本发明的目的是提供一种猪非典型瘟病毒APPV抗体检测ELISA试剂盒,以及一种猪非典型瘟病毒蛋白的生产方法,可以高效的表达猪非典型瘟病毒蛋白。本发明首先提供一种猪非典型瘟病毒蛋白的基因,能在大肠杆菌中高效表达猪非典型瘟病毒蛋白,该基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.2;本发明再一个方面提供一种猪非典型瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒,包含有大肠杆菌表达的,氨基酸序列为SEQ ID NO:5的猪非典型瘟病毒E2蛋白作为抗原包被的ELISA板。本发明提供了大量制备猪非典型瘟病毒E2蛋白的方法,并提供了以猪非典型瘟病毒E2蛋白为抗原的ELISA抗体检测试剂盒,该试剂盒具有较高的灵敏性、特异性、重复性,可以大规模推广应用。
本发明公开了一种检测鉴定非典型猪瘟病毒(APPV)的PCR引物及检测方法与检测试剂盒。本发明通过参考比对非典型猪瘟病毒的基因组序列,根据非典型猪瘟病毒cap蛋白上的保守序列,设计了一对检测非典型猪瘟病毒的PCR引物,所述PCR上下游所述引物APPV‑F/R的序列依次如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.2所示;并提供了一种猪非典型猪瘟病毒PCR检测方法及试剂盒。本发明的引物和检测方法能快速、方便、高效地检测鉴定非典型猪瘟病毒,特异性好,灵敏度高且检测方法操作简便高效,便于临床检测和方便开展流行病学调查,具有较大的应用前景。
本发明公开了一种基于E2蛋白检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒,包括SEQ ID NO.1所示序列的猪非典型瘟病毒E2蛋白包被的反应板、酶标抗体、显色液、终止液、阳性血清和阴性血清。本发明首次创建了检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒,而且该试剂盒可快速、特异、灵敏地检测血清中猪非典型瘟病毒的抗体,其检测血清抗体灵敏度为1:1000。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,适用于猪非典型瘟病毒感染的监测、流行病学调查以及兽医临床样本的检测,适合大范围推广应用。
本发明公开了一种基于Npro蛋白检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒,包括SEQ ID NO.1所示序列的猪非典型瘟病毒Npro蛋白包被的反应板、酶标抗体本发明首次创建了检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒,而且该试剂盒可快速、特异、灵敏地检测血清中猪非典型瘟病毒的抗体,其检测血清抗体灵敏度为1:1000。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,适用于猪非典型瘟病毒感染的监测、流行病学调查以及兽医临床样本的检测,适合大范围推广应用。