本发明公开了一种4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体，所述4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体由大肠杆菌(Escherichia coli)来源的野生型4HPA3H酶经过突变所得，野生型4HPA3H酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，突变方式为以下一种：(1)I157L；(2)A211D；(3)I157L/A211D。本发明4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体，其中1157L、A211D两种突变体全细胞催化白藜芦醇活性相对于WT提高了1.84和2.07倍，同时将两个位点进行叠加所得的突变体I157L/A211D全细胞催化白藜芦醇活性相较于WT提高了2.46倍。
本发明公开了一种通过DNA合成改组组合突变获得的ω‑转氨酶突变体，由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的野生型ω‑转氨酶进行点突变而得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为：F115L‑H210N。本发明通过DNA合成改组组合突变方法，将前期所得到的正向突变随机组合，通过实验验证，该方法可有效地提高正突变概率，提高实验效率及可行性，并筛选得到热力学稳定性明显优于野生酶的突变酶。
本发明公开了一种膜结合L‑氨基酸脱氨酶突变体及其应用。所述膜结合L‑氨基酸脱氨酶突变体由奇异变形杆菌来源的野生型PM1酶经过突变所得，野生型PM1酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，突变方式为以下任意一种：(1)G259W；(2)D340N。本发明PM1酶突变体由奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)来源的野生型PM1酶经过突变所得，其中G259W和D340N两种突变体全细胞催化L一苯丙氨酸转化数相对于WT提高了1.3倍和1.2倍。
本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体，由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得，野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为：E133Q、D224K、D231A、E253A或D268K中的至少一种。本发明筛选得到的ω‑转氨酶突变体在热力学稳定性、酶活性方面明显优于野生酶。
