[发明专利]一种调控根瘤衰老的半胱氨酸蛋白酶基因及制备方法和应用无效
申请号: | 201210044037.5 | 申请日: | 2012-02-24 |
公开(公告)号: | CN103290040A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 张忠明;苟洪兰;朱辉;袁松丽;陈桃 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/57 | 分类号: | C12N15/57;C12N9/50;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种调控根瘤衰老的半胱氨酸蛋白酶基因及制备方法和应用,该方法利用紫云英已知的半胱氨酸蛋白酶基因比对日本百脉根基因组序列库,在网上进行详细分析比对后以起始密码子为起点,终止密码子为终点设计特异性强的引物进行基因克隆,克隆的片段经过测序分析及比对分析,证实本发明成功的从百脉根基因组和cDNA中克隆出了调控根瘤衰老的半胱氨酸蛋白酶基因。半胱氨酸蛋白酶基因在豆科植物上中的应用,利用组织化学定位技术研究了该基因启动子的表达模式,该基因在根瘤衰老过程中的功能。结果表明,与对照植株比较,RNAi植株根瘤变大,固氮酶活增高,根瘤延迟衰老,根瘤有效固氮时间延长,植株生长更加健壮,在豆科作物上具有应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 调控 根瘤 衰老 半胱氨酸 蛋白酶 基因 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种分离的半胱氨酸蛋白酶基因LjCyp5,其序列为SEQ NO:1所示的核苷酸序列。
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- 王学锋;武文漫;丁秋兰;董飚 - 上海交通大学医学院附属瑞金医院;四川大学
- 2016-10-14 - 2017-03-15 - C12N15/57
- 本发明涉及一种高活性凝血因子IX突变体、重组蛋白与融合蛋白的制备与应用,突变体核苷酸序列如SEQ ID NO1所示。制备方法包括如下步骤(1)将凝血因子IX基因连入载体中,得到重组载体;(2)将上述重组载体转化宿主细胞,得到表达突变凝血因子IX蛋白细胞克隆;(3)于无血清培养基中连续灌流培养上述细胞克隆,诱导重组高活性凝血因子IX突变蛋白的表达;(4)分离纯化、过滤,最后灌装、冻干,即得。本发明证实了IX突变Arg384Gln确实导致凝血因子IX活性升高,而且没有导致除凝血机制异常之外的其他危害,对人体是安全的,打破了现有研究的技术偏见,具有很好的基因治疗和替代治疗前景。
- 一种角蛋白酶及其基因序列与应用方法-201610960882.5
- 龚劲松;史劲松;苏畅;许正宏;李恒 - 江南大学
- 2016-11-04 - 2017-01-25 - C12N15/57
- 本发明提供了一种基于宏基因组技术挖掘的角蛋白酶及其基因编码序列与应用方法。该角蛋白酶基因全长1,152bp,编码384个氨基酸;以大肠杆菌E.coli为例,成功实现了该角蛋白酶基因的异源表达。该角蛋白酶基因的获取方法方便可行,将该基因进行重组表达,构建的重组菌株经过诱导可以分泌角蛋白酶,能有效水解可溶性角蛋白、酪蛋白、羊毛、羽毛等底物,在角蛋白废弃物生物降解、饲料加工、洗涤添加剂、材料生物合成、透皮药物制备等领域具有良好的应用价值。该角蛋白酶的最适反应温度为55℃,最适反应pH为10.0,且该角蛋白酶对表面活性剂表现出较好的耐受性,酶稳定性较好。重组菌发酵周期短,适合于工业化大规模的生产。
- 欧美杂交葡萄品种巨峰抗逆基因VlAP17及其应用-201410369675.3
- 王西平;郭荣荣 - 西北农林科技大学
- 2014-07-30 - 2017-01-18 - C12N15/57
- 本发明中公开了一种欧美杂交葡萄品种巨峰抗逆基因VlAP17及其应用。所公开的基因完整开放阅读框序列全长1074bp,编码358个氨基酸。发明人构建了pCAMBIA2300‑35S‑VlAP17过量表达载体,通过花絮浸染法将其导入模式植物拟南芥。在拟南芥中过量表达VlAP17明显提高了拟南芥对于渗透胁迫,失水处理,长期干旱以及盐胁迫的耐受力。所公开的应用是基因VlAP17用于提高植株的抗盐胁迫能力和干旱胁迫能力的应用。
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