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[发明专利]一种大肠杆菌通用的高效可溶表达载体系统-CN02152409.2无效
发明人：张众;黄华樑;王飞;宋丽萍;周志勇;林晴 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所;北京安波特基因工程技术有限公司
申请日： 2002-11-22 - 公布日： 2004-06-09 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种可在大肠杆菌中以可溶形式高效表达外源蛋白的新型通用载体，这种通用载体是建立在大肠杆菌促折叠相关蛋白FkpA的基础之上的融合和共表达载体；一种用于高效可溶表达抗膀胱癌单链抗体(PG)的表达载体pTFP1以及用于高效可溶表达纤维素结合域(CBD)和PG所构成的融合蛋白CBD－PG的表达载体pTBNP1F；以及一种含有上述通用的高效可溶表达载体的宿主细胞。
一种大肠杆菌通用高效可溶表达载体系统

[发明专利]一种基于GS筛选系统的动物细胞高效表达载体及应用-CN201410037976.6有效
发明人：邵勇;胡显文;高招刚;高丽华;潘芸;王友亮;刘羽;李伊培 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所
申请日： 2014-01-26 - 公布日： 2018-03-23 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于GS筛选系统的动物细胞高效表达载体及应用。本发明提供了一种构建表达载体的方法，包括如下步骤将出发载体pIRSE‑EGFP‑B的驱动目的基因表达的CMV启动子替换为hCMV启动子，且在所述出发载体pIRSE‑EGFP‑B种插入标记基因，得到表达载体本发明的实验证明，本发明先将pIRSE‑EGFP载体的BamHⅠ位点突变得到载体pIRSE‑EGFP‑B，在其基础上将原有CMV启动子替换为人hCMV启动子，并增加了GS标记基因，得到高效表达载体。该高效表达载体在表达目的蛋白更有优势，通过GS系统能够快速获得高效表达细胞系。
一种基于 gs 筛选系统动物细胞高效表达载体应用

[发明专利]一种高效表达P53抑癌蛋白的T细胞、制备方法及应用-CN201711434089.2在审
发明人：王泰华;王欣;张刚;崔晓慧 -专利权人：东莞赛尔生物科技有限公司
申请日： 2017-12-26 - 公布日： 2018-05-22 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供一种高效表达P53抑癌蛋白的T细胞、制备方法及应用，本发明高效表达P53抑癌蛋白的T细胞，由p53真核表达载体转染T细胞得到；所述p53真核表达载体，是将p53基因连接至pcDNA 3.1载体中构建而成本发明建立高效表达p53的载体体系，以免疫T细胞为表达载体，可以高效表达不同亚型p53，更有效地发挥p53的抗肿瘤活性。本发明高效表达P53抑癌蛋白的T细胞可以用于制备用于治疗肿瘤的药物。
一种高效表达 p53 蛋白细胞制备方法应用

[发明专利]高效克隆筛选表达载体、其制备方法及用途-CN201210483844.7有效
发明人：楼庄伟;孔云华;梅佳;贾园;陈侃;宋云鹏;吕强 -专利权人：上海药明康德新药开发有限公司;苏州药明康德新药开发有限公司;无锡药明康德生物技术有限公司
申请日： 2012-11-23 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效克隆筛选表达载体，该载体由piggyBac转座系统的ITRs序列插入到哺乳动物表达载体中得到。本发明还公开了上述载体的制备方法及其用途。本发明利用piggyBac转座系统的ITRs序列构建高效克隆筛选表达载体，同时将经过密码子优化的能在小鼠中高效表达的转录酶基因克隆到另外一个真核表达载体上，通过含ITRs序列的表达载体和含转录酶的载体的共表达
高效克隆筛选表达载体制备方法用途

[发明专利]一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其表达-CN201610972819.3有效
发明人：喻晓蔚;徐岩 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-11-07 - 公布日： 2019-10-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其表达，属于生物工程技术领域。本发明发现了一种新的嗜热酯酶基因，构建3种表达系统，实现高效表达并研究酶学性质。真核表达系统构建：表达载体构建优选载体pPIC9K，并转化毕赤酵母宿主，优选GS115，实现高效表达；原核大肠杆菌表达系统构建：表达载体构建优选载体MBP3，并转化大肠杆菌宿主，优选BL21和Origami2，实现高效表达；原核巨大芽孢杆菌表达系统构建：表达载体构建优选载体pHIS1525，并转化巨大芽孢杆菌宿主，优选YYBm1，实现高效表达。
一种来源于 aquifex aeolicus 菌株嗜热酯酶及其表达

[发明专利]一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其功能验证-CN201610972926.6有效
发明人：喻晓蔚;徐岩 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-11-07 - 公布日： 2019-08-20 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明发现了一种新的嗜热酯酶基因，构建3种表达系统，实现高效表达并研究酶学性质。真核表达系统构建：表达载体构建优选载体pPIC9K，并转化毕赤酵母宿主，优选GS115，实现高效表达；原核大肠杆菌表达系统构建：表达载体构建优选载体MBP3，并转化大肠杆菌宿主，优选BL21和Origami2，实现高效表达；原核巨大芽孢杆菌表达系统构建：表达载体构建优选载体pHIS1525，并转化巨大芽孢杆菌宿主，优选YYBm1，实现高效表达。
构建优选高效表达表达载体嗜热酯酶宿主巨大芽孢杆菌表达系统功能验证菌株原核转化大肠杆菌表达系统生物工程技术领域大肠杆菌宿主真核表达系统载体pPIC9K 毕赤酵母高温条件工业应用酶学性质热稳定性酯酶活性重组酶热性基因发现研究

[发明专利]介导外源基因在哺乳动物细胞高效表达的载体及其应用-CN201110164439.4有效
发明人：李世崇;陈昭烈;叶玲玲;刘红;刘兴茂;何文俊;王启伟 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所
申请日： 2011-06-17 - 公布日： 2011-11-23 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了介导外源基因在哺乳动物细胞高效表达的组合载体，该组合载体包括外源基因高效表达载体pATEW和人工转录因子表达载体pcDNA3.1(+)/Hy/GVP4。外源基因高效表达载体pATEW组合了人β-globin MAR序列、hEF-1α基因转录调控序列、转录后调控元件WPRE等基因表达调控元件和人工转录因子结合位点序列；人工转录因子表达载体pcDNA3.1(+)/Hy/GVP4表达由VP16中12肽(DALDDFDLDMLG)的4个串联重复作为人工转录因子的功能结构域和SV40的核定位序列两部分连接而成的人工转录因子GVP4。将携带外源基因的pATEW和pcDNA3.1(+)/Hy/GVP4共转染哺乳动物细胞，即可实现外源基因在哺乳动物细胞中的高效表达。
介导外源基因哺乳动物细胞高效表达载体及其应用

[发明专利]用于抗体表达的双顺反子表达载体以及用其生产抗体的方法-CN201480055467.4在审
发明人：金秀珖;金荣民;孙镛圭;安庸镐;李东宪;李良顺;田喜程;崔裕彬;金银娥 -专利权人：普雷斯蒂奇生物制药私人有限公司
申请日： 2014-10-07 - 公布日： 2016-06-08 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及用于抗体表达的双顺反子表达载体、借助该表达载体转化的动物细胞和产生抗体的方法，包括培养该动物细胞的步骤，其中该表达载体包含第一表达盒和第二表达盒，所述第一表达盒包含“启动子-UTR-内含子-抗体轻链基因-polyA”，所述第二表达盒包含“启动子-UTR-内含子-抗体重链基因-内部核糖体进入位点(IRES)-扩增基因-polyA”。通过利用本发明的用于抗体表达的包含内含子的双顺反子表达载体，可以构建能够高效表达所需抗体的表达载体，通过培养借助该表达载体转化的动物细胞能够稳定而高效地产生抗体。
用于抗体表达顺反子载体以及生产方法

[发明专利]一种大肠杆菌表达载体及其应用-CN200510089966.8有效
发明人：王骏;曾伟基;叶康坚;刘兆明;肖游龙;曾实现 -专利权人：百瑞全球有限公司
申请日： 2005-08-08 - 公布日： 2007-02-14 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体，以及使用该表达载体在大肠杆菌中稳定、高效表达所需目的蛋白的方法。其中，该表达载体由载体pRSET－A构建而来，所述载体pRSET－A中的氨苄青霉素抗性基因被卡那霉素抗性基因代替。该表达载体可用于高效表达在制备7－氨基头孢霉烷酸时所需的酶而又不产生降低7－氨基头孢霉烷酸产率的β－内酰胺酶。本发明还具体提供了两个表达载体，即基因产物为D－氨基酸氧化酶突变体GHA的表达载体pHS－GHA和基因产物为假单孢菌(Pseudomonas sp.)SE83戊二酰－7－氨基头孢霉烷酸酰化酶的表达载体pT7
一种大肠杆菌表达载体及其应用

[发明专利]一种高效稳定的细胞表达载体、表达系统及其制备方法、应用-CN201810291628.X在审
发明人：王天云;田政伟;王芳;李琴;王小引;贾岩龙;郭潇;徐丹华 -专利权人：新乡医学院;华兰生物疫苗有限公司
申请日： 2018-04-03 - 公布日： 2019-10-18 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效稳定的细胞表达载体、表达系统及其制备方法、应用，属于基因工程技术领域。本发明中的细胞表达载体包含MAR from the DHFR intron序列，该段序列具有普通MAR序列和内含子的双重功能，能更好的提高CHO细胞中外源蛋白表达水平，由其构建得到的表达载体能驱动目的基因高效、持续、稳定表达，同等条件下，与不含MAR from the DHFR intron序列及包含来自CHO细胞的MAR‑6序列的表达载体相比，本发明中表达载体能显著提高外源基因的表达水平，可用于重组蛋白的生产等
细胞表达载体表达载体表达系统制备蛋白表达水平基因工程技术驱动目的基因表达水平双重功能同等条件外源基因稳定表达重组蛋白内含子构建可用应用生产

[发明专利]一种高效穿梭表达载体及其构建方法与应用-CN201510199070.9有效
发明人：檀建新;李志辉;张莹莹;申培立;张蕴哲;任蓓蕾;亢春雨;于宏伟;卢海强;马雯;张伟;陈中义 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2015-04-24 - 公布日： 2019-04-09 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明公开了属于生物技术领域的一种高效穿梭表达载体及其构建方法与应用。本发明是在E.coli‑B.subtilis穿梭载体pHT315的基础上构建的，通过将枯草芽孢杆菌Bs168的木糖启动子序列与来自E.coli表达载体pET21b的T7表达区序列融合，构建了一个高效穿梭表达载体pHTL，以gfp，gus和lipa为报告基因，检测载体的表达能力和遗传稳定性；同时，将来自纳豆芽孢杆菌的碱性蛋白酶信号肽序列代替载体pHTL上的T7肽编码区，构建成高效分泌型穿梭表达载体pHTZ，以gus，tgl1和lipa为报告基因，检测载体的表达能力。两种载体均可以正确表达相应蛋白并具有生物学活性，具有广泛的应用前景。
一种高效穿梭表达载体及其构建方法应用

[发明专利]一种蛋白或多肽的植物表达载体及其应用-CN201610564555.8有效
发明人：潘炜松;刘齐军;吴川 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2016-07-18 - 公布日： 2019-04-19 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋白或多肽的植物表达载体及其应用。所述蛋白或多肽的植物表达载体序列如SEQ ID No.14所示，命名为载体pFolia40108。该表达载体基于芜菁脉明病毒(TVCV)的高度感染性和农杆菌对外源基因高效传递的特点，极大地提高了外源基因在烟草中的表达效率。本表达载体将TVCV基因组复制和胞间移动相关的基因克隆于穿梭载体pGreen，同时设计了含有IIs限制性内切酶BsaI的多克隆位点。通过本表达载体可以高效地表达各种抗体、多肽、酶等产品。
一种蛋白多肽植物表达载体及其应用

[发明专利]蛋白真核表达启动子与蛋白表达载体及其构建方法与应用-CN201910749622.7有效
发明人：马婧姣;谢立香;严亚贤;孙建和 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2019-08-14 - 公布日： 2021-11-12 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白真核表达启动子与蛋白表达载体及其构建方法与应用。蛋白表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、一个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒，所述外源基因表达盒自上游至下游依次由蛋白真核表达启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成，所述连接片段含有AfeI与现有技术相比，本发明的蛋白表达载体利用蛋白真核表达启动子驱动外源基因表达，该载体含有的启动子元件在禽源与人源细胞中均具有高效的蛋白表达效率，而且本载体的构建过程简便、快速、经济、高效。本发明的蛋白表达载体具有很好的应用前景。
蛋白表达启动子载体及其构建方法应用

[发明专利]一种高效表达猪CYP1A1基因的真核表达载体构建方法-CN201510673403.7在审
发明人：方晓敏;任守文;徐杰;赵为民;涂枫;王学敏;李碧侠;付言峰 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2015-10-13 - 公布日： 2015-12-09 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效表达猪CYP1A1基因的真核表达载体构建方法，属于分子生物学领域。针对猪细胞色素P450 家族CYP1A1 基因的克隆及真核表达载体构建，设计含特定酶切位点和保护碱基的特异引物，应用PrimerSTAR高保真酶克隆获取特异编码序列，构建CYP1A1 基因重组质粒，特异酶切处理并与线性化载体连接获得高效表达猪CYP1A1 基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/zeo-CYP1A1。该表达载体用于细胞代谢及特异疾病免疫反应研究，CYP1A1 基因在高效增强子SV40及高效启动子T7PCMV的驱动下高效超量表达，激活下游基因及相应调控通路，影响细胞生理机能。
一种高效表达 cyp1a1 基因载体构建方法

[发明专利]一种高效表达猪HIF-1α基因的真核表达载体及其构建方法-CN202211166286.1在审
发明人：陈洪博;邵丹;颜璐琦;杜以梦;段滇宁 -专利权人：龙岩学院
申请日： 2022-09-23 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效表达猪HIF‑1α基因的真核表达载体及其构建方法。针对猪细胞低氧诱导因子‑1家族HIF‑1α基因的克隆及真核表达载体构建，设计含特定酶切位点和保护碱基的特异引物，获取特异编码序列，构建HIF‑1α基因重组质粒，特异酶切处理并与线性化载体连接获得高效表达猪HIF‑1α基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)‑HIF‑1α表达载体用于巨噬细胞能量代谢及炎症反应研究，H IF‑1α基因在高效增强子SV40及高效启动子CMV的驱动下高效表达，激活下游的很多靶基因来应对机体的缺血缺氧的不良的反应
一种高效表达 hif 基因载体及其构建方法

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