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[发明专利]辅助鉴定具有优良性状的小麦的方法-CN201010129598.6无效
发明人：陈锋;崔党群;程西永;詹克慧;董中东;许海霞 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2010-03-19 - 公布日： 2010-08-11 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供的方法，包括如下步骤：以待测小麦的基因组DNA为模板，用序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成的引物对进行PCR扩增，然后进行如下1)至6)中任一所述的判断：1)能扩增出DNA片段的小麦的千粒重在统计学上小于不能扩增出DNA片段的小麦；2)能扩增出DNA片段的小麦的粒径在统计学上小于不能扩增出DNA片段的小麦；3)能扩增出DNA片段的小麦的穗粒重在统计学上小于不能扩增出DNA片段的小麦；4)能扩增出DNA片段的小麦的穗粒数在统计学上小于不能扩增出DNA片段的小麦；5)能扩增出DNA片段的小麦的旗叶面积在统计学小于不能扩增出DNA片段的小麦；6)能扩增出DNA片段的小麦的旗叶宽度在统计学小于不能扩增出DNA片段的小麦。
辅助鉴定具有优良性状小麦方法

[发明专利]一种辅助鉴定具有优良性状的小麦的方法-CN201010129574.0无效
发明人：陈锋;崔党群;许海霞;詹克慧;程西永;董中东 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2010-03-19 - 公布日： 2010-08-11 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供的方法，包括如下步骤：以待测小麦的基因组DNA为模板，用序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成的引物对进行PCR扩增，然后进行如下1)至6)中任一所述的判断：1)能扩增出DNA片段的小麦的千粒重在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小麦；2)能扩增出DNA片段的小麦的粒径在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小麦；3)能扩增出DNA片段的小麦的穗粒重在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小麦；4)能扩增出DNA片段的小麦的穗粒数在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小麦；5)能扩增出DNA片段的小麦的旗叶面积在统计学大于不能扩增出DNA片段的小麦；6)能扩增出DNA片段的小麦的旗叶宽度在统计学大于不能扩增出DNA片段的小麦。
一种辅助鉴定具有优良性状小麦方法

[发明专利]扩增子文库的构建方法-CN201410849561.9有效
发明人：王大伟;刘运超;蒋智;李明渊;朱海浩;胡政 -专利权人：北京诺禾致源生物信息科技有限公司
申请日： 2014-12-29 - 公布日： 2015-04-29 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种扩增子文库的构建方法。该构建方法包括以下步骤：S1，对目的片段进行扩增，得到富集目的片段；以及S2，对富集的目的片段进行片段化文库构建，得到扩增子文库；其中，步骤S1包括以下步骤：S11，对目的片段的扩增模板进行定量；S12，对目的片段的扩增引物的退火温度进行固定；以及S13，利用扩增引物在退火温度下对目的片段进行扩增，得到富集目的片段。上述构建方法通过对来自于不同环境的核酸样本进行准确定量扩增体系中的模板量，使得不同样本间目的片段的扩增效率相当，进而降低测序数据的波动性；通过对所用引物的退火温度进行优化，降低扩增子文库中的非特异扩增子的比例，提高了扩增子文库的合格率。
扩增文库构建方法

[发明专利]扩增多个基因/基因片段的方法-CN00111790.4无效
发明人：姚见儿 -专利权人：上海复旦张江生物医药股份有限公司
申请日： 2000-03-02 - 公布日： 2003-02-19 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：扩增多个基因/基因片段的方法，其特点是将欲扩增基因或基因片段的每对引物中的一个定点固定在固相支持物上，另一个放在扩增液中。反应时将固化有多个基因/基因片段引物的固相支持物浸没于扩增溶液中，利用多聚酶链反应进行基因/基因片段的扩增。这样，多个基因/基因片段的扩增产物不会互相干扰，多对引物之间的干扰也大为减少，而可在同一扩增溶液中同时扩增多个基因/基因片段。适于一生物样品多个基因/基因片段的分析，尤适于样本量极少的稀有样本多个基因/基因片段的扩增。
扩增基因片段方法

[发明专利]一种长片段DNA文库构建方法-CN201680012412.4有效
发明人：王欧;章文蔚;蒋慧;林霖;常灿坤 -专利权人：深圳华大生命科学研究院;深圳华大基因科技有限公司
申请日： 2016-04-14 - 公布日： 2020-05-05 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：提供了一种长片段DNA文库构建方法，包括如下步骤：1)通过转座酶使长片段DNA断开为大小为3‑10kb的目的片段，再扩增所述目的片段，得到含有dUTP的目的片段扩增产物；2)通过去除所述目的片段扩增产物中的dUTP,使所述目的片段二次片段化为300‑1200bp DNA短片段；3)在所述DNA短片段两端分别连接测序接头单链A和测序接头单链B；得到连接测序接头产物；4)PCR扩增所述连接测序接头产物，得到扩增产物
一种片段 dna 文库构建方法

[发明专利]多重荧光定量PCR的方法-CN201710121610.0有效
发明人：虞之龙;刘玚;邱海维 -专利权人：北京酷搏科技有限公司
申请日： 2017-03-02 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：该方法包括：将多个目标片段的扩增引物对置于同一扩增体系中进行PCR扩增，PCR扩增包括N轮热循环，10≤N≤50；每轮热循环后对PCR产物进行程序升温，获得多个目标PCR扩增片段形成的混合片段的熔解曲线；计算每一轮PCR热循环后各单一目标片段的含量，进而建立各单一目标片段的含量随PCR热循环次数增加而变化的扩增曲线；根据扩增曲线计算得到各单一目标片段对应的Ct值，进而根据Ct值计算得到各单一目标片段的起始浓度该方法能利用单个光学采集通道的数据实现对各目标扩增片段进行准确检测和定量，且不受目标片段数量、多个目标片段的解链温度是否已知或是否接近的限制。
多重荧光定量 pcr 方法

[发明专利]检测APC基因大片段缺失的核酸组合物、试剂盒及其应用-CN202310740387.3在审
发明人：戴聪伶;曾思聪;张前军;林戈 -专利权人：中信湘雅生殖与遗传专科医院有限公司
申请日： 2023-06-21 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本申请涉及一种检测APC基因大片段缺失的核酸组合物、试剂盒及其应用。上述检测APC基因大片段缺失的核酸组合物、试剂盒及其应用，针对APC基因突变的特点，选择APC基因突变长片段作为检测对象，通过选用特定的定量PCR扩增引物进行定量PCR扩增，并对扩增反应结果进行分析，确定APC基因是否存在缺失的基因片段，进一步结合长片段PCR进行扩增，选用特定的正向引物和反向引物进行长片段PCR扩增缺失基因片段，并对长片段扩增产物进行测序，可以检测APC基因大片段的缺失断点序列信息。
检测 apc 基因片段缺失核酸组合试剂盒及其应用

[发明专利]一种引物、非诊断目的的扩增靶核苷酸的方法及非诊断目的的检测靶核苷酸扩增的方法-CN201410381499.5有效
发明人：唐景峰;罗虹;王维旭 -专利权人：武汉百泰基因工程有限公司
申请日： 2014-08-05 - 公布日： 2017-01-11 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种引物、靶核苷酸扩增方法及检测靶核苷酸序列扩增的方法，属于生物技术领域。所述引物包括正向引物和反向引物，所述正向引物的5'末端包括A片段，所述正向引物的3'末端包括B片段，所述反向引物的5'末端包括A片段或A1片段，所述反向引物的3'末端包括C1片段，A片段与A1片段互补，B片段与B1片段互补，C片段与C1片段互补。所述靶核苷酸扩增方法，提供靶核苷酸，加入正向引物和反向引物，所述正向链和所述反向链分别扩增。所述检测靶核苷酸序列扩增的方法用于检测靶核苷酸是否扩增。所述引物能够高效进行环形扩增并不断延长靶核苷酸片段，所述靶核苷酸扩增方法与现有技术相比检测效率至少提高了20倍，即提高了灵敏度。
一种引物诊断目的扩增核苷酸方法检测

[发明专利]一种高效构建酿酒酵母HO基因敲除组件的方法-CN201310151626.8无效
发明人：陆健;吴殿辉;陈坚;李晓敏;谢广发;申超 -专利权人：江南大学
申请日： 2013-04-27 - 公布日： 2013-08-28 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：该方法首先利用普通PCR扩增得到酿酒酵母HO基因的上、下游同源臂扩增片段以及带有G418抗性标记的kanMX基因扩增片段，再通过降落PCR扩增得到上述三个片段的融合片段，最后利用普通PCR对所述融合片段进行特异性扩增即得酿酒酵母HO基因敲除组件；所述上、下游同源臂扩增片段与所述kanMX基因扩增片段之间存在互补序列。本发明结合降落PCR和普通PCR，成功构建获得高特异性高纯度的HO基因敲除组件，基因片段融合效率高，具有简便、快速、高效的优点，有利于HO基因敲除、酿酒酵母单倍体分离等后续试验的进行。
一种高效构建酿酒酵母 ho 基因组件方法

[发明专利]检测基因突变的引物、试剂盒及方法-CN201811386433.X在审
发明人：孙培 -专利权人：北京昱晟达医疗科技有限公司
申请日： 2018-11-20 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：该引物包括上游引物和下游引物，上游引物包括依次相连的通用扩增序列、荧光探针序列以及目的片段上游特异性扩增序列；下游引物包括目的片段的下游特异性扩增序列；目的片段上游特异性扩增序列是区分野生型目的片段与突变型目的片段的特异性扩增序列将探针设计在目的片段特异性扩增序列的上游，使得目的片段长度可以按需缩短，提高了对血浆cfDNA类样本的利用率和临床应用价值。而在荧光探针序列的上游同时设置通用扩增序列，不仅方便后续扩增，减少整体引物的用量，进而避免整体引物所需用量太大而导致的扩增特异性降低，而且通用扩增序列的存在还有助提高该引物使用的通用性。
目的片段特异性扩增引物扩增序列上游荧光探针序列基因突变上游引物下游引物试剂盒扩增通用临床应用探针设计依次相连突变型需用量野生型种检测血浆样本检测

[发明专利]一种复杂长片段核酸序列的扩增技术-CN201811617607.9在审
发明人：曾晓静;李胜;蒋馥蔓;张杰豪;杜伯乐 -专利权人：广州精科医学检验所有限公司
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2019-05-03 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种复杂长片段核酸序列的扩增技术，通过根据目标序列的GC含量设计引物，同时调整引物的Tm值，将复性和延伸操作同时进行，缩减为两步法扩增，提高了复杂长片段核酸序列的扩增成功率，特别是可扩增出二级结构复杂的长片段本发明的扩增方法，使用普通的PCR仪器即可完成，适用于大部分长片段PCR扩增，可以扩增出GC含量高达60％的长片段DNA序列，特异性更强，扩增效率高，操作简单。
扩增长片段核酸序列长片段DNA 引物二级结构含量设计扩增效率目标序列两步法复性成功率延伸

[发明专利]用于扩增GYPA、GYPB、GYPE基因mRNA全长序列的试剂盒及方法-CN202010671311.6在审
发明人：梁延连;任建卫;徐筠娉;刘俊;苏宇清;唐雄驰;钟福玲;吴凡;梁爽;徐庆萍;孙兵兵;彭龙 -专利权人：深圳市血液中心（深圳市输血医学研究所）
申请日： 2020-07-13 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开用于扩增GYPA、GYPB、GYPE基因mRNA全长序列的试剂盒和方法，属于血型分型领域。所述试剂盒包括用于扩增GYPA基因mRNA全长序列的引物组合、用于用于扩增GYPB基因mRNA全长序列的引物组合和用于扩增GYPE基因mRNA全长序列的引物组合，以及GYPA基因mRNA片段的测序引物组合、GYPB基因mRNA片段的测序引物组合和GYPE基因mRNA片段的测序引物组合。本发明采用巢式PCR扩增，包括预扩增和片段扩增两个步骤，能够增强目标片段扩增的特异性、高效性，从而获得GYPA、GYPB、GYPE基因mRNA全长序列。
用于扩增 gypa gypb gype 基因 mrna 全长序列试剂盒方法

[发明专利]一种利用限制性内切酶处理DNA模板以增进DNA扩增效率的方法-CN200710057926.4无效
发明人：孟良玉;李静;阎大伟;张治洲 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2007-07-03 - 公布日： 2008-01-30 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种应用限制性内切酶处理DNA模板以增进聚合酶链式反应扩增效率的方法，该方法采用限制性内切酶处理DNA模板，通过对待扩增DNA模板的酶切实现对难以扩增的DNA片段的有效扩增，从而提高目的DNA片段的扩增特别是高GC含量片段的扩增，且效果明显，使用简便，易于掌握，较好地解决了某些目的DNA片段扩增效率不高或不易扩增的关键问题。
一种利用限制性内切酶处理 dna 模板增进扩增效率方法

[发明专利]一种用于枪乌贼科物种线粒体全基因组扩增的通用引物及扩增方法-CN201811105404.1在审
发明人：江丽华;龚理;刘炳舰;吕振明;刘立芹 -专利权人：浙江海洋大学
申请日： 2018-09-21 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于枪乌贼科物种线粒体全基因组扩增的通用引物及扩增方法，通用引物包括6对引物，其中包括1对扩增长片段引物和5对扩增普通片段引物；扩增方法为：以提取的枪乌贼科物种基因组DNA为模板，首先用扩增长片段引物进行LA‑PCR扩增，用扩增普通片段引物进行普通PCR扩增，PCR产物经1.0％琼脂糖电泳检测后测序，序列拼接、校对，即得线粒体基因组全序列。本发明通用引物覆盖完整线粒体基因组全序列，能对枪乌贼科物种进行整体拼接，能够与模板碱基序列结合紧密，扩增效率高，能够保证扩增结果的可信度；本发明扩增方法的扩增效率高、扩增片段长、保真性高，能够获得枪乌贼科物种线粒体全基因组序列
扩增片段引物通用引物物种线粒体全基因组线粒体基因组扩增效率全序列线粒体全基因组序列琼脂糖电泳检测物种基因组碱基序列扩增片段序列拼接整体拼接可信度保真性对引物测序校对覆盖保证

[发明专利]万能DNA片段扩增技术及万能DNA片段扩增试剂盒-CN95111312.7无效
发明人：夏庆杰 -专利权人：夏庆杰
申请日： 1995-04-12 - 公布日： 1996-10-16 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明万能DNA片段扩增技术及万能DNA片段扩增试剂盒提供了一种扩增大小在一定范围内的具有3′羟基和5′磷酸基的任意DNA片段的技术方法和用以实现这种技术的试剂盒，国际专利分类号为C12Q1/68，由于本发明合成了四个万能PCR引物，并使这些引物与待扩增DNA片段单链相连接，获得了两端带有万能PCR引物接头的待扩增的DNA片段模板分子，从而直接利用万能PCR引物将待扩增的DNA片段高效，方便地进行扩增。
万能 dna 片段扩增技术试剂盒

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