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[发明专利]水貂源性成分的恒温荧光法检测引物组、试剂盒及检测方法-CN201710739425.8有效
发明人：黄曦;申洪杰;高芳;王海波;郭吉原;孙春华 -专利权人：广州迪澳医疗科技有限公司;广州迪澳生物科技有限公司
申请日： 2017-08-25 - 公布日： 2020-10-27 - 主分类号： C12Q1/6848 文献下载
摘要：同时公开了一种水貂的检测方法，包括如下步骤：(1)提取待检样品DNA；(2)恒温基因扩增反应：利用恒温检测引物组对待检样品进行恒温扩增，扩增时将检测管放置在可提供恒温及荧光检测的仪器上，每30～60s采集一次荧光信号；(3)结果判断：根据有无“S”型扩增曲线判断阴阳性结果，有“S”型扩增曲线为阳性结果，反之为阴性结果。
水貂成分恒温荧光检测引物试剂盒方法

[发明专利]QPCR检测土壤中小麦矮腥黑粉菌的方法-CN201510819208.0在审
发明人：高利;蔚慧欣;齐婷;董二容;陈万权;刘太国;刘博 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2015-11-23 - 公布日： 2016-02-17 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：FastDNA^TM SPIN Kit for Soil试剂盒提取土壤样品的总DNA；(3)以待测土壤样品的总DNA以及梯度稀释的阳性对照模板同时进行QPCR反应，得到土壤样品及阳性对照的扩增曲线和Ct值；(4)根据梯度稀释的阳性对照模板的扩增曲线和Ct值以及待测土壤样品的扩增曲线和Ct值，判断土壤样品中是否含有小麦矮腥黑粉菌。
qpcr 检测土壤小麦矮腥黑粉菌方法

[发明专利]用于分析核酸扩增反应的分析方法和系统-CN202110832650.2在审
发明人： R.诺贝尔 -专利权人：霍夫曼-拉罗奇有限公司
申请日： 2015-08-26 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： G16B20/20 文献下载
摘要：本发明涉及用于分析核酸扩增反应的分析方法和系统。本发明涉及一种以在较宽范围的分析物浓度里改善通过实时核酸扩增反应RNR(诸如聚合酶链式反应PCR)量化的线性(精确性和/或准确性)和/或限制存在干扰性物质的效应为目的的分析方法，其通过以与增长曲线与包含至少两个不同阈值水平的在RNR循环范围里的组合阈值函数(CTF)的交叉对应的循环数目测定RNR的量化循环数目(Cq)进行，所述量化循环数目(Cq)指示增长曲线的定量和/或定性分析结果，所述增长曲线指示RNR循环范围里对于RNR的每个扩增反应循环，分析物的荧光发射强度。
用于分析核酸扩增反应方法系统

[发明专利]一种核酸恒温扩增定量检测方法-CN202110161899.5在审
发明人：曹志;单虎;刘盛龙;周士硕;马帅 -专利权人：青岛农业大学
申请日： 2021-02-05 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种核酸恒温扩增定量检测方法。基于环介导等温扩增方法，在反应体系内添加聚丙烯酰胺或海藻糖，以目标基因拷贝数为横坐标、光强度曲线拐点的时间为纵坐标，拟合得到基因拷贝数与曲线拐点的时间的关系曲线，即标准曲线；根据标准曲线和曲线拐点的时间得到定量检测数据本发明在建立的病毒和细菌的现场快速高灵敏检测技术的基础上，通过对目标基因不同拷贝数检测光强度曲线的研究，确定基因拷贝数与曲线拐点时间关系的定量曲线，并在反应体系内添加一些表面活性剂或提高体系黏度和热稳定性的化学制剂，来分析它们与定量的相关性，优化定量曲线，最终实现病原的快速简便、灵敏特异和定量的检测。
一种核酸恒温扩增定量检测方法

[发明专利]一种猪传染性胃肠炎病毒的S基因SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法-CN201010505727.7无效
发明人：吴红云;李厚伟;李建正 -专利权人：郑州后羿制药有限公司
申请日： 2010-10-13 - 公布日： 2011-06-22 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪传染性胃肠炎病毒的S基因SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法，其步骤为：胃肠炎病毒总RNA的提取、引物设计、反转录、PCR扩增猪传染性胃肠炎病毒的S基因片段、猪传染性胃肠炎病毒的S基因的克隆与鉴定、标准品模板得制备、进行荧光定量PCR扩增，得动力学曲线及标准曲线，进行重复性、敏感性及特异性试验。本发明方法呈现出良好的S型扩增曲线，只出现扩增产物特异的单个峰，产物的Tm值均一；检测灵敏度可达3拷贝∕微升，具有很好的敏感性；该方法与其它病毒不发生交叉反应，具有良好的特异性；起始模板浓度与Ct值之间呈很好的线性关系
种猪传染性胃肠炎病毒基因 sybr green 实时定量 pcr 检测方法

[发明专利]大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌和不动杆菌的三重荧光定量PCR检测方法-CN201510163845.7在审
发明人：王贵升;张向东;王慧珊;张赫晓;王金宝;田夫林;张婷婷;孙娜;孙圣;王苗利 -专利权人：山东省动物疫病预防与控制中心
申请日： 2015-04-09 - 公布日： 2015-07-08 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明的检测方法：取样品的核酸10ul与15ul反应液配成25ul的反应体系，然后进行荧光定量PCR反应；如果FAM检测通道出现“S”形扩增曲线，且Ct值小于30，则含有大肠杆菌；如果HEX或VIC检测通道出现“S”形扩增曲线，且Ct值小于30，则含有肺炎克雷伯氏菌；如果CY5检测通道出现“S”形扩增曲线，且Ct值小于30，则含有不动杆菌。
大肠杆菌肺炎克雷伯氏菌不动杆菌三重荧光定量 pcr 检测方法

[发明专利]羊梨形虫检测与鉴别的方法与试剂盒-CN201711357850.7在审
发明人：关贵全;王锦明;刘军龙;杨吉飞;刘爱红;李有全;罗建勋;殷宏 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2017-12-17 - 公布日： 2018-08-10 - 主分类号： C12Q1/6893 文献下载
摘要：本发明的检测与鉴别方法是：提取待检测羊的血液基因组DNA得到待测样本，在反应体系内加入饱和染料再用引物SEQ ID No.1和SEQ ID No.2对重组质粒和待测样本进行PCR扩增，再进行高分辨率熔解曲线分析，根据有无扩增产物确定待测样品有无感染羊梨形虫，根据扩增产物熔解曲线与重组质粒的熔解曲线重合情况确定所感染的羊梨形虫的种类。
梨形虫病原检测待测样本扩增产物熔解曲线重组质粒试剂盒鉴别熔解曲线分析血液基因组饱和染料待测样品高分辨率疾病诊断检测结果鉴别检测快速检测可检测感染重合引物体内

[发明专利]基于高分辨熔解曲线形状的多重PCR检测方法及试剂盒-CN201910574965.4在审
发明人：徐秦峰;马西亚;贺晓玲 -专利权人：陕西科技大学
申请日： 2019-06-28 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于高分辨熔解曲线形状的多重PCR检测方法及试剂盒。本发明采用PCR饱和荧光染料，扩增完成后直接进行高分辨熔解，对采集的熔解曲线进行归一化、差异化或主成分分析，即可实现单管有效同时检测多个靶序列的目的。根据高分辨熔解曲线形状信息而非熔解温度来进行鉴别检测，显著降低了多重PCR分析引物的设计难度，使得具有微小Tm差异的多个PCR扩增产物能够同时检测；避免了开管操作造成目的DNA被污染的可能性，弥补了多色荧光标记或者空间分隔平行下的单重扩增反应成本较高的缺陷
高分辨熔解曲线多重PCR检测检测试剂盒熔解饱和荧光染料多色荧光标记主成分分析分析引物鉴别检测空间分隔扩增反应熔解曲线形状信息多重PCR 靶序列差异化高分辨归一化单管扩增通量平行采集污染应用

[发明专利]一种检测新冠病毒核酸的多重荧光定量PCR方法-CN202111625805.1在审
发明人：李建国;高泽峰;张佳蕾;路哲;张辉;陈佩蓉;吴长新 -专利权人：山西大学
申请日： 2021-12-28 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：以荧光定量PCR扩增曲线为检测结果判别依据，当阳性对照扩增曲线为阳性且阴性对照无典型扩增曲线时，同板检测的实验结果可信。
一种检测病毒核酸多重荧光定量 pcr 方法

[发明专利]一种基于荧光PCR技术的沙门氏菌毒力基因检测引物组和试剂盒-CN202211315591.2在审
发明人：何培彦;陈中文;朱国英;燕勇;朱泽;李萍;吕沈聪 -专利权人：嘉兴市疾病预防控制中心
申请日： 2022-10-26 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于荧光PCR技术的沙门氏菌毒力基因检测引物组，包括分别扩增ssaR、spvC、pefA、sipA和fimA毒力基因的引物组和分别扩增sifA、sopE2、sopB、prgH、stn毒力基因的引物组该引物组与其他引物组相比，不仅能准确得到目标毒力基因扩增的熔解曲线峰，而且熔解曲线峰具有特异性，同时两两熔解曲线峰之间不发生相互重叠，能准确、特异地、同时检测10种沙门氏菌毒力基因的存在与否。
一种基于荧光 pcr 技术沙门氏菌毒力基因检测引物试剂盒

[发明专利]一种基于免疫PCR和DNA熔解曲线分析的多重检测方法-CN201010192503.5有效
发明人：雷向东 -专利权人：常州楚天生物科技有限公司
申请日： 2010-06-07 - 公布日： 2011-12-07 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于免疫PCR和DNA熔解曲线分析的多重检测方法。其原理是用一组可通过PCR高效扩增且扩增产物的熔解温度相差较大的DNA分子分别标记免疫PCR检测中使用的检测物质如抗体或抗原。PCR产物再通过熔解曲线分析来分辨扩增产物中包含哪几种标记DNA。如果某一个DNA标记的特征熔解曲线峰存在，表明该DNA所标记的检测物质所检测的对象在样本中存在。
一种基于免疫 pcr dna 熔解曲线分析多重检测方法

[发明专利]一种辅助诊断冠心病的检测试剂盒及其检测方法-CN201410159391.1无效
发明人：叶华丹;段世伟;周安楠;洪青晓;李奕润 -专利权人：宁波大学
申请日： 2014-04-18 - 公布日： 2014-07-02 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：rs7259620单核苷酸多态性的APOE基因引物和用于检测APOA5基因rs662799单核苷酸多态性的APOA5基因引物；其通过将检测试剂盒的APOE基因引物和APOA5基因对样品DNA进行PCR扩增，并对PCR扩增产物用荧光定量PCR仪分析熔解曲线，再将熔解曲线与标准熔解曲线进行比较，对比PCR扩增产物的Tm值，获得相应的基因分型结果。
一种辅助诊断冠心病检测试剂盒及其方法

[发明专利]一种HRMA检测华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫的方法-CN201410081323.8无效
发明人：蔡先全 -专利权人：蔡先全
申请日： 2014-03-06 - 公布日： 2014-06-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：所述引物对的上游引物序列为：5‘-GGTAGGGTGGTTTGAGC-3’，所述引物对的下游引物序列为：5‘-TCATAGTAACCGAGCTAAA-3’；提取样本DNA后，利用设计的引物对进行非标记荧光PCR扩增；应用带HRM模块的荧光PCR仪软件对PCR扩增产物进行高分辨率熔解曲线分析，确定扩增产物的Tm值熔解曲线图谱。本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种操作简便、快速，检测结果准确，使用成本低的高分辨率熔解曲线分析同时检测华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫的方法。
一种 hrma 检测华支睾吸虫麝猫后睾方法

[发明专利]鹅肉源性成分PCR扩增鉴定方法与引物对-CN202010696876.X在审
发明人：唐修君;高玉时;樊艳凤;贾晓旭;葛庆联;陆俊贤;张静;唐梦君;周倩;陈大伟;张小燕;刘茵茵;马丽娜;蒲俊华;顾荣;黄胜海;马尹鹏 -专利权人：江苏省家禽科学研究所
申请日： 2020-07-20 - 公布日： 2020-10-02 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：鹅肉源性成分PCR扩增鉴定用引物对，根据鹅线粒体基因组中16S rRNA基因设计引物对，引物对的上游引物序列为：5’‑CGTCAAAGCTCCACCACCTA‑3’，5’‑TCTATGTAAGCTTGCGCCGT‑3’；引物对对鹅源性DNA进行普通PCR或qPCR反应；普通PCR反应方法的结果是：琼脂糖凝胶电泳图谱中呈现有140bp电泳条带；qPCR反应方法的结果是：具有典型扩增曲线且扩增曲线的Ct值小于35。本发明还公开了两种鹅肉源性成分PCR扩增鉴定方法。本发明解决了现有技术中鹅肉源性成分鉴别方法检测速度慢、准确度低的技术问题。
鹅肉成分 pcr 扩增鉴定方法引物

[发明专利]利用双S形函数曲线拟合和LEVENBERG－MARQUARDT算法及标准化的PCR肘确定-CN200610169377.5有效
发明人： L·弗兰西奥利;R·克诺贝尔;R·T·库尔尼克 -专利权人：霍夫曼－拉罗奇有限公司
申请日： 2006-12-19 - 公布日： 2007-06-27 - 主分类号： G06F19/00 文献下载
摘要：本发明涉及用于确定S形或生长型曲线中的例如肘值的特征过渡值、例如PCR扩增曲线中的周期阈值(Ct)的系统和方法。具有通过Levenberg－Marquardt(LM)回归方法所确定的参数的双S形函数被用于找到拟合PCR数据集的曲线的近似。一旦已经确定了参数，就可以利用一个或多个所确定的参数来使曲线标准化。如果选择用于计算扩增曲线的周期阈值的任意荧光水平(AFI)方法，则标准化对于确定周期阈值来说是有利的。在标准化之后，通过应用求根算法以确定表示标准化曲线的函数的根来处理该标准化曲线，所述根对应于周期阈值。该周期阈值然后被返回并可以被显示或另外被用于进一步的处理。
利用函数曲线拟合 levenberg marquardt 算法标准化 pcr 确定