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[发明专利]目的蛋白纯化方法-CN202010598841.2在审
发明人：赵雪冰;王妮 -专利权人：佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司
申请日： 2020-06-28 - 公布日： 2021-12-28 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：本发明提供了一种目的蛋白纯化方法。该方法包括：利用洗脱缓冲液对亲和层析柱进行洗脱处理，以便获得含有目的蛋白的洗脱液，所述亲和层析柱加载有待测样品，所述待测样品中含有待纯化目的蛋白，其中，所述洗脱缓冲液中含有醇类物质。利用本发明提供的方法进行目的蛋白亲和层析，可以显著提高洗脱蛋白质的纯度，抑制洗脱过程中多聚体的产生，提高蛋白回收率。
目的蛋白纯化方法

[发明专利]目的蛋白纯化方法-CN202010599784.X在审
发明人：赵雪冰;王妮 -专利权人：佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司
申请日： 2020-06-28 - 公布日： 2021-12-28 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：本发明提供了一种目的蛋白纯化方法。该方法包括：利用洗脱缓冲液对亲和层析柱进行洗脱处理，以便获得含有目的蛋白的洗脱液，所述亲和层析柱加载有待测样品，所述待测样品中含有待纯化目的蛋白，其中，所述洗脱缓冲液中含有糖类物质。利用本发明提供的方法进行目的蛋白亲和层析，可以显著提高洗脱蛋白质的纯度，抑制洗脱过程中多聚体的产生，提高蛋白回收率。
目的蛋白纯化方法

[发明专利]目的蛋白纯化方法-CN202010599848.6在审
发明人：赵雪冰;王妮 -专利权人：佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司
申请日： 2020-06-28 - 公布日： 2021-12-28 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：本发明提供了一种目的蛋白纯化方法。该方法包括：利用洗脱缓冲液对亲和层析柱进行洗脱处理，以便获得含有目的蛋白的洗脱液，所述亲和层析柱加载有待测样品，所述待测样品中含有待纯化目的蛋白，其中，所述洗脱缓冲液中含有非离子表面活性剂。利用本发明提供的方法进行目的蛋白亲和层析，可以显著提高洗脱蛋白质的纯度，抑制洗脱过程中多聚体的产生，提高蛋白回收率。
目的蛋白纯化方法

[发明专利]一种目的蛋白的表达载体、表达目的蛋白的方法-CN202310215818.4在审
发明人：刘定祥;刘思颖 -专利权人：岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
申请日： 2023-03-08 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种目的蛋白的表达载体，包括重组载体pXJ40‑TAT和重组载体pXJ40‑TAR。通过构建利用HIV‑1病毒的RNA序列TAR和其转录激活因子TAT，以及猴病毒SV40Ori构建的哺乳动物细胞高效表达载体在真核细胞中表达病毒蛋白的方法，有助于抗原的高效表达，进而开发预防病毒感染的有效疫苗；同时，本发明还公开了目的蛋白的表达方法。
一种目的蛋白表达载体方法

[发明专利]纯化目的蛋白的方法-CN202280017602.0在审
发明人： M·达肯特;P·莱登特;C·罗德里格兹 -专利权人：艾克斯普莱斯生物制药公司
申请日： 2022-02-28 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C07K1/16 文献下载
摘要：本披露提供了一种用于从革兰氏阴性细菌培养物中纯化目的生物分子(蛋白、DNA)的方法，该方法包括使用聚氧乙烯(10)异辛基环己基醚来消除内毒素，以及在色谱中使用pH在8.0和9.0之间且盐浓度为2.5M至
纯化目的蛋白方法

[发明专利]通过OmpF和目的蛋白的共表达的目的蛋白细胞外生产方法-CN200580051085.5有效
发明人：李相烨;崔钟铉 -专利权人：韩国科学技术院
申请日： 2005-07-15 - 公布日： 2008-07-16 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种向细胞培养基中分泌和生产目的蛋白的方法。更特别的是，本发明涉及与含E.coli外部膜蛋白F(OmpF)的重组表达载体共转化的微生物以及向细胞培养基中分泌含目的蛋白的重组载体，同时，经过培养微生物向细胞培养基中分泌和生产目的蛋白的一种方法。根据本发明，该目的蛋白可以以不与其它蛋白融合的纯态分泌到细胞培养基中，因此使有效的分离和纯化目的蛋白成为可能。
通过 ompf 目的蛋白表达细胞外生方法

[发明专利]利用sHSPs制备目的蛋白的方法-CN200580049905.7无效
发明人：李相烨;韩美正 -专利权人：韩国科学技术院
申请日： 2005-05-23 - 公布日： 2008-05-14 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种分离和纯化目的蛋白的方法，制备目的蛋白的方法、以及通过全细胞酶或部分纯化酶来进行生物转化的方法。根据本发明，如果把sHSPs施加到为了制备目的蛋白而进行的培养、分离和纯化过程中，通过防止蛋白酶解而导致蛋白损失从而获得高产率。同样地，如果把sHSPs加入到采用了全细胞酶或部分纯化酶的反应过程中，可以通过防止由蛋白酶造成的酶损失来提高采用酶所进行的生物转化的产率。
利用 shsps 制备目的蛋白方法

[发明专利]一种目的蛋白制备方法及其用途-CN201210467001.8有效
发明人：任宏伟;章永磊;邹有土;凡复;汤黎娜 -专利权人：厦门北大之路生物工程有限公司
申请日： 2012-11-19 - 公布日： 2013-03-20 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种目的蛋白制备方法及其用途。其制备方法为：目的蛋白核苷酸序列片段的获得；目的蛋白重组表达载体的构建；目的蛋白的诱导表达；目的蛋白的纯化；纯化产物的切割；所述目的蛋白核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点；所述目的蛋白通过PCR扩增得到，通过引物引入单体切割的识别位点；其中的目的蛋白可以是人神经生长因子，胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽等等。采用本发明的制备方法制备得到的目的蛋白表达量高、易于纯化、降低了目的蛋白二硫键复性与构象折叠的难度，基因表达产物即为目的蛋白单体，不带额外氨基酸残基，既保证了目的蛋白产物良好的生物学活性，也省去了多拷贝的切割成本
一种目的蛋白制备方法及其用途

[发明专利]一种包含钥孔血蓝蛋白片段的融合蛋白及其应用-CN201710183230.X有效
发明人：陈春光;崔玲玲;刘燕云;向艳文 -专利权人：攸归（上海）生物科技有限公司
申请日： 2017-03-24 - 公布日： 2020-10-20 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种包含钥孔血蓝蛋白片段的融合蛋白及其应用。所述融合蛋白包含钥孔血蓝蛋白片段及目的蛋白；所述的钥孔血蓝蛋白片段包含钥孔血蓝蛋白第1‑245位氨基酸残基；所述的目的蛋白为植物线粒体膜蛋白或其免疫原性片段。在将钥孔血蓝蛋白片段与目的蛋白融合表达后，钥孔血蓝蛋白片段显著增强了目的蛋白的免疫原性。由于本发明的融合蛋白展示了比单独的目的蛋白更强的免疫原性，因此，通过融合钥孔血蓝蛋白片段可用于制备针对特异性目的蛋白多克隆抗体。
一种包含钥孔血蓝蛋白片段融合及其应用

[发明专利]一种目的蛋白制备方法及其用途-CN201210470566.1有效
发明人：任宏伟;凡复;林昳;章永垒;梁洁 -专利权人：厦门北大之路生物工程有限公司
申请日： 2012-11-19 - 公布日： 2013-06-05 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种目的蛋白制备方法及其用途。其制备方法为，目的蛋白核苷酸序列片段的获得；目的蛋白重组表达载体的构建；目的蛋白的诱导表达；纯化；切割；目的蛋白核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点；优选可在目的蛋白的核苷酸序列片段上游引入kex2酶切位点，在下游引入盐酸羟胺切割位点；目的蛋白的核苷酸序列片段通过SOE技术获得，并通过引物引入单体切割的识别位点；目的蛋白可以是人神经生长因子，胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽等。制备得到的目的蛋白表达量高、易于纯化、基因表达产物即为目的蛋白单体，不带额外氨基酸残基，既保证了目的蛋白产物良好的生物学活性，也省去了多拷贝的切割成本，纯化简单，易于大量生产。
一种目的蛋白制备方法及其用途

[发明专利]制备溶液渗透性目的蛋白沉淀物及从宿主细胞中分离纯化目的蛋白的方法-CN201811257915.5有效
发明人：包子娴;孙粤;年锐;咸漠;陈泉;刘文帅;彭馨莹;樊喜英 -专利权人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所
申请日： 2018-10-26 - 公布日： 2022-07-15 - 主分类号： C07K1/36 文献下载
摘要：本发明公开了制备溶液渗透性目的蛋白沉淀物及从宿主细胞中分离纯化目的蛋白的方法，属于蛋白纯化技术领域。本发明通过用沉淀盐和透析盐冲洗含有目的蛋白的沉淀物，获得了具有溶液渗透性的目的蛋白沉淀物。本发明分离纯化目的蛋白的方法是利用辛酸、尿囊素和TREN粒子处理含有目的蛋白的宿主细胞收集物，获得的澄清收集液经过滤后，加入含有聚乙二醇和NaCl的缓冲液或者是含有硫酸铵和NaCl的缓冲液进行初步沉淀目的蛋白，利用沉淀盐和高浓度透析盐对蛋白沉淀物冲洗，获得具有溶液渗透性的目的蛋白沉淀物，通过色谱层析进一步纯化得高纯度目的蛋白。该方法纯化效果好，成本低，适用于蛋白纯化过程。
制备溶液渗透性目的蛋白沉淀物宿主细胞分离纯化方法

[发明专利]一种提高解脂耶氏酵母中目的蛋白表达水平的方法-CN202011283106.9有效
发明人：闫云君;周清华;焦梁成;李文娟;李云翀;张后今;阎金勇;徐莉;杨敏 -专利权人：华中科技大学
申请日： 2020-11-17 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，公开了一种提高解脂耶氏酵母中目的蛋白表达水平的方法，该方法是通过共同过表达蛋白合成与分泌途径相关的辅助蛋白以提高解脂耶氏酵母中目的蛋白表达水平。共同过表达优选包括以下任意一种情形：(i)目的蛋白基因与一种辅助蛋白的单拷贝基因的共同过表达；(ii)目的蛋白基因与一种辅助蛋白的多拷贝基因的共同过表达；(iii)目的蛋白基因与多种辅助蛋白的不同拷贝数基因的共同过表达本发明通过对提升方法的整体作用机制进行改进，通过共同过表达蛋白合成与分泌途径相关的辅助蛋白以提高解脂耶氏酵母中目的蛋白表达水平，可显著提高解脂耶氏酵母中目的蛋白的产量。
一种提高解脂耶氏酵母目的蛋白表达水平方法

[发明专利]一种目的蛋白制备方法及其用途-CN201210465278.7无效
发明人：任宏伟;凡复;陈星;陈胜亮 -专利权人：厦门北大之路生物工程有限公司
申请日： 2012-11-19 - 公布日： 2013-04-03 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种目的蛋白制备方法及其用途。其制备方法为，目的蛋白的核苷酸序列片段的获得；目的蛋白重组表达载体的构建；目的蛋白的诱导表达、纯化；切割；所述目的蛋白的核苷酸序列片段的下游引入单一切割位点；所述目的蛋白通过合成编码链和模板链，将两者杂交获得，在合成编码链和模板链时引入单体切割的识别位点；优选地，其中的目的蛋白可以是人神经生长因子，胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽。采用本发明的制备方法制备得到的目的蛋白表达量高、易于纯化，基因表达产物即为目的蛋白单体，不带额外氨基酸残基，既保证了目的蛋白产物良好的生物学活性，也省去了多拷贝的切割成本，纯化简单，易于大量生产。
一种目的蛋白制备方法及其用途

[发明专利]一种精准光控蛋白降解系统及其构建方法和应用-CN202310840620.5在审
发明人：宋昕玥;李凤艳;李蒙蒙;张钰其;张书圣 -专利权人：临沂大学
申请日： 2023-07-10 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种精准光控蛋白降解系统及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明所述精准光控蛋白降解系统包括含有GFP的表达载体、含有CRY2‑FC融合蛋白的表达载体和含有CIB1与目的蛋白配体融合蛋白的表达载体；将上述三个表达载体共转染到含目的蛋白的宿主中，在蓝光的刺激下，含有CRY2‑FC的融合蛋白发生构型改变与含有CIB1和目的蛋白配体的融合蛋白结合，两个融合蛋白的结合作为光控开关，将目的蛋白配体招募的目的蛋白和泛素配体(FC)招募的泛素连接起来，激活细胞内泛素‑蛋白酶体系，实现对目的蛋白的光控精准降解。
一种精准光控蛋白降解系统及其构建方法应用

[发明专利]一种目的蛋白的纯化方法-CN201711248760.4有效
发明人：孟夏萌;张静飞;郭林;刘建东;刘建凯;郑海发 -专利权人：北京民海生物科技有限公司
申请日： 2017-12-01 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： C07K1/18 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白质纯化，具体公开了一种目的蛋白的纯化方法，即一种从包含目的蛋白和至少一种污染物的混合物中纯化目的蛋白的方法。在对所述混合物进行匀浆破碎后，无需使用切向流过滤和滤器死端过滤，仅先后进行阴离子交换层析步骤和阳离子交换层析步骤，即可实现目的蛋白的分离纯化。所获得的目的蛋白纯度可达95％以上，且内毒素小于30EU/mg。本发明不仅对于某些不适于超滤和过滤的蛋白有重要价值，对于其他蛋白质也节约了处理时间，提高了目的蛋白的回收率。按照本发明所述方法纯化得到的目的蛋白或含有目的蛋白和药学可接受载体的组合物，可用于对此类目的蛋白和组合物已知的各种诊断、治疗或其他用途，例如人类疫苗制品的制备等。
一种目的蛋白纯化方法

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