本发明公开了一种泛酸合成酶突变体、编码基因、载体及应用,属于酶工程技术领域。本发明的泛酸合成酶突变体泛酸合成酶突变体,由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的泛酸合成酶的第5位和/或第176位氨基酸经定点突变获得。本发明通过多序列氨基酸比对,进行定点突变,提高泛酸合成酶的催化效率,进一步提高泛酸合成酶产量。本发明构建的泛酸合成酶的重组大肠杆菌可将泛酸合成酶酶活较出发菌株提高1.25倍。改造后的基因工程菌产酶能力显著提高,摇瓶发酵生产泛酸合成酶酶活达到144.266U/mL,更适合工业应用,可降低生产成本,提高生产效率。
本发明提供一种5‑氨基乙酰丙酸合成酶(ALA合成酶),所述ALA合成酶的C端末位氨基酸残基缺失或为非丙氨酸,和/或所述ALA合成酶的氨基酸序列在对应于SEQ ID NO:1的第403位的氨基酸残基缺失或为非丙氨酸,和/或所述ALA合成酶的C端末位添加1‑N个任意氨基酸残基且具有ALA合成酶活性。本发明还提供了制备该酶的方法,含有该酶的表达载体、宿主细胞、该酶在ALA生产中的应用以及改造ALA合成酶以提高其活性的方法。
本发明公开了一种使植物具有抗咪唑啉酮类除草剂特性的乙酰乳酸合成酶及其应用,该乙酰乳酸合成酶的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示;编码该乙酰乳酸合成酶的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该乙酰乳酸合成酶在水稻品种“CL55”中表达,与野生型乙酰乳酸合成酶蛋白质相比具有4个突变位点。将编码乙酰乳酸合成酶的基因转化到植物中编码乙酰乳酸合成酶,可使转基因植物具有抗咪唑啉酮类除草剂的特性。