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[发明专利]一种粪便采集、保存及检测装置及方法-CN201910556269.0在审
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海孚清生物科技有限公司
申请日： 2019-06-25 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： G01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种粪便采集、保存及检测装置及方法，装置包括采集器和样本存储分流器，采集器包括上套筒、下套筒、支撑杆、弹簧、推杆和伞面，伞面均匀包覆在支撑杆上并通过所述支撑杆实现撑开及收缩，上套筒和下套筒可拆卸式连接，上套筒具有第一中空内腔，下套筒上端开口且具有第二中空内腔，弹簧及支撑杆位于第二中空内腔中，支撑杆的下端穿过弹簧后从下套筒的下端伸出，推杆从上而下贯穿上套筒的第一中空内腔后伸入下套筒的第二中空内腔中并抵住支撑杆的上端；样本存储分流器包括依次连接的保存液腔、活塞腔和分流腔。本发明具有成本低、制作简单、有效刮取表面样本、能够半定量、操作简单易学等特点，极大地规避了实验者的不适体验。
一种粪便采集保存检测装置方法

[发明专利]用于分离滋养层细胞的核酸适配体、分离滋养层细胞的方法和染色体拷贝数变异分析的方法-CN201710183220.6有效
发明人：王臣;罗海贝;石坚;吴烈华 -专利权人：领航基因科技（杭州）有限公司
申请日： 2017-03-24 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于分离滋养层细胞的核酸适配体、利用该核酸适配体分离滋养层细胞的方法以及利用该方法获得的滋养层细胞进行染色体拷贝数变异分析的方法，具体如下：先从宫颈脱落细胞中分离和纯化胎盘滋养层细胞，以滋养层细胞为起始样本提取胎儿来源的核酸，并利用数字PCR技术分别对目标易变染色体和参比染色体上特定单拷贝基因的拷贝数进行定量，通过分析两者比值来确定目标易变染色体的拷贝数变异特征。本发明选择特定序列的核酸适配体，配合免疫磁珠进行滋养层细胞的分离，极大缩短样本的处理时间，并利用数字PCR技术检测，设计特有的引物和探针，降低对PCR扩增效率的影响，因此与传统方法相比，该方法简便高效、快速准确。
用于分离滋养细胞核酸适配体方法染色体拷贝变异分析

[实用新型]一种薄片式PCR扩增芯片-CN201920964411.0有效
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海孚清生物科技有限公司
申请日： 2019-06-25 - 公布日： 2020-05-19 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种薄片式PCR扩增芯片，包括芯片主体，芯片主体包括多个连续并列布置的试剂腔，试剂腔具有薄壁且上端开口，试剂腔的上端开口处设有自密封式封口条，试剂腔的高度为8mm以下，试剂腔的腔壁厚度为0.5mm以下。本实用新型结构简单，通过减小扩增试剂腔的厚度和壁厚使得PCR扩增能够更加有效地传输热量，提高扩增效率；降低壁厚的同时也筛选材料保证硬度，方便将扩增芯片插入热敏Block的狭缝内充分接触，也便于芯片直立进行加液操作；将多个试剂腔制在一张芯片上增加通量；封口条的设计也非常便于同时对多个试剂腔进行密封液体的操作，操作体验极佳，能够有效提高PCR的扩增和操作效率。
一种薄片 pcr 扩增芯片

[实用新型]一种可冲式便隐血检测纸伞-CN201920964395.5有效
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海孚清生物科技有限公司
申请日： 2019-06-25 - 公布日： 2020-04-14 - 主分类号： G01N33/72 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种可冲式便隐血检测纸伞，包括伞面、伞轴和试纸条，伞面为软性吸水材质，伞面的中部设有小孔，伞轴为硬质杆，伞轴的下端穿过小孔且固定，试纸条为卷筒状，试纸条套在伞轴上且位于伞面上方，试纸条的吸样端与伞面接触，试纸条由下而上依次包括吸样端、显色段和吸水端。本实用新型直接从新鲜样本中检测，获取最准确的隐血信息；检测体验优化，操作和读取信息简单易懂，避免操作者直视粪便样本的操作，心理压力小；居家检测，并在检测完成后，耗材直接随水流冲走，避免额外的人工操作，可接受性极强；耗材仅有试纸条和若干纸质材料组成，成本极低，制备简单。
一种可冲式便隐血检测纸伞

[实用新型]一种粪便采集、保存及检测装置-CN201920965308.8有效
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海孚清生物科技有限公司
申请日： 2019-06-25 - 公布日： 2020-04-14 - 主分类号： G01N1/02 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种粪便采集、保存及检测装置，包括采集器和样本存储分流器，采集器包括上套筒、下套筒、支撑杆、弹簧、推杆和伞面，伞面均匀包覆在支撑杆上并通过所述支撑杆实现撑开及收缩，上套筒和下套筒可拆卸式连接，上套筒具有第一中空内腔，下套筒上端开口且具有第二中空内腔，弹簧及支撑杆位于第二中空内腔中，支撑杆的下端穿过弹簧后从下套筒的下端伸出，推杆从上而下贯穿上套筒的第一中空内腔后伸入下套筒的第二中空内腔中并抵住支撑杆的上端；样本存储分流器包括依次连接的保存液腔、活塞腔和分流腔。本实用新型具有成本低、制作简单、有效刮取表面样本、能够半定量、操作简单易学等特点，极大地规避了实验者的不适体验。
一种粪便采集保存检测装置

[发明专利]POCT的PCR结果快速获得方法及装置-CN201911077378.0在审
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海千履基因科技有限公司
申请日： 2019-11-06 - 公布日： 2020-01-31 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种POCT的PCR结果快速获得方法，将待检测样品平均分成N份，将各个平分后的样品于相同的条件下同时进行荧光定量PCR扩增，并实时监测各个平分后的样品的荧光值，N为不小于100的自然数，平分后的样品分别位于不同的反应容器内且均被放置于相同的空间内并处于同样的反应条件进行PCR扩增，各个反应容器的高宽比大于1。利用本发明的方法，能够将利用PCR进行POCT的检测时间缩短至15分钟以内，实现分子诊断真正的即时化，本发明采用分液扩增模式、多点背景对比寻找突破阈线、增加光路检测距离三个方面进行PCR扩增设计和检测模式实现快速扩增的目标，具备稳定、快速、准确的特点。
扩增荧光定量PCR 待检测样品反应条件分子诊断光路检测检测模式时间缩短实时监测高宽比荧光分液检测

[发明专利]一管式高特异性核酸产物的PCR扩增方法、核酸快速检测方法和核酸检测试纸条-CN201911045819.9在审
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海千履基因科技有限公司
申请日： 2019-10-30 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种高特异性核酸产物的PCR扩增方法，包括第一循环阶段和第二循环阶段，且第一循环阶段的退火/延伸温度高于第二循环阶段，PCR扩增时的反应体系中包括一对引物，一对引物中的任意一个的5’端连接有A，在进行PCR扩增时的反应体系中还包括探针，探针标记有B，探针的5’端不能被酶切，探针的3’端不能被延伸。利用本发明的扩增方法使得目的核酸序列被快速而高效的扩增，且在目的核酸序列上特异性的结合了检测标记。因而使得核酸检测效率高，检测速度快且结果准确度高。本发明还公开了一种核酸快速检测方法，利用本发明的核酸检测方法，能够利用普通的胶体金试纸条进行靶核苷酸序列的快速检出，操作简单，成本低。
循环阶段探针核酸检测核酸序列一对引物扩增退火靶核苷酸序列胶体金试纸条结果准确度特异性核酸检测标记快速检测探针标记延伸核酸检出酶切检测

[发明专利]核酸提取与检测一体化耗材及包含所述耗材的核酸检测装置、核酸检测方法-CN201910369752.8在审
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海千履基因科技有限公司
申请日： 2019-05-06 - 公布日： 2019-07-19 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种核酸提取与检测一体化耗材，其包括用于进行核酸扩增的第一腔室，用于对核酸进行检测的第二腔室和用于对核酸进行提取的第三腔室。第三腔室的下端与第一腔室的上端相互卡接，第一腔室的下端与第二腔室的上端相互卡接，第一腔室、第二腔室和第三腔室均可实现独立密封。利用本发明的耗材能够实现生物样本中核酸检测的一体化操作，给分子诊断的临床应用提供了一种更便捷、高效的工具。本发明还公开了一种核酸提取与检测方法，通过将生物样本在低浓度强碱和机械震荡的综合作用下使得核酸提取效率大幅增加，利用本发明的核酸检测方法，与传统的试剂盒检测方法相比结果具有一致性，但是整个检测过程的用时明显缩短，且操作更为简便。
第一腔室核酸提取耗材第二腔室核酸检测检测腔室生物样本上端核酸卡接下端强碱核酸检测装置试剂盒检测一体化操作独立密封分子诊断核酸扩增机械震荡临床应用综合作用一体化传统的用时

[发明专利]一种在芯片内部平铺液滴的方法-CN201611265154.9有效
发明人：赵然;聂梦月;罗海贝 -专利权人：领航基因科技（杭州）有限公司
申请日： 2016-12-30 - 公布日： 2019-06-11 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种在芯片内部平铺液滴的方法，所述芯片包括上片和下片，上片和下片之间具有用于平铺储存液滴的液滴存储腔以及与所述液滴存储腔连通的液滴形成孔道和排油孔道，所述液滴形成孔道的高度低于所述腔室，使得液滴形成孔道与所述液滴存储腔的连接处具有形成液滴的台阶结构，所述方法包括：(1)将油相充满整个液滴存储腔；(2)将水相通过压力泵从进样孔道输入芯片，水相在所述台阶结构处形成液滴，平铺在所述液滴存储腔内，同时油相从排油孔道排出。本发明方法通过将油相充满液滴存储腔，水相通过压力泵从液滴形成孔道输入芯片，水相在台阶结构处形成液滴并平铺开来，同时油相从排油孔道排出，从而快速、方便在芯片上制备大量液滴。
液滴孔道存储腔平铺液滴形成台阶结构排油芯片输入芯片压力泵排出上片下片储存液进样腔室制备连通

[发明专利]一种快速检测核酸样本的方法及系统-CN201811283288.2在审
发明人： 罗海贝;王臣 -专利权人：上海千履基因科技有限公司
申请日： 2018-10-31 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速检测核酸样本的方法及系统，一种快速检测核酸样本的方法，包括以下步骤：S1：样本提取待检测核酸模板，制成PCR反应体系；S2：PCR扩增；S3：PCR产物检测，其特征在于，所述S2：PCR扩增包括如下步骤：S21：通过驱动件驱动所述PCR反应体系流经启动温度区，完成DNA聚合酶的热启动和待检测核酸模板的变性；S22：所述驱动件继续驱动所述PCR反应体系循环流动在变性温度区和退火温度区之间进行扩增；S23：扩增结束后，所述驱动件继续驱动所述PCR反应体系流动到PCR产物检测区。通过PCR反应体系液体或液滴的循环流动代替通常的原位温度模块的反复升降温过程，实现高效、快速、低价PCR，并提供与该套PCR模式相匹配的快速检测核酸样本的装置。
核酸样本快速检测驱动件温度区核酸模板循环流动变性驱动扩增退火温度模块样本提取热启动检测液滴匹配升降流动

[发明专利]一种微滴式数字PCR生物芯片-CN201611263102.8有效
发明人：赵然;聂梦月;罗海贝 -专利权人：领航基因科技（杭州）有限公司
申请日： 2016-12-30 - 公布日： 2019-01-18 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本发明公开了一种微滴式数字PCR生物芯片，包括由上片和下片贴合形成的芯片本体，所述芯片本体内部设有进样腔、液滴存储腔以及排油腔，芯片本体表面设有分别与进样腔和排油腔连通的进样孔和排油孔，所述进样腔和液滴存储腔之间、液滴存储腔与排油腔之间分别设有多个液滴形成孔道和排油孔道，所述液滴形成孔道和排油孔道的高度均小于液滴存储腔的高度。本发明芯片，水相由较为狭窄的液滴形成孔道进入到较为宽阔的液滴存储腔时，水相在部分进入液滴存储腔时，由于表面张力作用流动加速，而与液滴形成孔道内的水相发生断裂，形成液滴。制备的液滴大小均一，制备速度快、通量高。
液滴存储腔孔道液滴形成进样腔排油腔生物芯片芯片本体数字PCR 排油微滴制备表面张力作用芯片本体表面进样孔排油孔均一上片贴合通量下片连通断裂狭窄芯片流动

[发明专利]检测SDC2基因甲基化的方法和试剂盒-CN201810490724.7在审
发明人：秦楠;罗海贝;冯俊;王臣;赵然;陈小凤 -专利权人：上海锐翌生物科技有限公司
申请日： 2018-05-21 - 公布日： 2018-10-12 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测SDC2基因甲基化的方法和试剂盒。本发明提供的检测待测样本中SDC2基因甲基化的方法，包括：从所述待测样本中提取DNA；将所述DNA样本进行甲基化处理，得到甲基化处理后的DNA；以内参基因作为标准，对所述甲基化处理后的DNA进行荧光定量PCR检测，确定检测结果；其中，在进行所述荧光定量PCR检测时，所述荧光定量PCR检测体系中加入α‑酪蛋白。同时还提供了一种检测SDC2基因甲基化的试剂盒。本发明以SDC2基因甲基化检测作为可靠的肠癌标记物，其对结直肠癌检测的灵敏度达到90％以上，特异性在93％以上。
基因甲基化荧光定量PCR检测甲基化试剂盒待测样本种检测检测基因甲基化检测检测结果结直肠癌提取DNA 肠癌标记物酪蛋白灵敏度基因

[发明专利]粪便宿主DNA甲基化检测方法-CN201810266872.0在审
发明人： 罗海贝;王臣;赵然;冯俊;陈小凤 -专利权人：上海锐翌生物科技有限公司
申请日： 2018-03-28 - 公布日： 2018-06-29 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提出了提取粪便中宿主DNA的试剂组合物及利用其提取粪便中宿主DNA的方法、DNA甲基化的方法和对经过甲基化的粪便宿主DNA进行甲基化特异性PCR检测的试剂盒及方法。所述试剂组合物包括：提供硫酸根离子的裂解液A；以及提供钙离子的絮凝剂。利用本发明的试剂组合物能够充分提取出粪便中的宿主DNA，且提取效率较好、宿主DNA纯度较高，操作简便，适于规模化应用。
宿主DNA 粪便试剂组合物甲基化特异性PCR 甲基化检测硫酸根离子提取效率钙离子规模化甲基化裂解液试剂盒絮凝剂检测应用

[发明专利]一种免疫磁珠法分离胎盘滋养层细胞的方法-CN201611187878.6在审
发明人：王臣;罗海贝;吴烈华 -专利权人：华东医药（杭州）基因科技有限公司
申请日： 2016-12-20 - 公布日： 2017-11-03 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明公开了一种免疫磁珠法分离胎盘滋养层细胞的方法，包括以下步骤(1)免疫磁珠偶联特异性抗体的制备，向免疫磁珠中加偶联剂和能够特异性捕获胎盘滋养层细胞的抗体进行孵育；(2)洗涤(1)中偶联抗体的免疫磁珠2次，后保存在保存液中备用；(3)收集胎盘滋养层样本，采用酶解法制备为样本细胞悬液；(4)把(3)中的样本细胞悬液洗涤2次；(5)加入(2)中的偶联抗体的免疫磁珠进行孵育；(6)洗涤孵育完成的(5)中的免疫磁珠2次，弃上清，即可得到纯化的胎盘滋养层细胞，采用免疫磁珠法细胞分选技术，利用抗体偶联磁珠实现对胎盘滋养层细胞的特异性捕获，简单几步便能轻松、快速的实现滋养层细胞的分离，且易于实现自动化。
一种免疫磁珠法分离胎盘滋养细胞方法

[发明专利]一种基于扩增矫正的数字PCR检测方法-CN201611200672.2在审
发明人：曹恺;罗海贝 -专利权人：华东医药（杭州）基因科技有限公司
申请日： 2016-12-22 - 公布日： 2017-11-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于扩增矫正的数字PCR检测方法，在特定疾病的单拷贝待测基因以外，引入另一个单拷贝基因作为参比基因，在理想情况下，待测基因和参比基因的两种荧光信号的拷贝数比值应为11，然而实际扩增中，引物、探针等因素引起的基因间扩增效率的不同引起芯片微孔内的拷贝数不一致，进而导致了上述拷贝数比值为偏离A且偏离了11，本发明构建了与疾病待测基因和参比基因序列均高度相似的载体作为内参，待测基因和参比基因中载体的拷贝数的比值理论值为11，实际扩增出现了偏离B，多次实验确定了偏离A基本等于偏离B，可通过分别求得待测基因和参比基因的各模板的拷贝数比值来消除偏离，提高了数字PCR检测的准确性。
一种基于扩增矫正数字 pcr 检测方法

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