本发明公开了一种乙型脑炎E重组蛋白，所述的乙型脑炎E重组蛋白包括乙型脑炎E重组蛋白1和乙型脑炎E重组蛋白2，所述乙型脑炎E重组蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述乙型脑炎E重组蛋白2的氨基酸序列如本发明同时公开了一种乙型脑炎亚单位疫苗，所述的疫苗含有所述的乙型脑炎E重组蛋白1或乙型脑炎E重组蛋白2。本发明制备的乙型脑炎E重组蛋白1和乙型脑炎E重组蛋白2均具有良好的免疫原性，且乙型脑炎E重组蛋白2较乙型脑炎E重组蛋白1具有更好的免疫原性。因此，本发明公开的这2个乙型脑炎E重组蛋白均可以作为乙型脑炎亚单位疫苗的重要的备选抗原，为乙型脑炎亚单位疫苗的研发提供重要的参考和借鉴。
本发明提供了一种增加植物细胞重组蛋白胞外分泌的方法。具体包括以下步骤：1)分别构建含有EXO基因的表达载体和含有编码重组蛋白的基因的表达载体，或者构建含有EXO基因和编码重组蛋白的基因的共表达载体；2)转化植物细胞以分泌表达重组蛋白；其中，所述EXO基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述编码重组蛋白的基因的核酸序列包括编码连接在重组蛋白的N端的分泌型信号肽的核酸序列。本发明首次发现EXO基因可实现定位于内质网和胞外的重组蛋白的运输，实现重组蛋白的胞外分泌；EXO基因和编码重组蛋白的基因同时转化植物细胞，起到协同作用，提高了重组蛋白的产量和分泌率。
本发明实施例提供一种重组蛋白、制备方法、试剂盒及用途，所述重组蛋白为AHSG重组蛋白；所述AHSG重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码所述AHSG重组蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO制备方法包括：将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列连接重组载体，构建重组蛋白表达载体；将重组蛋白表达载体转化E.coli DH5α大肠杆菌感受态细胞培养，获得重组蛋白表达菌株，从重组蛋白表达菌株中提取质粒，转化DH10bac感受态细胞进行蓝白斑筛选；从白色单菌斑摇菌提取Bacmid杆粒，并将提取到的重组杆粒转进sf9昆虫细胞，进行大规模培养；收集细胞上清，纯化，得到重组蛋白。本发明实施例通过异源重组表达AHSG蛋白，能迅速并且特异性识别人血中抗AHSG抗体，实现定量检测。
