术体系-201910519003.9
- 朱波峰;刘艳芳;靳小业;解通 - 南方医科大学
- 2019-06-17 - 2019-09-20 - C12Q1/6858
- 本发明属于法医遗传学应用研究领域，具体涉及一种基于二代测序（Next Generation Sequencing，NGS）的用于法医学个体识别和亲缘关系鉴定的30个Multiple‑allele SNP位点的检测技术体系的研发及其检测技术方法。本发明应用NGS平台（illumina NOVASEQ）对30个Multiple‑allele SNP位点进行深度平行测序，可实现同时对多个样本的30个目标区域的测序分析，节约人力、物力和财力，提到了检测效率；PCR产物片段分布在58‑139 bp，体系适用于法医降解样本的检测；根据Multiple‑allele SNP位点非二等位基因的特点及基于序列内部碱基深度的读取判断，可提高对法医混合检材的分析能力。该检测体系在法医学领域具有较高的应用价值。
- Sanger法检测CNIs药物基因多态性的试剂盒及其使用方法-201910603660.1
- 叶啟发;李玲;赵慧佳;陈彬尧;钟自彪;王彦峰;叶少军 - 武汉大学
- 2019-07-05 - 2019-09-20 - C12Q1/6858
- 本发明公开了一种Sanger法检测CNIs药物基因多态性的试剂盒及其使用方法，包括以下引物及试剂：前扩增引物：CCATACAGGCAACATGACTTAG；后扩增引物：CACAGGGAGTTGACCTTCATAC；Sanger法PCR扩增内引物：GCAGCATTTAGTCCTTGTGA；试剂盒中的Mix、bigdye、ddH2O其它常规试剂。所述试剂盒使用方法包括以下步骤：人基因组DNA提取；普通PCR扩增体系及程序：普通PCR扩增产物纯化：Sanger法PCR扩增体系及程序：Sanger法PCR扩增产物纯化及结果分析。该试剂盒操作简便、检测成本低、所需样品量小、快捷、准确，符合临床大样本检测要求。
- 一种水稻稻曲病抗性检测方法-201610495879.0
- 孟剑华;许建中;安剑石 - 青岛欧易生物科技有限公司
- 2016-06-29 - 2019-09-20 - C12Q1/6858
- 本发明公开一种水稻稻曲病抗性检测方法，本发明选育水稻稻曲病抗性品种杂交种F1，并对杂交种F1通过分子标记得到抗水稻稻曲病的基因位点，并确定水稻稻曲病在第11号染色体上的位置。本发明涉及的水稻稻曲病抗性检测方法，通过检测水稻品种第11号染色体上引物标记的带型数据，评估其对水稻稻曲病的抗性，大大提高抗稻曲病水稻的选择效率。
- 一种小麦γ-醇溶蛋白启动子区域甲基化的检测方法-201610992110.X
- 周正富;刘聪聪;秦毛毛;雷振生;吴政卿;常阳;王亚欢;晁岳恩;王美芳;何盛莲;李文旭;杨攀;汪庆昌;刘加平;徐福新;李巍;张琨 - 河南省农业科学院小麦研究所
- 2016-11-11 - 2019-09-17 - C12Q1/6858
- 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种针对小麦γ‑醇溶蛋白启动子区域是否被甲基化的检测方法。所述小麦γ‑醇溶蛋白为γ‑醇溶蛋白TaWG04，所述启动子为启动γ‑醇溶蛋白TaWG04进行翻译表达的启动子pTaWG04。pTaWG04启动子的‑749bp处胞嘧啶和‑729bp处胞嘧啶发生甲基化修饰时，抑制γ‑醇溶蛋白TaWG04的表达。本申请所提供的甲基化检测方法特异性针对小麦γ‑醇溶蛋白启动子区域进行检测，具有检测周期短、特异性高、准确度高等优点；可对启动子是否存在甲基化进行判定，进而可有效识别γ‑醇溶蛋白TaWG04在小麦品种中的表达情况，从而为小麦品质改良奠定理论依据和应用基础。
- 一种基于DNA片段富集及测序技术的产前无创胎儿染色体检测系统-201811312387.9
- 王海龙;唐元华 - 苏州首度基因科技有限责任公司
- 2018-11-06 - 2019-09-13 - C12Q1/6858
- 本发明公开了一种基于DNA片段特异性富集检测产前胎儿染色体异常的方法，该方法通过获取孕妇外周血并通过DNA富集技术得到游离DNA，富集DNA操作中使用探针杂交捕获的富集方法，该富集方法同时富集母亲和胎儿的特异片段，而无需仅对胎儿DNA进行富集，该检测方法不仅实现了胎儿整条染色体含量的检测，还实现了胎儿局部染色体含量的检测，该方法应用到孕妇血浆游离DNA检测胎儿染色体异常精确度高。
- 专利分类
