本发明公开了一种猪非典型瘟病毒GD2株反向遗传操作系统及其建立方法和应用。该系统包括重组质粒1和重组质粒2，重组质粒1是将SEQ ID NO：1所示的由启动子序列和猪非典型瘟病毒GD2株基因组全长cDNA序列的5’半长片段依次连接组成的序列克隆到载体中构建得到；重组质粒2是将SEQ ID NO：2所示的由猪非典型瘟病毒GD2株基因组全长cDNA序列的3’半长片段和酶切位点序列依次连接组成的序列克隆到载体中构建得到。本研究的猪非典型瘟病毒GD2株反向遗传操作系统的建立，为研究猪非典型瘟病毒的复制、组装、入侵机制和致病机理等提供了研究基础，为进一步开展疫苗的研制和病毒载体相关基础研究提供了可行的技术平台。
本发明公开了一种基于E2蛋白检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，包括SEQ ID NO.1所示序列的猪非典型瘟病毒E2蛋白包被的反应板、酶标抗体、显色液、终止液、阳性血清和阴性血清。本发明首次创建了检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，而且该试剂盒可快速、特异、灵敏地检测血清中猪非典型瘟病毒的抗体，其检测血清抗体灵敏度为1：1000。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，适用于猪非典型瘟病毒感染的监测、流行病学调查以及兽医临床样本的检测，适合大范围推广应用。
本发明公开了一种基于Npro蛋白检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，包括SEQ ID NO.1所示序列的猪非典型瘟病毒Npro蛋白包被的反应板、酶标抗体、显色液、终止液、阳性血清和阴性血清。本发明首次创建了检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，而且该试剂盒可快速、特异、灵敏地检测血清中猪非典型瘟病毒的抗体，其检测血清抗体灵敏度为1：1000。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，适用于猪非典型瘟病毒感染的监测、流行病学调查以及兽医临床样本的检测，适合大范围推广应用。
本发明公开了一种基于猪非典型瘟病毒E2基因的荧光定量RT‑PCR检测试剂盒，该试剂盒包含1对检测引物，引物序列如SEQ ID NO1～2所示。本发明的试剂盒可快速、特异、灵敏地检测猪非典型瘟病毒，最低检测浓度为10个拷贝/ul的猪非典型瘟病毒 RNA。本发明试剂盒使用方法简单、反应结果易于判断，特异性好，适用于疾病监测、现场应急及临床样品的检测，适合大范围推广应用。
