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[发明专利]一种pProTM质粒、其构建方法及应用-CN202111304658.8在审
发明人：豆晓伟;田园;李青;张培培 -专利权人：贵州医科大学附属医院
申请日： 2021-11-05 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明涉及一种pProTM质粒、其构建方法及应用，属于质粒构建技术领域。所述pProTM质粒的构建方法，包括如下步骤：步骤1：构建BSDR‑luciferase载体；步骤2：构建pProTM质粒；步骤3：验证pProTM质粒是否构建成功。本发明还公开了一种pProTM质粒及其应用。本发明构建得到的pProTM质粒，整合了BSDR、mCherry和Fluc三种基因的优点，一是可以通过BSDR筛选阳性细胞，可用于细胞药物筛选；二是可以通过mCherry对细胞进行筛选或者鉴定药物筛选阳性的细胞；三是可以通过Fluc在活体动物中追踪该质粒转染的细胞。
一种 pprotm 质粒构建方法应用

[发明专利]一种pProTB质粒、其构建方法及应用-CN202111304676.6在审
发明人：豆晓伟;李青;田园;牟雅君 -专利权人：贵州医科大学附属医院
申请日： 2021-11-05 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种pProTB质粒、其构建方法及应用，属于质粒构建技术领域。所述pProTB质粒的构建方法，包括如下步骤：步骤1：构建HygroR‑luciferase载体；步骤2：构建pProTB质粒；步骤3：验证pProTB质粒是否构建成功。本发明还公开了一种pProTB质粒及其应用。本发明构建得到的pProTB质粒，整合了HygroR、TagBFP和Fluc三种基因的优点，一是可以通过HygroR筛选阳性细胞，可用于细胞药物筛选；二是可以通过TagBFP对细胞进行筛选或者鉴定药物筛选阳性的细胞；三是可以通过Fluc在活体动物中追踪该质粒转染的细胞。
一种 pprotb 质粒构建方法应用

[发明专利]一种pProTG质粒、其构建方法及应用-CN202111304677.0在审
发明人：豆晓伟;李青;田园;牟雅君 -专利权人：贵州医科大学附属医院
申请日： 2021-11-05 - 公布日： 2022-03-11 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种pProTG质粒、其构建方法及应用，属于质粒构建技术领域。所述pProTG质粒的构建方法，包括如下步骤：步骤1：构建puromycinR‑luciferase载体；步骤2：构建pProTG质粒；步骤3：验证pProTG质粒是否构建成功。本发明还公开了一种pProTG质粒及其应用。本发明构建得到的pProTG质粒，整合了puroR、EGFP和Fluc三种基因的优点，一是可以通过puroR筛选阳性细胞，可用于细胞药物筛选；二是可以通过EGFP对细胞进行筛选或者鉴定药物筛选阳性的细胞；三是可以通过Fluc在活体动物中追踪该质粒转染的细胞。
一种 pprotg 质粒构建方法应用

[发明专利]特异探测膀胱癌细胞的分子遗传装置的构建方法-CN201410441470.1有效
发明人：黄卫人;刘宇辰;蔡志明 -专利权人：深圳市第二人民医院
申请日： 2014-09-01 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明公开了一种特异探测膀胱癌细胞的分子遗传装置的构建方法，包括：构建质粒hUPII‑pSpCas9、构建质粒hTERT‑gRNA‑BAM、构建质粒pRL‑SV40‑LacI、构建质粒pcDNA3‑LacO‑hRluc和构建质粒pcDNA3‑LacO‑E‑cadherin。构建的分子遗传装置能够有效特异控制膀胱癌细胞并显著影响其恶性生物学行为，并能够有效检测膀胱癌细胞并增强荧光素酶基因的表达，便于科学研究。
特异探测膀胱癌细胞分子遗传装置构建方法

[发明专利]一种产柚皮素的酿酒酵母菌-CN202111126967.0在审
发明人：范文超;刘映淼;高书良;施鑫磊 -专利权人：浙江华睿生物技术有限公司
申请日： 2021-09-26 - 公布日： 2021-12-31 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种构建柚皮素生产菌的方法，包括以下步骤：构建表达芳香族氨基酸合成模块的质粒A，构建表达香豆酸和桂皮酸生成模块的质粒B，构建表达柚皮素合成模块的质粒C，将质粒A、质粒B、质粒C转化入酿酒酵母
一种产柚皮素酿酒酵母菌

[发明专利]用于检测炭疽杆菌的重组标准质粒、试剂盒及该质粒的构建方法-CN201110114469.4无效
发明人：张锦海;王忠灿;王长军 -专利权人：中国人民解放军南京军区军事医学研究所
申请日： 2011-05-04 - 公布日： 2011-11-16 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及用于检测炭疽杆菌的重组标准质粒，该质粒由PGEM-T??easy载体和串联在一起的PA基因、capA基因、rpoB基因组成，记为PGEM-T-easy-RCP；还涉及包括上述重组标准质粒的试剂盒；还涉及上述重组标准质粒的构建方法，包括以下步骤：设计引物对、扩增序列、构建第一中间质粒、构建第二中间质粒、构建重组标准质粒。本发明的重组标准质粒PGEM-T-easy-RCP可作为炭疽杆菌阳性标准品(即炭疽杆菌强毒株核酸)的替代品。
用于检测炭疽杆菌重组标准质粒试剂盒构建方法

[发明专利]一种乙脑病毒标准品质粒构建引物及其应用-CN201910777270.6在审
发明人：张桢;孙强明;蒋鸿超;马静;何文姬;饶清;王明英;王美芬;杜廷义;樊茂;沈茹;赵春灿 -专利权人：昆明市儿童医院
申请日： 2019-08-22 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种乙脑病毒标准品质粒构建引物，该引物包括正向引物和反向引物，同时提供了该引物在乙脑病毒标准品质粒构建中的应用，包括接种培养、乙脑病毒核酸提取、乙脑病毒标准品质粒设计、逆转录PCR反应、乙脑病毒标准品质粒构建的步骤，同时提供了乙脑病毒标准品质粒的定量检测方法。本发明提供了构建具有特异性好、灵敏度高的乙脑病毒标准品质粒的引物；建立快速定量检测乙脑病毒标准品质粒的方法。
乙脑病毒标准品质粒构建引物逆转录PCR 定量检测反向引物核酸提取接种培养快速定量正向引物灵敏度应用检测

[发明专利]基于IS26插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法-CN201910282847.6有效
发明人：孙坚;何玉张;李龚;刘苹;江颖琳;许金霞;刘雅红;廖晓萍 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2019-04-10 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于IS26插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC26‑tpm质粒和pUC26‑RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建p26‑RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切p26‑RP4质粒和pBBR1MCS4‑LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。将本发明中获得的自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，得到荧光标记的大肠杆菌；最后将其与目标菌株共培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高，可用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物中。
基于 is26 插入序列构建表达荧光自杀质粒菌株方法

[发明专利]基于ISApl1插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法-CN201910282838.7有效
发明人：孙坚;何玉张;李龚;郭亚亚;王晓佩;刘雅红;廖晓萍 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2019-04-10 - 公布日： 2020-12-11 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明公开了基于ISApl1插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC19‑tpm质粒和pUC19‑RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建pTFX‑RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切pTFX‑RP4质粒和pBBR1MCS4‑LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。再进一步将自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，并将获得的荧光标记的大肠杆菌与目标菌株混合培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高、成本低，适用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物。
基于 isapl1 插入序列构建表达荧光自杀质粒菌株方法

[发明专利]一种表达木糖醇脱氢酶基因的质粒的构建方法-CN200810064830.5无效
发明人：平文祥;葛菁萍;杜春梅;凌宏志;宋刚;赵丹;高冬妮;洛雪 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2008-06-30 - 公布日： 2008-11-12 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：一种表达木糖醇脱氢酶基因的质粒的构建方法，它涉及一种质粒载体的构建方法。它解决了目前酿酒酵母缺乏木糖醇脱氢酶(XDH)，而不能使木糖代谢后产生乙醇问题。构建方法：一、克隆xyl2基因；二、回收、纯化xyl2基因片段后与pGMT vector载体连接，得到pGMT－xyl2；三、重组质粒p406ADH1－1的构建；四、重组质粒p406ADH1－2的构建；五、重组质粒p406ADH1－3的构建；六、将xyl2基因加入质粒p406ADH1－3，即得到表达木糖醇脱氢酶基因的质粒。本发明方法所构建的载体转化酿酒酵母后实现了木糖醇脱氢酶基因的高效稳定表达。
一种表达木糖醇脱氢酶基因质粒构建方法

[发明专利]畜禽去势基因疫苗(DNA疫苗)的基因工程体-CN02103725.6无效
发明人：杜念兴;李光富 -专利权人：杜念兴;李光富
申请日： 2002-03-13 - 公布日： 2002-12-11 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：其构建过程是人工合成畜型的LHRH(M)和禽型LHRH(A)基因,构建pBS－LHRH质粒。然后从pWR－HBs质粒,切下HBs片段,将其插入pBS－LHRH质粒,构建成pBS－HBs/LHRH质粒。最后,用PCR从pBS－HBs/LHRH质粒中,扩增出HBs/LHRH融合基因片段,将其插入pcDNA3.1质粒,获得pcDNA3.1－HBs/LHRH(M)和pcDNA3.1－HBs/LHRH(A)2株重组质粒。分别转化大肠杆菌,即构建成本发明的基因工程体——Ecoli－pcDNA3.1－HBs/LHRH(M)和Ecoli－pcDNA3.1－HBs/LHRH(A)。图为pcDNA3.1－HBs/LHRH重组质粒构建。
畜禽去势基因疫苗 dna 基因工程

[发明专利]一种HLA-DR突变质粒载体及其构建方法和应用-CN202111602438.3在审
发明人：张小蒙;何天慧;卓微伟 -专利权人：江苏医药职业学院
申请日： 2021-12-25 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明属于质粒载体构建领域，提供一种突变质粒载体及其构建方法和应用。该突变质粒载体是由突变的HLA‑DR基因和pBI‑CMV1质粒连接构建而成。本发明提供的突变质粒载体可以在原核和真核细胞内进行表达，可以为HLA‑DR糖基化修饰功能研究和应用奠定基础。
一种 hla dr 突变质粒载体及其构建方法应用

[发明专利]一种粪肠球菌穿梭质粒载体及其构建方法和应用-CN202111388586.X在审
发明人：张小蒙;李凤;吴红雁 -专利权人：江苏医药职业学院
申请日： 2021-11-23 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明属于质粒载体构建领域，提供一种穿梭质粒载体及其构建方法和应用。该穿梭质粒载体是由粪肠球菌质粒pLW4与载体pMD20连接构建而成。本发明提供的穿梭质粒载体可在大肠杆菌和粪肠球菌中复制。利用该穿梭质粒载体在大肠杆菌中完成外源基因克隆和重组质粒构建，可以为乳酸菌基因操作提供新工具，便于开展相关基因功能研究和遗传育种工作。
一种球菌穿梭质粒载体及其构建方法应用

[发明专利]一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法-CN201310572458.X有效
发明人：葛菁萍;王洋;由田;平文祥 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2013-11-15 - 公布日： 2014-03-05 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT由prcK基因左侧片段prcKL、prcK基因右侧片段prcKR、四环素抗性基因和质粒pUC18构成。构建方法：一、扩增片段prcKL；二、得到质粒pUC18-KL；三、扩增片段prcKR；四、得到质粒pUC18-KLKR；五、扩增四环素抗性基因Tet；六、得到敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT
一种 prck 基因自杀质粒 pytklkrt 及其构建方法

[发明专利]一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法-CN201310572456.0有效
发明人：葛菁萍;王洋;由田;平文祥 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2013-11-15 - 公布日： 2014-02-19 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT由prcR基因左侧片段prcRL、prcR基因右侧片段prcRR、四环素抗性基因和质粒pUC18构成。构建方法：一、扩增片段prcRL；二、得到质粒pUC18-RL；三、扩增片段prcRR；四、得到质粒pUC18-RLRR；五、扩增四环素抗性基因Tet；六、得到敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT
一种 prcr 基因自杀质粒 pytrlrrt 及其构建方法

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