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[发明专利]一种HRM检测烟草镉转运基因NtHMA4突变的方法-CN201711320346.X有效
发明人：张吉顺;任学良;赵海军;张超;王仁刚 -专利权人：贵州省烟草科学研究院;浙江大学
申请日： 2017-12-12 - 公布日： 2021-11-16 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种HRM检测烟草镉转运基因NtHMA4突变的方法，其特征在于：包含以下步骤：(1)采用CTAB法提取烟草样品苗期叶片基因组DNA；(2)以所述基因组DNA为模板，利用引物对进行PCR扩增；(3)PCR扩增产物利用HRM检测仪器LightScanner96进行突变位点扫描；(4)根据HRM曲线结果，判断烟草待检样品的基因型；当待测样品的HRM曲线与野生型对照贵烟1号一致时，则为野生型材料；如果出现其他曲线类型，且HRM荧光曲线峰值ΔF≥0.05，则为疑似基因突变材料；(5)DNA测序验证HRM筛选结果；(6)NtHMA4材料的镉表型测定。
一种 hrm 检测烟草转运基因 nthma4 突变方法

[发明专利]一种荧光PCR熔解曲线法检测HLA基因型的试剂盒-CN201710589013.0在审
发明人：许雅筑;郑毓仁;邱一帆;何佩勳 -专利权人：德必碁生物科技(厦门)有限公司
申请日： 2017-07-19 - 公布日： 2017-09-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供一种用荧光PCR熔解曲线法检测HLA基因型的试剂盒，包含HLA‑A、HLA‑B、HLA‑DRB1、HLA‑DQB1的基因分型，以含引物的96孔光学反应板进行扩增，藉由SYBR Green I对扩增的双股DNA产物主动结合，透过96孔熔解曲线的结果，综合判断HLA‑A、HLA‑B、HLA‑DRB1、HLA‑DQB1的低分辨率基因分型，从而辅助器官移植的配型诊断。
一种荧光 pcr 熔解曲线检测 hla 基因型试剂盒

[发明专利]荧光定量的指标确定方法-CN202010867137.2在审
发明人：李冬;杨智;贺贤汉 -专利权人：杭州博日科技股份有限公司
申请日： 2020-08-25 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提供了一种荧光定量的指标确定方法，涉及荧光定量检测技术领域，包括采集第一数量个循环对应的初始荧光定量PCR扩增数据；对第一数量中前第二数量个循环对应的初始PCR扩增数据进行线性拟合，确定扩增曲线基线；对初始PCR扩增数据去基线，得到目标PCR扩增数据；基于第一数量中除前第二数量以外的后第三数量个循环对应的目标PCR扩增数据确定PCR的指标。
荧光定量指标确定方法

[发明专利]等温扩增核酸的结果判定方法、系统、设备及存储介质-CN202310847533.2有效
发明人：葛永兵;贺志民;陈翀 -专利权人：广州普世君安生物科技有限公司
申请日： 2023-07-12 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： G16B30/00 文献下载
摘要：本发明提出了一种等温扩增核酸的结果判定方法、系统、设备及存储介质，在上样后待测样本确定样本源后确定目标基因的方法包括：获取反应检测体系中每单位时间点采集的用于绘制非线性函数曲线的信号数据集；收集某一时刻前的第一信号数据集，通过第一信号数据集的信号增速判断非线性函数曲线存在或不存在扩增分界点，确定所述某一时刻的非线性函数曲线类型；收集某一时刻前的第二信号数据集，通过第二信号数据集的信号同比增速确定对于非线性函数曲线类型匹配的准确度以及是否符合阳性样本特征本发明通过设置的多级判定方法输出判定结果，可提高等温扩增核酸结果判定的效率和准确性，还能应用于其他反应结果判定，具有较好的应用前景。
等温扩增核酸结果判定方法系统设备存储介质

[发明专利]检测转基因大豆MON87708的引物、试剂盒和方法-CN201510362478.3在审
发明人：蔡先全;岳巧云;单振菊;李蓉;柏建山;邱德义;吴坚明;周思渝 -专利权人：蔡先全
申请日： 2015-06-25 - 公布日： 2015-09-09 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：检测方法：提取样品DNA；利用试剂盒对步骤A中的样品DNA进行PCR扩增；扩增后对产物进行高分辨率熔解曲线分析，并结合扩增曲线判定结果。
检测转基因大豆 mon87708 引物试剂盒方法

[发明专利]一种荧光定量PCR检测灭活双歧杆菌数量的方法-CN202310051265.3在审
发明人：林哲宇;王旭龙;刘利辉;张亚红;常小庆;田硕 -专利权人：哈尔滨秋田虹健康科技集团有限责任公司
申请日： 2023-02-02 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：所述方法包括以下步骤：(1)以已知菌数的灭活双歧杆菌样品DNA作为模板利用引物对进行荧光PCR扩增，绘制得到双歧杆菌数量和扩增Ct值之间的标准曲线；(2)利用引物对对待检样品的DNA进行荧光PCR扩增，根据所述标准曲线得到所述待检样品中的灭活双歧杆菌数量；在步骤(1)和(2)中，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.3‑4所示。
一种荧光定量 pcr 检测灭活双歧杆菌数量方法

[发明专利]一种检测乳制品中大肠菌群的方法及所用引物-CN201410210385.4无效
发明人：安颖;齐炳理;陈世贤;张雅君 -专利权人：内蒙古伊利实业集团股份有限公司
申请日： 2014-05-19 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测乳制品中大肠菌群的方法及所用引物，所述方法主要包括：从待测乳制品中提取总DNA；以所提取的总DNA为模板，利用特异性引物进行PCR扩增；所述特异性引物为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2；对扩增结果进行分析判断。本发明的方法还可包括制作荧光定量PCR标准曲线，并将扩增结果和标准曲线比对计算出待测样品中大肠菌群细菌的活菌数。
一种检测乳制品大肠菌方法所用引物

[发明专利]用于分析核酸扩增反应的分析方法和系统-CN201510531061.5有效
发明人： R.诺贝尔 -专利权人：霍夫曼-拉罗奇有限公司
申请日： 2015-08-26 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： G16B20/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种以在较宽范围的分析物浓度里改善通过实时核酸扩增反应RNR(诸如聚合酶链式反应PCR)量化的线性(精确性和/或准确性)和/或限制存在干扰性物质的效应为目的的分析方法，其通过以与增长曲线与包含至少两个不同阈值水平的在RNR循环范围里的组合阈值函数(CTF)的交叉对应的循环数目测定RNR的量化循环数目(Cq)进行，所述量化循环数目(Cq)指示增长曲线的定量和/或定性分析结果，所述增长曲线指示RNR循环范围里对于RNR的每个扩增反应循环，分析物的荧光发射强度。
用于分析核酸扩增反应方法系统

[发明专利]一种定量检测混合型样品物种组成的PCR产物熔点分析法-CN201410619429.9在审
发明人：梁兴国;贾秀双;王静 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2014-11-05 - 公布日： 2015-02-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：该方法包括如下步骤：选择混合样品中的各物种进化速率适中的基因进行引物设计；根据相应模板和引物的单重PCR优化多重PCR条件；采用优化的条件对已知组分含量比的不同样品DNA进行扩增；通过测定多重PCR产物的熔解曲线，得出组分相应的熔解峰峰高值，将峰高比值与对应的样品组分含量比绘制标准曲线；对于组分含量比未知的样品，采用相同的条件进行扩增和熔解曲线测定，得出峰高比值，然后根据标准曲线计算出相应的组分含量比。本发明简便、快捷、成本低，无需对所有待测模板建立高质量标准曲线的基础之上，实现对物种混合型样品中各物种或组分的定量分析。
一种定量检测混合样品物种组成 pcr 产物熔点分析

[发明专利]基于双标记寡核苷酸探针熔解曲线的多重检测靶核苷酸序列的方法及其试剂盒-CN202110130298.8有效
发明人：许向华;张玲华;周中人 -专利权人：上海快灵生物科技有限公司;上海妙灵生物工程有限公司;上海快灵生物工程有限公司
申请日： 2021-01-30 - 公布日： 2022-03-04 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本申请涉及一种基于双标记寡核苷酸探针熔解曲线的多重检测靶核苷酸序列的方法及其应用的试剂盒，本发明采用双标记寡核苷酸探针对多重PCR扩增产物进行熔解曲线分析，特别是在单个荧光检测通道，通过具备相同荧光基团的至少一个双标记寡核苷酸探针(通常是两个或两个以上)和与之匹配的单链核酸产物的杂交双链的熔解曲线来进行检测；本发明能够实现一个荧光通道进行多重检测且每个被检靶位点的检测使用单一探针的效果，特别适用于利用单个荧光通道用于检测多个靶标，同时本发明有效结合了扩增曲线和溶解曲线的双重判读，更能够保证检测的特异性。
基于标记寡核苷酸探针熔解曲线多重检测核苷酸序列方法及其试剂盒

[发明专利]一种大肠癌标记物DCD的Q-PCR检测方法-CN202110176271.2在审
发明人：邱芳华;李秋明;龙华婧;刘道利 -专利权人：广州医科大学附属中医医院
申请日： 2021-02-06 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：该方法包括样品的RNA提取、逆转录和Q‑PCR扩增。本发明将DCD作为大肠癌候选的诊断指标及治疗标靶，先提取细胞或组织的RNA，设置内参引物和DCD基因引物分别对RNA进行逆转录，得到两组不同的扩增产物，再分别进行Q‑PCR反应，分别得到两组扩增产物的熔解曲线和扩增曲线
一种肠癌标记 dcd pcr 检测方法

[发明专利]一种chIRF3荧光定量RT-PCR的检测方法-CN201910546770.9在审
发明人：何秀苗;陈艳艳;刘玉晶;黄海佩;李尚泉;陈博文;沈巍巍 -专利权人：广西民族大学
申请日： 2019-06-24 - 公布日： 2019-09-17 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种chIRF3荧光定量RT‑PCR的检测方法，包括引物设计、总RNA提取、chIRF3基因的扩增、扩增产物与pUC‑T载体连接构建质粒标准品、荧光定量RT‑PCR扩增体系与条件、灵敏性、重复性本试验根据chIRF3基因序列设计引物，先用普通PCR方法扩增出目的片段，chIRF3片段大小为146bp，以扩增的片段和质粒的重组体为标准品再进行荧光定量PCR检测，评价本方法的性能。建立起的标准曲线的相关系数非常接近于1，熔融曲线显示成单一峰，无非特异性扩增与引物二聚体出现，建立的检测体系可以稳定灵敏地检测到最低1×10²copies/μL，组间及组内重复性试验结果显示其变异系数均在
检测扩增荧光定量标准品传染性法氏囊病病毒荧光定量PCR检测荧光定量RT-PCR 重复性试验结果特异性扩增特异性试验引物二聚体总RNA提取变异系数标准曲线构建质粒基因序列快速鉴定扩增产物目的片段熔融曲线设计引物先天免疫相关基因引物设计转录水平单一峰灵敏性三黄鸡重组体质粒灵敏感染基因试验研究

[发明专利]一种改进型恒温指数扩增技术及其在microRNA检测中的应用-CN201510383439.1有效
发明人：戴宗;陈俊;邹小勇 -专利权人：中山大学
申请日： 2015-07-01 - 公布日： 2018-09-25 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种改进型恒温指数扩增技术及其在microRNA检测中的应用。本发明通过在常规指数扩增模板的5’端与引物互补的区域内的一碱基上修饰一生物素来调节引物与扩增模板3’端和5’端的杂交速度，建立了改进型恒温指数扩增方法。该方法较常规恒温指数扩增方法，具有扩增效率更高，速度更快的优点，而且标准曲线的线性范围更宽，特异性更好，灵敏度更高。本方法具有很好的精确性，重复性和稳定性，可发展成为试剂盒并向市场推广。
扩增改进型扩增模板标准曲线扩增效率市场推广引物互补灵敏度试剂盒检测碱基引物修饰应用杂交

[发明专利]一种对淋巴丝虫检测的引物探针组合、试剂盒及检测方法-CN202310096407.8在审
发明人：胡秀文;刘知之;焦守伟;崔东明;李秀林;杨静;刘中华;王国强;李伟伟 -专利权人：江苏硕世生物科技股份有限公司
申请日： 2023-02-10 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种对淋巴丝虫检测的引物探针组合、试剂盒及检测方法，其具体步骤如下：根据淋巴丝虫特异性基因的保守片段分别设计引物探针；根据人源核糖核苷酸酶P基因设计一对内参基因引物探针EF、ER、EP；将上述引物探针和核酸扩增液组成反应液；在反应液中加入样本核酸后利用荧光PCR扩增技术在PCR仪上扩增；根据扩增曲线判别核酸中是否含有淋巴丝虫特异性基因。
一种淋巴丝虫检测引物探针组合试剂盒方法

[发明专利]一种检测棘孢木霉菌在土壤中定殖量的方法-CN201410007526.2有效
发明人：贺字典;高玉峰 -专利权人：河北科技师范学院
申请日： 2014-01-08 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开的一种检测棘孢木霉菌在土壤中定殖量的方法，包括如下步骤，（1）以棘孢木霉菌质量浓度对数值为X轴，荧光PCR扩增仪读取出的CT值为Y轴，绘制标准曲线；（2）将待测棘孢木霉菌接种于土壤中，接种后从土壤中提取出待测DNA并纯化；（3）用荧光定量PCR扩增法对待测DNA进行扩增，当扩增出基因片段为126bp的产物时，记录此时待测DNA的CT值，将该CT值带入标准曲线中，得到待测棘孢木霉的质量浓度对数值，根据公式计算出棘孢木霉菌在土壤中的定殖量本发明的优点在于，摸索出棘孢木霉与其它木霉异源性的特异性区域DNA，能够准确地单一检测出棘孢木霉的量，采用的荧光定量PCR扩增方法，棘孢木霉菌在每个质量浓度下都有相对应的CT值，检测结果准确。
一种检测棘孢木霉菌土壤中定殖量方法