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[发明专利]用于克隆和表达关联抗体可变区基因区段的快速方法-CN201910132084.7在审
发明人： S·霍格;E·科佩茨基;D·奥斯特勒;S·西伯尔;G·蒂芬塔勒 -专利权人：弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
申请日： 2012-12-19 - 公布日： 2019-05-28 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：在本文中报道的方法中，在未中间分离和分析克隆的中间质粒的情况下进行编码抗体可变域的核酸区段的分离，并将分离的核酸区段插入到真核表达质粒中。因此，在本文中报道的方法中，不需要例如通过分析分离的经转化的大肠杆菌细胞来中间克隆、分离和分析中间质粒。
分离和分析核酸区段中间质粒克隆抗体可变区基因大肠杆菌细胞真核表达质粒编码抗体分析分离可变域关联转化

[发明专利]用于克隆和表达关联抗体可变区基因区段的快速方法-CN201280060807.3在审
发明人： S·霍格;E·科佩茨基;D·奥斯特勒;S·西伯尔;G·蒂芬塔勒 -专利权人：弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
申请日： 2012-12-19 - 公布日： 2014-08-27 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：在本文中报道的方法中，在未中间分离和分析克隆的中间质粒的情况下进行编码抗体可变域的核酸区段的分离，并将分离的核酸区段插入到真核表达质粒中。因此，在本文中报道的方法中，不需要例如通过分析分离的经转化的大肠杆菌细胞来中间克隆、分离和分析中间质粒。
用于克隆表达关联抗体可变基因区段快速方法

[发明专利]表征急性毒性的重组质粒、重组菌及其构建方法与应用-CN201610979440.5在审
发明人：王允;罗艳君 -专利权人：上海合森生物科技有限公司
申请日： 2016-11-08 - 公布日： 2017-02-15 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及表征急性毒性的重组质粒、重组菌及其构建方法与应用。具体而言，重组质粒含有卡那霉素抗性基因片段与报道基因片段，所述报道基因为发光基因，报道基因片段具有独立的启动子，所述的启动子为组成型表达，重组质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。表征急性毒性的重组菌，由表征急性毒性的重组质粒转化导入不动杆菌Acinetobacter baylyi ADP1中获得，其命名为Acinetobacter baylyi HesenATox，已于2016当重组菌暴露于具有生物毒性的环境中，细胞发光受到抑制，报道基因表达量降低，发光值与毒性剂量成反向效应关系，因此可用于评价环境样品的急性毒性。与现有技术相比，本发明重组菌性能更为稳定。
表征急性毒性重组质粒及其构建方法应用

[发明专利]一种控制大肠杆菌中质粒复制的方法-CN201710413737.X在审
发明人：黄小罗;方惠敏;张丽华;柳振宇 -专利权人：南京金斯瑞生物科技有限公司
申请日： 2017-06-05 - 公布日： 2017-09-08 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种控制大肠杆菌中质粒复制的方法。本发明设计开发的质粒调控方法基于Crispr/Cas9系统；其利用表达的dCas9蛋白以及转录的针对于质粒复制区靶序列的gRNA，有效的实现了质粒复制的调控抑制，该方法尚未见其它文献和专利报道，是一种全新的方法该方法中使用的针对复制区的靶序列，可以有多种选择，保证了利用不同的dCas9/gRNA对，实现不同程度的质粒复制调控的目的。该方法能够有效的降低质粒复制后产量2‑34倍，相比以前专利报道的方法，具有调控范围更广，调控能力更强的特点。总之，该方法设计新颖，能够有效实现对质粒复制不同程度的调控。
一种控制大肠杆菌质粒复制方法

[发明专利]一种用于抗菌药物筛选的新载体-CN201510176236.5有效
发明人：沈立新;王波波;吴宪军;李博;吴依哲;梁鹰 -专利权人：西北大学
申请日： 2015-04-14 - 公布日： 2018-07-31 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：载体以耐药性及治病性双相关基因PA0011作为药物作用靶点，通过带有缺失启动子的报道基因luxCDABE的质粒pMS402，将耐药及致病双相关基因PA0011的启动子区域通过PCR扩增、酶切克隆到报道质粒pMS402荧光素酶操纵子基因前，构成启动子‑报道子融合载体pKD‑0011；利用电转化技术将重组质粒转入野生型的铜绿假单胞菌中，利用载体pKD‑0011的发光强弱可以筛选得到抑制PA0011表达的抗菌物质
抗菌药物筛选铜绿假单胞菌耐药性相关基因新载体药物作用靶点操纵子基因高通量筛选启动子区域缺失启动子报道基因报道质粒发光强弱经济实用抗菌物质筛选设备荧光素酶重组质粒报道子电转化启动子野生型致病性酶切质粒克隆转入治病融合

[发明专利]包括内部核糖体进入位点的质粒和其用途-CN201580061928.3在审
发明人： W·凯林;G·陆;R·米德尔顿;K·K·王;J·E·布拉德内尔 -专利权人：达纳-法伯癌症研究所有限公司
申请日： 2015-10-09 - 公布日： 2018-05-18 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：在一些方面，本申请涉及可用于在特异性扰动之后有效监测数千个蛋白的稳定性的质粒的开发。所述质粒允许两种报道基因蛋白的共表达，两种均处于IRES的控制下。本发明的其它方面涉及质粒文库，识别通过所关注的化合物调节其水平的蛋白的筛选方法以及用于监测用IMiD化合物治疗受试者的方法。
包括内部核糖体进入质粒用途

[发明专利]鉴定雌激素受体－β/α选择性调节剂的生物试验-CN99814685.4无效
发明人： H·哈里斯;R·A·巴蒂 -专利权人：美国家庭用品有限公司
申请日： 1999-12-17 - 公布日： 2002-06-05 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：测定ER－β活性的试验所用的细胞含有内源性金属硫蛋白－II和含人ER－β编码聚核苷酸的DNA质粒。测定ER－α活性的试验所用的细胞含有ER－α和含有一种报道基因的DNA质粒,其中该报道基因与一个雌激素应答性元件相连。该试验监测该报道基因的表达,该报道基因的表达水平受潜在配体与ER－α结合的调节。
鉴定雌激素受体选择性调节剂生物试验

[发明专利]一种以质粒响应荧光酵母传感器为基础的亚硝胺TD50-CN202211245427.9在审
发明人：郑枫;丁昊天;赵宇宁 -专利权人：中国药科大学
申请日： 2022-10-12 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种以质粒响应荧光酵母传感器为基础的亚硝胺TD50预测方法，包括：包括：使用质粒响应荧光酵母传感器，该酵母传感器的质粒以GFP为报告蛋白，通过对暴露于亚硝胺化合物后GFP表达水平进行测定，采用荧光蛋白诱导倍数FI对遗传毒性进行定量，根据亚硝胺化合物的FI1.5，对无TD50数据报道的亚硝胺化合物的TD50进行预测；其中，所述的质粒响应荧光酵母传感器是能够表达GFP的酿酒酵母菌株，它是转入了质粒pMAG1‑yEGFP构建而成。
一种质粒响应荧光酵母传感器基础亚硝胺 td base sub 50

[发明专利]慢病毒介导的猪生长激素单质粒诱导表达系统-CN201010247916.9无效
发明人：刘红林;姜保春;邹晓龙 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2010-08-06 - 公布日： 2011-05-04 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了慢病毒介导的猪生长激素单质粒诱导表达系统，可用来制备转基因猪，属于基因工程领域。本发明首先构建了强力霉素调控的pGH双质粒诱导表达系统，其次将双质粒改造为单质粒诱导表达系统，调控猪GH定时定量表达，在转基因动物中首次报道，其次将单质粒诱导表达系统中调控表达的DNA功能片段插入慢病毒载体
病毒生长激素质粒诱导表达系统

[发明专利]一种用代谢工程菌生产谷胱甘肽的方法-CN200810039695.9有效
发明人：杨晟;杨俊杰;陶荣盛;曹传增;范文超 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院;中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心
申请日： 2008-06-27 - 公布日： 2009-12-30 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供了一种谷胱甘肽合成酶系重组质粒及其构建方法和应用、一种表达谷胱甘肽合成酶系的重组菌株及其构建方法和应用、以及一种生产谷胱甘肽的方法。本发明提供的谷胱甘肽合成酶系重组质粒包括GSH1和GSH2序列和一合适的载体片段；本发明提供的谷胱甘肽合成酶系重组菌株使用谷胱甘肽合成酶系重组质粒构建；本发明提供的生产谷胱甘肽的方法为发酵本发明提供的谷胱甘肽合成酶系重组菌株使用本发明提供的共表达质粒可以构建产谷胱甘肽毕赤酵母，获得的产谷胱甘肽毕赤酵母发酵培养，获得的发酵液中谷胱甘肽产量显著高于目前报道的谷胱甘肽发酵生产的最高水平，提高了原料利用率、降低了生产成本和能耗，可用于工业化生产
一种代谢工程生产谷胱甘肽方法

[发明专利]具有增强的分泌活性的谷氨酸棒杆菌菌株-CN01809372.8在审
发明人：斯特凡·贝伦斯;约恩·卡利诺夫斯基;阿尔弗雷德·普尔乐 -专利权人：德古萨股份公司
申请日： 2001-04-26 - 公布日： 2003-07-09 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明还这些基因的蛋白质和多核苷酸序列，含有至少一个这些基因的质粒以及所述细菌菌株在生产期望物质或在一个报道系统中的应用。
具有增强分泌活性谷氨酸杆菌菌株

[发明专利]一种联产长链二元酸和1,3-丙二醇的工程菌及其构建方法-CN201611219248.2有效
发明人：汪俊卿;郭维伟;彭健;王瑞明;杨晓慧;石莹;程成;修翔 -专利权人：齐鲁工业大学
申请日： 2016-12-26 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明涉及一种联产长链二元酸和1,3‑丙二醇的工程菌及其构建方法，通过转化重组质粒制备，重组质粒通过PCR扩增获得甘油脱水酶基因，与PCR扩增获得的启动子pGAPg重叠连接，获得pGAPg‑GD片段；通过PCR扩增获得1,3‑丙二醇脱氢酶基因与PCR扩增获得的启动子pGAPp重叠连接，获得pGAPp‑PDE片段；通过PCR扩增获得的终止子基因，并制备双向终止子片段；分别连接上述片段，获得重组质粒。本发明构建的工程菌，实现多基因同时表达；并且长链二元酸的产量为10g/L，转化甘油产生的1,3‑丙二醇的产量为13g/L，显著高于现有已知的报道。
一种联产二元酸丙二醇工程及其构建方法

[发明专利]一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞及其应用-CN202111226207.7在审
发明人：赵嫚;成浩;刘薇;柳志强;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2021-10-21 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一种表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞及其应用，所述表达磷酸转移酶与非核糖体肽合成酶的细胞为将含磷酸转移酶基因的表达质粒与含非核糖体肽合成酶基因的表达质粒转入宿主细胞中得到。本发明的方法通过全细胞催化法制备脱羧肌肽，是生物法制备脱羧肌肽的首次报道。
一种表达磷酸转移酶核糖体合成细胞及其应用

[发明专利]一种结核分枝杆菌KatG耐药突变位点检测试剂盒-CN201510678805.6有效
发明人：田国宝;黄曦;钟兰兰 -专利权人：中山大学
申请日： 2015-10-20 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：通过与结核分枝杆菌标准株H37Rv序列（NC_000962.3）的比对，发明人从临床分离的耐异烟肼结核分枝杆菌katG基因中发现了未报道的2个突变位点：294GGG和296ATC。通过克隆质粒及MIC值测定证实katG基因294GGG，296ATC，590AGG，690GCC位点的突变可以导致显著异烟肼耐药。其中590AGG，690GCC位点突变的发生是在质粒克隆过程中自发发生的，经过生物信息学分析，这两个位点突变也未有研究报道。
一种结核分枝杆菌 katg 耐药突变检测试剂盒

[发明专利]一种利用Silwet L-77提高化学法转化大肠杆菌效率的方法-CN201710285512.0有效
发明人：胡全安;曹雪松;魏秀俭;刘立科;黄学娟;张金迪;张壮 -专利权人：聊城大学
申请日： 2017-04-27 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：提高化学法转化大肠杆菌效率的方法，其包括以下步骤：化学法制备大肠杆菌（E.coli）感受态细胞；配置浓度为0.05%~0.25%的的Silwet_L‑77母液；将质粒而使用表面活性剂提高质粒转化大肠杆菌效率的方法尚未见报道。
一种利用 silwet 77 提高化学转化大肠杆菌效率方法

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