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[发明专利]一种DNA甲基化特异位点的电化学分析方法-CN201811038144.0有效
发明人： 郑峻松;黄健;张姝;李艳 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2018-09-06 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12Q1/6825 文献下载
摘要：本发明属于基于CH3‑HS疏水结构域液相表征特性锚定DNA甲基化特异位点的电化学分析，公开了一种DNA甲基化特异位点的电化学分析方法。电化学方法因快速、简便、灵敏、易于实现微型化等优点，利用其研究DNA甲基化具有独特的优势。本发明甲基化DNA在液相条件下形成以甲基CH3‑为内核的“疏水球”这一物化特性，实现对甲基化碱基位点的定位分析。本发明基化DNA在液相条件下形成以甲基CH3‑为内核的“疏水球”这一物化特性，实现对甲基化碱基位点的定位分析。本发明提供了一系列已知甲基化位置的靶序列(DNA S2，DNA S3,DNA S4,DNA S5,DNA S6,table 1)。
一种 dna 甲基化特异电化学分析方法

[发明专利]一种光电化学生物传感器、制备方法及应用-CN202211156612.0在审
发明人： 郑峻松;朱垂雨;夏梦诗;汪莉娜;李承红;刘华敏;方立超;黄辉 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2022-09-22 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明属于生物传感技术领域，公开了一种光电化学生物传感器、制备方法及应用，包括制备g‑C3N4@TiO2纳米复合材料并滴加在铟锡氧化物ITO导电玻璃上，通过原位还原HAuCl4将AuNPs沉积在g‑C3N4@TiO2表面，得到AuNPs/g‑C3N4@TiO2/ITO电极；通过Au‑S键在AuNPs/g‑C3N4@TiO2涂层电极的表面固载3D‑BDN；通过基于5－甲基胞嘧啶抗体和目标DNA上的5－甲基胞嘧啶位点之间的免疫识别将PDANS‑Ab‑CdTeQDs生物共轭物固定在电极表面；得到基于功能化纳米材料的光电化学生物传感器。本发明为5‑mC检测提供一种高灵敏度、高特异的新技术。
一种光电化学生物传感器制备方法应用

[发明专利]一种新型光电化学传感器装置-CN202211399492.7在审
发明人：夏梦诗;郑峻松;朱垂雨;李承红;刘华敏 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2022-11-09 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： G01N27/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型光电化学传感器装置，包括第一套筒、顶盖、参比电极组件、通气防堵组件、电极座组件、第二容纳槽、母插头、导线、第三接线柱、公插头、紧固套和工作电极；本发明所设计的电极座组件通过将工作电极和辅助电极集成在安装座上，实现了电极可拆装的功能，提高了传感器的适用范围，且该组件具备良好的气密性，能防止待检测液接触到组件内的接线柱，从而避免对检测结果造成影响；本发明的通气防堵组件通过使用气体吹拂参比电极的出液口，可以避免参比电极的液络部被堵塞，且无需人工干预，使用更为方便；本发明的参比电极组件通过螺纹杆调节出液口的开合程度，能够实现对参比液渗出速度的精确调节。
一种新型电化学传感器装置

[发明专利]一种DNA甲基化光电化学传感器、制备方法及应用-CN202211178513.2在审
发明人： 郑峻松;朱垂雨;夏梦诗;汪莉娜;黄辉;刘华敏;方立超;李承红;朱全敬 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2022-09-26 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明属于光电化学技术领域，公开了一种DNA甲基化光电化学传感器、制备方法及应用，对杂交缓冲液中镁离子浓度进行优化，确定镁离子的最佳浓度为12mM；对靶序列在电极表面的孵育时间进行优化，使用三维刚性DNA桥式纳米探针作为捕获探针，则三维刚性DNA桥式纳米探针与靶序列结合的最佳孵育时间为1h。本发明的DNA甲基化光电化学传感器具有优异的稳定性和特异性，采用DNA三棱柱框架作为纳米机械手臂拉伸捕获探针，形成三维刚性DNA桥式纳米探针，将靶标横向固定在电极表面，使得每个位点到电极表面的距离大致相同，可以减少甲基疏水球与电极表面之间的空间位阻差异，提高检测准确性，用于多位点DNA甲基化的定量检测。
一种 dna 甲基化电化学传感器制备方法应用

[发明专利]基于功能化纳米材料的DNA甲基化检测装置-CN202211399483.8在审
发明人： 郑峻松;朱垂雨;夏梦诗;汪莉娜;李承红;刘华敏;方立超;黄辉 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2022-11-09 - 公布日： 2023-02-24 - 主分类号： C12M1/34 文献下载
摘要：本发明公开了基于功能化纳米材料的DNA甲基化检测装置，包括PCR扩增仪、安装台、支撑杆、运动管、清扫杆、第一齿轮、清洁棉套、安装块、电机、第一转轴、第二齿轮、固定块、第二转轴、第三齿轮、第四齿轮、壳体、第一键槽、第一通孔、第二键槽、针筒、第一限位键、旋钮和弹性活塞，本发明相较于现有的DNA甲基化检测装置，设计的清扫组件可以在检测后自动对工作台进行清理，防止出现工作人员忘记清理的情况；本发明设计的采样组件可以快捷的对针筒进行拆装，无需更换不同的采样装置，提高了工作效率；本发明设计的保存组件中的挡板可以完全封住进液管，可以安全的保存样品，避免了运输过程中出现意外造成样品损失。
基于功能纳米材料 dna 甲基化检测装置

[发明专利]基于光电化学生物传感技术的DNA甲基化检测装置-CN202211399485.7在审
发明人： 郑峻松;朱垂雨;夏梦诗;汪莉娜;李承红;刘华敏;方立超;黄辉 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2022-11-09 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12M1/10 文献下载
摘要：本发明公开了基于光电化学生物传感技术的DNA甲基化检测装置，包括底板，所述底板顶部中心安装有固定筒，且固定筒底部一侧安装有角度调节机构，固定筒内壁一侧安装有自动锁止机构，且固定筒顶部安装有固定板，本发明通过将离心机、光电甲基化检测设备本体和PCR扩增仪集成到转盘上，实现了离心、扩增和检测的一站式操作，极大地提高了检测效率；通过角度调节机构的设置，实现了转盘的自动转动，便于将需要使用的设备自动转动到使用者面前，通过自动锁止机构的设置，实现了转盘转动过程中的自动定位锁止，同时角度调节机构和自动锁止机构通过同步盘进行联动，通过同步盘的转动实现自动锁止机构的锁止和打开。
基于光电化学生物传感技术 dna 甲基化检测装置

[发明专利]一种新型光电化学传感器、制备方法及CysC检测方法-CN202211174770.9在审
发明人：夏梦诗;郑峻松;钱俊;陈红;朱垂雨;李承红;刘华敏 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2022-09-26 - 公布日： 2023-01-13 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明属于生物传感器技术领域，公开了一种新型光电化学传感器、制备方法及CysC检测方法，采用热合成法和氧化还原法合成Ti‑MOF@DM‑LZU1@Au作为光敏材料，构建DNA四面体和环状DNA模板；将来自DNA四面体顶部的单链DNA引物与环状DNA模板结合，启动RCA反应，产生重复的环状探针序列，形成G－四链体；合成双分子半胱氨酸/半胱氨酸－氯化血红素/G－四链体，制备氯化血红素/G－四链体和半胱氨酸－氯化血红素/G－四链体，组装得到光电化学免疫传感器。本发明的生物传感器具有良好的可重复性、选择性和稳定性，该PEC传感器策略为临床中其他蛋白分子的高灵敏度和快速检测提供了一种新的方法和思路。
一种新型电化学传感器制备方法 cysc 检测

[发明专利]一种基于纳米材料检测甲基化的电化学传感器-CN202110802043.1有效
发明人： 郑峻松;李艳;刘华敏;朱全敬;方立超;黄辉;邓均;李承红;汪莉娜;刘飞雪;朱垂雨 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-07-15 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： F16M11/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于纳米材料检测甲基化的电化学传感器，包括电化学传感器本体、第一限位条、第二限位条、滑轨、滑块、第一连接环、第二连接环、底盖、安装板、连接块、第一保护管、第一连接引脚、保护套、保护板、方形管、方形块、螺纹环、限位块、第一挡环、顶盖、装饰管、第三连接环、内螺纹管、外螺纹管、限位管、防磨圈、第二挡环、第二连接引脚、固定套、动触片、静触片和缓冲垫，通过将电化学传感器本体放置在装饰管的内部，有利于保护电化学传感器，延长了该装置的使用寿命，通过对电化学传感器本体上固定安装的方形块以及第二挡环进行限位处理，进而对电化学传感器本体进行限位固定，从而提高了对电化学传感器本体的固定安装效率。
一种基于纳米材料检测甲基化电化学传感器

[发明专利]一种电化学免疫用DNA甲基化特异性检测方法-CN202111123289.2在审
发明人： 郑峻松;李艳;刘华敏;方立超;朱全敬;黄辉;汪莉娜;朱垂雨;邓均;李承红;刘飞雪;吴春梅 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-09-24 - 公布日： 2021-12-31 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明公开了一种电化学免疫用DNA甲基化特异性检测方法，包括步骤一，DNA提取；步骤二，PCR扩增；步骤三，电化学免疫传感器检测；其中上述步骤一中，首先对样品进行预处理，然后取适量样品，加入裂解缓冲液，使样品在55～65℃的环境下静置1.5～2.5h进行裂解分离，然后取裂解分离后的上清液，用混合有机溶剂抽提出DNA，得到含DNA的抽提液；该发明采用电化学免疫传感器对PCR扩增产物进行检测，通过电化学免疫传感器的电流响应绘制电流曲线，通过电流曲线的变化，实现对DNA甲基化特异性检测的目的，该检测方式较为简单、全面，所需样本较少，且该电化学免疫传感器可重复使用，便于重复检测，降低了成本，便于推广使用。
一种电化学免疫 dna 甲基化特异性检测方法

[发明专利]一种基于核酸质谱技术的DNA甲基化水平的检测方法-CN202111126145.2在审
发明人： 郑峻松;李艳;刘华敏;朱全敬;黄辉;汪莉娜;方立超;朱垂雨;邓均;李承红;刘飞雪;吴春梅 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-09-26 - 公布日： 2021-12-28 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于核酸质谱技术的DNA甲基化水平的检测方法，包括以下步骤：步骤一，试验准备；步骤二，PCR反应；步骤三，SAP反应；步骤四，转录；步骤五，树脂纯化；步骤六，定量检测；所述步骤二中，向PCR引物中加入适量的缓冲液或超纯水，稀释单管PCR引物至浓度100μM，本发明相较于现有DNA甲基化水平的检测方法，设计了一种新型的DNA重亚硫酸盐转化方法，该方法无需添加DNA保护剂，转化速度快，该方法采用纯化柱对转化的DNA进行纯化，能够得到高转化率、高质量及高纯度的DNA模板，本发明采用核酸质谱技术检测DNA甲基化水平，该检测方法不仅操作简便、准确率高，而且成本较低，适用于癌症早期评估和大规模筛查。
一种基于核酸技术 dna 甲基化水平检测方法

[发明专利]一种电化学免疫用DNA甲基化位点对数量检测方法-CN202111123269.5在审
发明人： 郑峻松;刘华敏;李艳;朱全敬;邓均;黄辉;方立超;汪莉娜;朱垂雨;李承红;刘飞雪;吴春梅 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-09-24 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种电化学免疫用DNA甲基化位点对数量检测方法，包括以下步骤：步骤一，抽血采样；步骤二，梯度分离；步骤三，细胞裂解；步骤四，磁珠分离；步骤五，洗脱提取；步骤六，位点检测；其中在上述步骤一中，用医用注射器从待测体上抽取适量的血液，并注入医用采血管中，密封保存，得到血液样本；其中在上述步骤二中，用医用滴管从步骤一中得到的血液样本中取预定量滴入医用离心管中，并加入适量的淋巴细胞分离液，密封后再将医用离心管放到超速离心机上进行密度梯度离心，分离PBMC后得到血清样本；该发明采用磁珠法分离纯化DNA，简化了流程，降低了操作的难度，试样中DNA纯度高、含量多，分离效果好、用时短，检测通量高。
一种电化学免疫 dna 甲基化数量检测方法

[实用新型]一种高原作业能力评估预警时读卡-CN202121535980.7有效
发明人： 郑峻松;方立超;李艳;刘华敏;朱全敬;黄辉;邓均;李承红;汪莉娜;刘飞雪;朱垂雨 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-07-07 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种高原作业能力评估预警时读卡，包括读卡座，读卡座的内部开设有卡槽，卡槽内壁的底部固定连接有塑料衬垫，塑料衬垫顶端的一侧连接有血尿素检测试剂垫，塑料衬垫顶端的中部连接有吸水垫，塑料衬垫顶端的另一侧连接有血同型半胱氨酸检测试剂垫，读卡座顶部的中心安装有结果判读窗，读卡座顶部的一侧开设有延伸至卡槽一侧的第一加样孔，读卡座顶部的另一侧开设有延伸至卡槽另一侧的第二加样孔，本实用新型一种高原作业能力评估预警时读卡，设置结果判读窗、血尿素检测试剂垫、吸水垫和血同型半胱氨酸检测试剂垫，可以同时检测全血、血清或血浆样本中的同型半胱氨酸、尿素，使用方便，同时具有便携、操作简便特点。
一种高原作业能力评估预警时读卡

[发明专利]RNA中m5-CN202110767395.8在审
发明人： 郑峻松;朱全敬;李艳;方立超;李承红;邓均;黄辉;刘华敏;汪莉娜;刘飞雪 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-07-07 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： G01N27/416 文献下载
摘要：本发明属于生物基因技术领域，公开了一种RNA中m5C和m6A双重分析逻辑光电化学传感方法，RNA中m5C和m6A双重分析的逻辑光电化学传感方法包括构建H型纳米支架；进行DNA步行器的构建；进行DNA折纸的构建；进行电极表面修饰和光电信号检测。本发明检测灵敏度高，具有临床实验室推广应用前景；不同浓度的m5C靶序列不影响m6A靶序列的光电信号；当不同浓度的m6A靶序列与10‑7M m5C靶序列共同孵育后在同一根电极表面检测的625nm波长下的光电信号，不同浓度的m6A靶序列不影响m5C靶序列的光电信号，说明具有同时检测两种靶序列的能力。
rna base sup

[发明专利]一种基于DNA甲基化位点基因型的全基因组分型方法-CN202111123272.7在审
发明人： 郑峻松;刘华敏;李艳;方立超;黄辉;汪莉娜;邓均;朱全敬;朱垂雨;李承红;刘飞雪;吴春梅 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-09-24 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于DNA甲基化位点基因型的全基因组分型方法，包括以下步骤：步骤一，采集样品；步骤二，建立DNA文库；步骤三，文库测序；步骤四，鉴定位点；步骤五，基因型分型；所述步骤二中，联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD处理是指，用非待测区的内切酶和甲基化敏感的限制性内切酶同时消化DNA片段，随后通过MBD柱捕捉，保留了含有甲基化区的片段，所述步骤一中，针对一个群体中不同的时段，如白天和黑夜，本发明相较于现有的基因型分型方法，能够判断不同时段的环境对DNA甲基化状态的影响；本发明能够判断不同生长状态下的DNA甲基化状态的变化；本发明采用两种不同的处理DNA的方法，提高了基因型分型的精准性。
一种基于 dna 甲基化基因型基因组分方法

[发明专利]一种基于四面体DNA纳米探针的电化学分析方法及应用-CN202110931178.8在审
发明人： 郑峻松;陈曦;朱全敬;李艳;黄辉;汪莉娜;朱垂雨;方立超;邓均;刘华敏;李承红;刘飞雪;吴春梅 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-08-13 - 公布日： 2021-11-16 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明属于DNA甲基化分析技术领域，公开了一种基于四面体DNA纳米探针的电化学分析方法及应用，包括：四面体探针结构序列、不同的DNA甲基化靶序列、信号放大序列及比对序列。在四面体探针固定时间3h、靶序列杂交时间1h、HpaII内切酶酶切时间2h的条件下体现出最优性能，于1amol/L至1pmol/L的范围内表现出较好的检测能力，检出限达到0.93amol/L，灵敏度高。本发明的电化学生物传感技术在DNA甲基化检测方面具有独特的优点：能在较短时间内完成对甲基化DNA靶序列的特异性分析，操作方便、价格低廉、灵敏度高、特异性好、稳定性强，能有效地用于血清等复杂体系中的DNA甲基化检测。
一种基于四面体 dna 纳米探针电化学分析方法应用

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