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[发明专利]核酸分析装置以及核酸分析方法-CN201510136543.0在审
发明人：村山寿郎;高城富美男 -专利权人：精工爱普生株式会社
申请日： 2015-03-26 - 公布日： 2015-09-30 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：装置具备安装核酸扩增反应容器的安装部；分别加热容器的第一、第二部分的第一、第二加热器；使反应容器与加热器一体旋转的旋转机构；加热器控制部；旋转机构控制部；荧光测定器及核酸融解曲线解析部，容器含有核酸扩增反应溶液及与溶液相分离的油，旋转机构控制部进行核酸扩增反应循环期间，使容器的第一部分靠下的第一配置与第二部分靠下的第二配置交替地使容器旋转，循环结束后使容器为第二配置，加热器控制部在进行反应循环期间控制第一、第二加热器分别为第一、第二温度，结束后控制第二加热器使第二部分升温，荧光测定器测定从扩增了的核酸放出的荧光，解析部解析从荧光获得的核酸融解曲线。
核酸分析装置以及方法

[发明专利]一种双色竞争性荧光定量聚合酶链反应检测试剂盒-CN200910020242.6有效
发明人：夏庆杰;杨林 -专利权人：山东亚大药业有限公司
申请日： 2009-03-30 - 公布日： 2009-09-09 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种双色竞争性荧光定量共扩增聚合酶链反应试剂盒，首先根据21号染色体特异序列DSCR区段序列和2号染色体上的USC2序列分别合成其特异共用引物和特异性双色Taqman探针，然后在PCR扩增缓冲反应体系中在多色荧光定量热循环仪上进行高温、低温、中温的反复热循环，实现两个DNA片段的竞争性扩增。在PCR扩增的同时检测扩增过程中由于降解Taqman探针获得的两个DNA片段扩增的荧光信号的强弱变化情况，获得扩增动力学曲线图，进而得出各个标本的上述两个DNA片段扩增的Ct值，从而计算它们的拷贝数比值
一种竞争性荧光定量聚合反应检测试剂盒

[发明专利]一种通用qPCR质粒定量方法及通用引物-CN201910659057.5有效
发明人：王胜亚;梁焯;姚树元 -专利权人：无锡生基医药科技有限公司
申请日： 2019-07-22 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种通用qPCR质粒定量方法及通用引物，包括如下步骤：寻找常用工业生产质粒骨架的高度同源序列，以这些高度同源序列为靶标设计qPCR引物；排除在大肠杆菌与人基因组中可能发生非特异扩增的引物，选择扩增片段较小的qPCR引物，并保证扩增片段为同源性最高的区域；进行SYBR‑Green qPCR实验验证引物，将含该扩增片段质粒的梯度稀释作为标准品，计算引物的扩增效率，线性相关系数，热融解曲线；在转化有含该扩增片段质粒的大肠杆菌样品中进行质粒拷贝数检测本发明的qPCR引物针对工业生产质粒高度同源区域设计，扩增效率高、定量线性好、特异性好。由于扩增片段仅50bp，可将其用于以质粒DNA为原料生产的产品（如病毒）中质粒DNA残留定量。
一种通用 qpcr 质粒定量方法引物

[发明专利]用于解决基因检测中荧光定量PCR非特异性扩增干扰的方法-CN202010129797.0在审
发明人：张金库;孙吉瑞;陈红 -专利权人：张金库
申请日： 2020-02-28 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开一种用于解决基因检测中荧光定量PCR非特异性扩增干扰的方法，其特征在于，包括：PCR扩增反应条件为：90—95℃预变性1—15min；90—95℃变性10—30s；50—65℃退火30s—90s本发明采用三步法扩增，将荧光定量信号收集过程设定在延伸阶段，既有效避免了非特异性扩增信号的干扰，又省去了熔解曲线的构建过程，缩短了反应时间，提高了检测准确性，适用于多数荧光定量PCR反应实验，对于提高PCR扩增反应实验效率具有重要意义。
用于解决基因检测荧光定量 pcr 非特异性扩增干扰方法

[发明专利]一种基于花鳗鲡的PCR扩增引物、探针及检测方法-CN202310932076.7在审
发明人：宋一清;尹晓强;张鑫;李洲权;刘宇明;洪李川;张思源;曾金凤;张娜;谢松光 -专利权人：海南大学
申请日： 2023-07-26 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明提供一种基于花鳗鲡的PCR扩增引物、探针及检测方法，包括以下步骤：(1)以花鳗鲡mtDNA的D‑loop基因作为检测靶基因，设计上游引物、下游引物和探针；(2)将花鳗鲡PCR扩增体系加入仪器，设置PCR反应条件，进行实时荧光PCR扩增反应，记录荧光增长曲线；所述实时荧光PCR扩增反应的具体步骤包括：预孵育、两步扩增和两次冷却。
一种基于鳗鲡 pcr 扩增引物探针检测方法

[发明专利]多重PCR检测方法及试剂盒-CN201310227525.4有效
发明人：张建东;谭晓利 -专利权人：瀚吉康生物科技（北京）有限公司
申请日： 2013-06-08 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明所提供的多重PCR检测方法，包括以下步骤：（1）根据靶标基因序列，分别设计上游引物、下游引物、共同引物和探针序列；（2）配置多重PCR反应体系；（3）进行PCR扩增，在PCR扩增周期结束后，进行熔解曲线分析本发明在PCR扩增过程中针对每一扩增子引入特异性外源核酸序列标签，在扩增过程中与之后采用完全互补与有限错配的单标记荧光寡聚合核苷酸探针荧光杂交与熔解分析实现多重检测。
多重 pcr 检测方法试剂盒

[发明专利]一种针对非洲猪瘟病毒的核酸快速检测方法-CN201811085469.4在审
发明人：张薇;许绍坤;王耕;吴丹丹;李向东;田克恭 -专利权人：张薇
申请日： 2018-09-18 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种针对非洲猪瘟病毒的核酸快速检测方法，包括如下检测方法：材料准备，引物稀释，扩增反应，扩增曲线和溶解曲线获得，判定；本发明的有益效果是：高特异性：6条引物对应目标序列8个特异区域的识别保证了检测反应的高度特异性；高灵敏度：检测反应的灵敏度高，可检测到10个拷贝；操作简单：只要将待测样本、设计的特异引物和反应液混合，上机扩增30分钟即可得到检测结果；使用一个反应管即可检测出样本是否感染了非洲猪瘟病毒，填补了非洲猪瘟核酸快速检测方法的空缺
非洲猪瘟病毒快速检测核酸检测反应检测恒定快速检测仪材料准备待测样本高灵敏度检测结果扩增反应扩增曲线目标序列特异引物引物稀释定量PCR 灵敏度反应管金属浴可检测试剂盒猪瘟拷贝可用扩增上机引物判定样本空缺溶解填补感染基因保证

[发明专利]基于熔解曲线分析的脊髓性肌萎缩症致病基因检测试剂盒-CN201610590300.9在审
发明人：夏众敏;周裕林;郭奇伟 -专利权人：夏众敏;周裕林;郭奇伟
申请日： 2016-07-25 - 公布日： 2016-12-07 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：基于熔解曲线分析的脊髓性肌萎缩症致病基因检测试剂盒，涉及致病基因检测试剂盒。包括：扩增SMN1和SMN2基因exon7的上游引物F1和下游引物R1；扩增内参CFTR基因exon4的上游引物F2和下游引物R2；用于检测的荧光探针。在单管PCR体系中即可定量检测SMA的主要致病基因SMN1基因exon7的拷贝数，PCR扩增结束经一次荧光PCR熔解曲线分析就可知道样本基因型，整个操作在2～3h即可完成，简便快速、耗时短；均相检测、闭管操作
基于熔解曲线分析脊髓萎缩致病基因检测试剂盒

[发明专利]一种定量检测微囊藻的标准品及制备、检测方法-CN201911183961.X在审
发明人：陈蕾;姜巍巍;姜蕾 -专利权人：上海城市水资源开发利用国家工程中心有限公司
申请日： 2019-11-27 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种定量检测微囊藻的标准品及制备、检测方法，该检测方法包括：步骤一，根据实验优化定量PCR反应条件；步骤二，以重组质粒为标准品模板，根据优化后的定量PCR反应条件用实时定量PCR进行PCR扩增，建立标准品的浓度与临界循环数对应的标准曲线，该重组质粒为包含M16基因的重组质粒或重组细胞，该M16基因的序列由97个脱氧核糖核苷酸组成，为序列表SEQ IDNO.1中的序列；步骤三，用待测样品替换步骤二中的标准品，根据优化后的定量PCR反应条件进行实时定量PCR扩增，根据扩增结果的临界循环数和标准曲线，得到待测样品中微囊藻的数量，通过本发明，可实现水环境样品中微囊藻的快速定量检测。
一种定量检测微囊藻标准制备方法

[发明专利]一种判别越冬蓝藻越冬复苏期界限的方法-CN201410587421.9有效
发明人：虞龙;张金丽;李玉燕;于洋;杜明勇 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2014-10-29 - 公布日： 2015-03-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种判别越冬蓝藻越冬复苏期界限的方法，取蓝藻水华区域的水样和室内培养微囊藻，进行RNA提取纯化，然后反转录得到cDNA，以cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR扩增。以引物gvpC扩增微囊藻伪空胞基因，以引物Micr特异性扩增微囊藻16srRNA内参基因，PCR完成后，导出相应的阈值循环数值，两者差值为校正后的细胞拷贝数，野外样品与室内样品的细胞拷贝数差值为野外目的基因相对循环数，记作ΔΔCt，采用2^-ΔΔCt计算相对表达量，以时间为横坐标，2^-ΔΔCt的值为纵坐标绘制曲线，根据曲线确定越冬蓝藻越冬复苏期界限。
一种判别越冬蓝藻复苏界限方法

[发明专利]一种基于肽核酸（PNA）钳制聚合酶链反应（PCR）的耳聋突变基因的检测方法-CN201410628251.4有效
发明人：何静;李秋莲 -专利权人：成都正德奥生物科技有限公司
申请日： 2014-11-07 - 公布日： 2015-02-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：包括如下步骤：(1)设计一种与野生型耳聋基因(含突变位点)杂交的肽核酸PNA；(2)构建和提取突变型及野生型耳聋基因质粒，计算拷贝数；(3)采集待测个体的样本，提取基因组DNA或线粒体DNA；(4)设计PCR扩增所需的一对上下游引物和Taqman探针；(5)用上述肽核酸PNA对质粒标准品或待测样本按照改进PCR反应条件进行检测，得出扩增曲线；(6)根据所述扩增曲线对照检测定性基因突变。
一种基于核酸 pna 钳制聚合反应 pcr 耳聋突变基因检测方法

[发明专利]用于检测鱼类小清蛋白的荧光定量PCR方法及引物对-CN201510882721.4有效
发明人：李可;张晓峰;张明哲;朱晓雨;方莹 -专利权人：浙江省检验检疫科学技术研究院
申请日： 2015-12-03 - 公布日： 2018-08-28 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于检测鱼类小清蛋白的荧光定量PCR方法及引物对，属于食品安全检测技术领域，所述PCR方法包括以下步骤：一、设计特异性扩增引物对；二、提取样品DNA；三、通过扩增曲线和溶解曲线判断样品是否含有小清蛋白基因与现有技术相比，本发明利用生物信息学和比较基因组学，筛选到鱼小清蛋白的共有基因序列，并以此序列设计特异性扩增引物对，本发明的引物对待测样本进行荧光定量PCR检测，可快速、灵敏、特异地检测食品中不同鱼种及制品中的过敏原成份
用于检测鱼类蛋白荧光定量 pcr 方法引物

[发明专利]一种植物乳杆菌肠道定殖性的定性、定量测定方法-CN201210238651.5无效
发明人：徐致远;刘振民;艾连中;于鹏 -专利权人：光明乳业股份有限公司
申请日： 2012-07-10 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：该定性测定方法包括如下步骤：（1）将经预处理后的被测粪便样品进行总DNA提取；（2）然后进行总DNA的PCR扩增；（3）之后进行V3区PCR扩增；（4）将步骤（3）获得的V3区PCR扩增后的产物进行变性梯度凝胶电泳该定量测定方法包括如下步骤：分别将被测样品、植物乳杆菌系列浓度的菌粉，按前述步骤（1）~（4）操作，然后将系列浓度植物乳杆菌变性梯度凝胶上条带亮度与含量之间建立标准曲线，之后依据标准曲线计算定殖的植物乳杆菌数量
一种植物杆菌肠道定殖性定性定量测定方法

[发明专利]一种植物加工产品中转基因成分的检验方法-CN202011640671.6在审
发明人：张萍;崔海月;赵亮;顾玉莲;伏容 -专利权人：镇江华大检测有限公司
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2021-04-13 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，提取样品DNA，采用实时荧光PCR技术对样品DNA筛选基因或品系特异性片段扩增；根据实时荧光扩增曲线，判断该样品中是否含有转基因成分；对外源基因检测阳性的样品，或已知为转基因阳性的样品，根据PCR扩增结果，判定该样品中含有转基因品系成分，通过具体的数值能够直接的体现检测的准确性，解决了目前的转基因检测方法不是很准确的问题。
一种植物加工产品中转基因成分检验方法

[发明专利]非标记荧光PCR结合HRMA检测副溶血弧菌的方法-CN201210376792.3有效
发明人：蔡先全;邱德义;柏建山;邓艳;伍朝晖;简志华;张宪臣;蔡仁杰 -专利权人：中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心
申请日： 2012-09-29 - 公布日： 2013-07-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种非标记荧光PCR结合HRMA检测副溶血弧菌的方法，其特征在于包括以下步骤：根据副溶血弧菌TLH基因设计引物对；提取样本DNA后，利用设计的引物对进行非标记荧光PCR扩增；应用软件对PCR扩增产物进行扩增曲线和HRMA分析。
标记荧光 pcr 结合 hrma 检测溶血弧菌方法