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[发明专利]一种7α-羟基类固醇脱氢酶的制备方法及其催化转化应用-CN202211258879.0在审
发明人：吴庆喜;王静;刘彩霞;吴迎超 -专利权人：安徽大学
申请日： 2022-10-14 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种7α‑羟基类固醇脱氢酶的制备方法及其催化转化应用，是利用野生菌通过超声破碎制得7α‑羟基类固醇脱氢酶，并利用该酶催化CDCA或者CDCA包合物转化为7K‑LCA。本发明的转化方法可以大大缩短转化时间、提高转化效率，且该步反应是鹅去氧胆酸到熊去氧胆酸两步酶法转化中的关键步骤，为酶法两步转化熊去氧胆酸奠定了基础。
一种羟基类固醇脱氢酶制备方法及其催化转化应用

[发明专利]一种提高原油中可气化油含量的真菌酶及其制备方法与使用方法-CN201811416137.X在审
发明人：高卉;薛泉宏;来航线 -专利权人：陕西博秦生物工程有限公司;西北农林科技大学
申请日： 2018-11-26 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高原油中可气化油含量的真菌酶及其制备方法与使用方法，该真菌酶包括以下原料：驱油真菌和产酶培养基；其中，所述产酶培养基包含小麦麸皮、盐溶液和原油。本发明利用该真菌酶对原油进行酶法转化，能将原油中包括沥青质在内的高分子组分降解转化为小分子可气化组分，显著提高原油酶法转化产物中饱和烃和芳香烃含量；其制备方法简单，易操作实施，本发明可为利用真菌酶改善原油品质提供理论支持，同时也为利用真菌酶法转化提高原油炼制时汽油及低沸点煤柴油产量工艺设计提供科学依据。
真菌酶原油可气化制备产酶培养基酶法转化工艺设计理论支持小麦麸皮原油炼制原油品质组分降解饱和烃低沸点芳香烃沥青质小分子盐溶液真菌转化柴油汽油

[发明专利]一种S-甲基-L-半胱氨酸的酶法转化制备方法-CN201810634882.5在审
发明人：肖忠 -专利权人：安徽瑞然生物药肥科技有限公司
申请日： 2018-06-20 - 公布日： 2018-12-07 - 主分类号： C12P13/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种S‑甲基‑L‑半胱氨酸的酶法转化制备方法，将具有色氨酸合成酶活性的菌株在培养基中培养发酵，发酵液离心后得到含色氨酸合成酶的湿菌体；将上述湿菌体中加入转化液，所述转换液中包括：含L‑丝氨酸的料液，磷酸吡哆醛和甲硫醇，甲醇、乙醇、乙醚、丙酮中的一种；在25～55℃，pH 6～11条件下进行酶促反应，等电点结晶法分离得到S‑甲基‑L‑半胱氨酸。本发明采用含色氨酸合成酶的特定菌株，在优选的培养基中培养可以高效表达色氨酸合成酶，使酶法合成S‑甲基‑L‑半胱氨酸有较高的催化速率和转化率，L‑丝氨酸摩尔转化率达到95％以上，酶法合成反应条件温和，酶立体选择性强
色氨酸合成酶半胱氨酸酶法合成酶法转化培养基湿菌体丝氨酸菌株制备等电点结晶法合成酶活性立体选择性磷酸吡哆醛摩尔转化率催化效率反应条件高效表达酶促反应培养发酵发酵液甲硫醇速率和转化液转换液乙醇丙酮甲醇料液乙醚优选催化

[发明专利]一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法及其应用-CN201510626188.5有效
发明人：冯国栋;陈振明;陈晓霞;赖敦岳;周硕;朱健 -专利权人：杭州华东医药集团新药研究院有限公司;杭州师范大学
申请日： 2015-09-28 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法。环脂肽脱酰酶溶液不经纯化，直接与多孔亲水性酶载体混合，并加入一种或多种有机溶液和无机盐，得到固定化环脂肽脱酰酶；同时公开了这一方法可用于工业化生产米卡芬净母核和阿尼芬净母核。本发明公开的制备方法工艺简单，不仅节省了酶纯化设备，而且固定化过程中酶活回收率明显提高，固定化酶可多次重复使用。酶法转化米卡芬净和阿尼芬净中间体，相比发酵转化法反应底物浓度高，产物杂质少，转化效率高。
一种固定化环脂肽脱酰酶制备方法及其应用

[发明专利]一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法-CN201410274056.6有效
发明人：徐礼生;高贵珍;卓馨;曹稳根;赵亮;袁维风;吴超 -专利权人：宿州学院
申请日： 2014-06-18 - 公布日： 2014-09-03 - 主分类号： C12P13/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法，将具有色氨酸合成酶活性的菌株在培养基中培养发酵，发酵液离心后得到含色氨酸合成酶的湿菌体；将上述湿菌体中加入转化液，所述转换液中包括：含L-丝氨酸的料液，磷酸吡哆醛和2-甲基吲哚，乙醚、甲醇、乙醇、丙酮中的一种；在20～50℃，pH5～12条件下进行酶促反应，等电点结晶法分离得到2-甲基-L-色氨酸。本发明采用含色氨酸合成酶的特定菌株，在优选的培养基中培养可以高效表达色氨酸合成酶，使酶法合成2-甲基-L-色氨酸有较高的催化速率和转化率，L-丝氨酸摩尔转化率达到98％以上，酶法合成反应条件温和，酶立体选择性强
一种甲基色氨酸转化制备方法

[发明专利]高效液相色谱和质谱联用快速筛选血管紧张素转化酶抑制剂的方法-CN200610031168.4无效
发明人：陈波;肖晓峰;姚守拙 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2006-01-23 - 公布日： 2006-09-13 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种用高效液相色谱和质谱联用快速筛选血管紧张素转化酶抑制剂的方法。以马尿酸双甘肽或马尿酸组氨酸亮氨酸为底物，以纯化的兔肺血管紧张素转化酶或者非乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝的人血浆为血管紧张素转化酶的来源。本方法较普通的分光光度法或者高效液相色谱法简单、快速、高效。单个样品的总检测时间或者血浆样品的血管紧张素转化酶活力的分析时间不到原有方法的二分之一。可适用于快速分析天然产物提取物、单体以及上市的血管紧张素转化酶抑制剂在体外对血管紧张素转化酶的抑制情况，而且可用于人血浆中血管紧张素转化酶活力的快速分析。
高效色谱联用快速筛选血管紧张转化抑制剂方法

[发明专利]一种树脂固定卤醇脱卤酶催化合成(R)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯的工艺-CN201510918663.6有效
发明人：许成兵;鲍烨烨;鲍甜甜;顾理群;梁国斌 -专利权人：江苏万年长药业有限公司
申请日： 2015-12-11 - 公布日： 2016-03-02 - 主分类号： C12P13/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种树脂固定卤醇脱卤酶催化合成(R)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯的工艺，以(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(ATS-4)为底物，采用酶法合成ATS-5，针对酶法反应速率和转化率较低的缺陷，选取树脂为载体，吸附法HDHH，该法能使得酶重复利用，提高底物转化率及产物得率，从而降低生产成本，经试验，HHDH的固定率在45％以上，第一次ATS-5产物生成率在75％以上，甚至高达94.13％，固定化酶回收利用之后第二次转化率在35％以上，最高至50％，反应条件温和，无酶残留，酶可重复利用，反应速度快，成本低，产物得率高，并且没有副反应存在，适合工业化大生产。
一种树脂固定卤醇脱卤酶催化合成氰基羟基丁酸工艺

[发明专利]L‑鸟氨酸酶法转化制备方法-CN201510287808.7有效
发明人：焦庆才;刘均忠;高亮;陆阳;刘茜 -专利权人：南京大学
申请日： 2015-06-01 - 公布日： 2018-02-27 - 主分类号： C12P13/10 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种L‑鸟氨酸酶法转化制备方法。该制备方法采用含有精氨酸的料液或精氨酸粗品或精氨酸盐粗品为底物配制酶转化液，加入具有精氨酸酶活性的菌体细胞或酶粗提液，在25～55℃、pH 7～11条件下进行酶促反应，利用等电点结晶和离子交换相结合的方法分离制备转化产物该方法以廉价的L‑精氨酸料液为底物酶法合成了附加值较高的L‑鸟氨酸盐酸盐，具有原料来源广，酶促转化效率高，操作简便，生产成本低等优点。
鸟氨酸转化制备方法

[发明专利]一种高效联产L-苯甘氨酸及葡萄糖酸的策略-CN201610574812.6有效
发明人：饶志明;刘巧利;周俊平;杨套伟;张显;徐美娟 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-07-20 - 公布日： 2020-03-24 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明是一种将葡萄糖脱氢酶与L‑亮氨酸脱氢酶在大肠杆菌中单独和共表达，利用重组大肠杆菌酶法和全细胞法联产L‑苯甘氨酸和葡萄糖酸盐的方法。本发明在于：将葡萄糖脱氢酶基因和L‑亮氨酸脱氢酶基因构建重组单独和共表达载体并将其转化至基因工程菌大肠杆菌内。利用重组菌酶法和全细胞法转化可以促进辅因子在转化体系中的循环，仅需添加少量外源辅因子或不添加外源辅因子，利用该辅因子循环再生系统可以利用底物苯甲酰甲酸及葡萄糖联产高附加值的L‑苯苷氨酸和葡萄糖酸，该转化过程简单快捷在5L发酵罐中转化2‑4h，该方法所得的L‑苯甘氨酸和葡萄糖酸产量分别可达58.8g/L及75.6g/L，为其工业化生产提供了一种实际有效策略。
一种高效联产甘氨酸葡萄糖策略

[发明专利]L-酪氨酸或L-酪氨酸衍生物酶法转化制备方法-CN201310289373.0有效
发明人：焦庆才;刘均忠;常俊俊;冯莹莹;刘茜 -专利权人：南京大学
申请日： 2013-07-10 - 公布日： 2013-10-09 - 主分类号： C12P13/22 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种L-酪氨酸或L-酪氨酸衍生物(L-3-羟基酪氨酸)的酶法转化制备方法。该制备方法采用含丙酮酸的料液为底物，加入具有酪氨酸酚裂解酶活性的菌体细胞或粗酶液、氨水、苯酚或邻苯二酚，25～55℃、pH7～11条件下进行酶促反应，利用等电点结晶法分离制备转化产物L-酪氨酸或L-多巴该方法以廉价的丙酮酸料液为底物酶法合成了附加值较高的L-酪氨酸或L-多巴，具有原料来源广，酶促转化效率高，操作简便，生产成本低等优点。
酪氨酸衍生物转化制备方法

[发明专利]一种生物酶法合成D-苹果酸的方法-CN201811562095.0有效
发明人：李晚军;王苓;伍万兵;陈纹锐;张丽 -专利权人：四川同晟生物医药有限公司
申请日： 2018-12-20 - 公布日： 2022-04-22 - 主分类号： C12P7/46 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物酶法合成D‑苹果酸的方法，属于有机酸制备领域，具体涉及一种用大肠杆菌工程菌全细胞酶法制备D‑苹果酸的方法。本发明利用基因工程手段在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌中共表达了马来酸水合酶的大小亚基，通过生物发酵获得过表达马来酸水合酶的菌体，全细胞生物酶法转化马来酸合成D‑苹果酸，产量为200.17g/L，转化率高达本发明构建基因工程菌培养条件简单，发酵周期短，发酵成本低，易于实现菌体高密度发酵，菌体收率高，底物转化率高，有利于生物酶法合成D‑苹果酸的产业化大规模生产。
一种生物酶合成苹果酸方法

[发明专利]一种L-天冬氨酸的酶法转化制备方法-CN201810436743.1在审
发明人：徐礼生 -专利权人：宿州学院
申请日： 2018-05-09 - 公布日： 2018-09-14 - 主分类号： C12P13/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种L‑天冬氨酸的酶法转化制备方法，步骤如下：将具有天冬氨酸酶活性的菌株于培养基中发酵培养，得含天冬氨酸酶的湿菌体；将湿菌体加入固定化混合物中，混合后滴加到氯化钙溶液中，形成固定化细胞；其中，固定化混合物包括纳米二氧化硅、海藻酸钠和戊二醛；将固定化细胞加入转化液中进行酶促反应，再通过等电点结晶法分离得L‑天冬氨酸。本发明采用L‑天冬氨酸的特定菌株，在发酵培养基中培养以高效表达L‑天冬氨酸酶，并利用纳米二氧化硅、海藻酸钠和戊二醛作为固定化混合物来固定化天冬氨酸酶，使酶法合成L‑天冬氨酸具有较高的催化速率和转化率；此外，酶法合成反应还具有条件温和、酶立体选择性强的优点。
天冬氨酸酶天冬氨酸固定化混合物纳米二氧化硅固定化细胞海藻酸钠酶法合成酶法转化湿菌体戊二醛菌株制备等电点结晶法发酵培养基立体选择性氯化钙溶液发酵培养高效表达酶促反应培养基速率和转化液滴加催化

[发明专利]一种全细胞转化苯丙氨酸生产苯乳酸的方法-CN201810048337.8在审
发明人：王淼;刘龙;王秀婷;堵国成;李江华;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-01-18 - 公布日： 2018-07-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种全细胞转化苯丙氨酸生产苯乳酸的方法，属于酶工程技术领域。本发明成功实现了L‑氨基酸脱氨酶，L‑乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶共表达菌株的构建。全细胞转化L‑苯丙氨酸可生产30g/L苯乳酸，转化率为100％。此全细胞转化体系的建立，解决了化学法合成苯乳酸的步骤繁琐、得率低、污染环境等问题及酶法转化生产α‑酮戊二酸的转化率低的问题，实现了无污染、高产率、一步法生产苯乳酸，为后续工业化生产奠定了一定的理论基础。
苯乳酸全细胞苯丙氨酸转化生产共表达菌株化学法合成甲酸脱氢酶酶工程技术乳酸脱氢酶一步法生产理论基础酶法转化酮戊二酸转化体系高产率脱氨酶氨基酸得率构建污染成功

[发明专利]L-岩藻糖的生物催化生产方法-CN201680018062.2有效
发明人： V·纳维茨卡斯;M·布罗伊尔;M·普尔;M·魏因加藤;K-U·鲍尔代纽斯;W·塞格尔 -专利权人：巴斯夫欧洲公司
申请日： 2016-02-19 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12P19/02 文献下载
摘要：本发明涉及生物催化方法，包括纯酶法、混合酶法‑发酵法和纯发酵方法，其用于将L‑岩藻糖醇直接单步转化成L‑岩藻糖，以容易地以大量和高水平纯度获得L‑岩藻糖。本发明还涉及适合的重组微生物和真菌，以及它们在用于单步转化L‑岩藻糖的所述方法中的用途。
岩藻糖生物催化生产方法

[发明专利]海洋微生物酶法制备α‑环糊精响应面设计方法及应用-CN201710523522.3有效
发明人：郝建华;王伟;刘均忠;孙晶晶 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2017-06-30 - 公布日： 2017-10-17 - 主分类号： C12P19/18 文献下载
摘要：本发明涉及海洋微生物酶法制备α‑环糊精响应面设计方法及应用，属于海洋微生物酶领域。具体包括酶法转化的底物种类、底物浓度、来源于海洋微生物菌株Y112的α‑环糊精葡萄糖基转移酶添加量、转化温度、反应时间和反应pH，以及通过响应面法获得的最优制备方法。最优条件为：马铃薯淀粉浓度为5％，加酶量200u/g(淀粉)，pH值为8.4，温度30摄氏度，转速200转每分钟，反应6小时。该条件下α‑环糊精转化率可以达到28.67％。所述方法去掉了有机溶剂正癸醇的应用，同时保证了转化效率，且该方法工艺简单，快速效果好，用来转化淀粉制备α‑环糊精有效、可靠、经济。
海洋微生物法制环糊精响应设计方法应用

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