本发明公开了一种热稳定性提高的谷氨酰胺转氨酶，属于生物领域和食品领域。本发明的谷氨酰胺转氨酶变体为热稳定性改善的酶，包含对应于SEQ ID NO.1所示的多肽的第1‑4位的取代。本发明的谷氨酰胺转氨酶变体可以在食品处理、加工和转化等方面进行应用，可以用于保持或改善食品的品质、稠度、弹性、水分或粘度。热稳定性改善的谷氨酰胺转氨酶变体更利于其在严苛的工业环境中稳定应用，如人造肉肉糜加工及肉丸加工。
本发明公开了一种催化活性和热稳定性提高的谷氨酰胺转氨酶变体，属于生物领域和食品领域。本发明的谷氨酰胺转氨酶变体为热稳定性改善的酶，包含对应于SEQ ID NO.1所示的多肽的第287位的取代。本发明的谷氨酰胺转氨酶变体可以在食品处理、加工和转化等方面进行应用，可以用于保持或改善食品的品质、稠度、弹性、水分或粘度。热稳定性改善的谷氨酰胺转氨酶变体更利于其在严苛的工业环境中稳定应用，如人造肉肉糜加工及肉丸加工。
本发明提供了一种转氨酶突变体及手性胺化合物的制备方法。其中，该转氨酶突变体，包括(a)具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的蛋白质；或(b)具有SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的蛋白质；或(c)在(b)中的氨基酸序列的如下至少一个位点：Y89、L380、N86、Y85、T91、P83、K90、S417、S424、F301、G164、T452等，经过氨基酸突变且具有转氨酶功能的蛋白质；(d)与(a)、(b)或(c)中任一项限定的氨基酸序列具有80％以上同源性且具有转氨酶功能的蛋白质。能够解决现有技术中的转氨酶活性低的问题，适用于酶催化领域。
本发明公开了一种基于共进化网络的ω‑转氨酶突变体以及制备方法和应用。该ω‑转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。本发明获得的ω‑转氨酶突变体的半失活温度为42.2℃和43.8℃，比野生型酶提高3.7℃和5.3℃，在40℃下的半衰期为20.6min和26.0min，比野生型酶延长13.7min和19.1min。本发明利用蛋白质共进化网络指导ω‑转氨酶的研究，将生物信息学与计算机软件相结合，预测影响ω‑转氨酶结构和功能作用的重要位点，构建突变文库，以获得酶活及热稳定进一步改善的突变体，有效增加突变成功率，提高筛选工作量
本发明公开了ω‑转氨酶突变体及其制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。ω‑转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.10或SEQ ID NO.12所示。本发明还提供了编码ω‑转氨酶突变体的基因、包含该基因的表达单元、重组质粒和转化子。本发明制备方法利用NCBI数据库和BLAST软件比对筛选获得与ω‑转氨酶同源的氨基酸序列，通过Weblogo程序得到序列一致性结果，并结合ω‑转氨酶的序列确定需要突变的氨基酸残基位点，通过定点突变技术进行实验验证
本发明公开了一株重组茂原链霉菌及其在生产谷氨酰胺转氨酶中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产谷氨酰胺转氨酶的重组茂原链霉菌smY2019‑nC，此重组茂原链霉菌smY2019‑nC是通过在茂原链霉菌smY2019的基因组上整合若干核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的谷氨酰胺转氨酶基因表达框获得的；将此重组茂原链霉菌smY2019‑nC接种至发酵培养基中发酵72h，即可使发酵液中谷氨酰胺转氨酶的酶活高达40U/mL，较野生型茂原链霉菌smY2019提高了100％，因此，此重组茂原链霉菌smY2019‑nC在生产谷氨酰胺转氨酶上具有极高的应用前景。
