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[发明专利]实时数字PCR方法及其装置-CN201911344673.8在审
发明人：徐刚伟;吴东平;孙鹏 -专利权人：上海小海龟科技有限公司
申请日： 2019-12-24 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明实施方式涉及实时数字PCR方法及装置，实时数字PCR方法包括:将含有待扩增样品的PCR试剂加入到载体芯片中，PCR试剂在所述载体芯片中被分割为相互独立的微液滴；对待扩增样品进行扩增反应，待扩增样品完成预设次数的扩增反应之后，暂停扩增反应，对载体芯片进行拍摄，并识别载体芯片中独立反应单元的光信号，然后再次进行扩增，拍照，信号识别的循环步骤，直到扩增终点；最后生成所有独立反应单元的扩增曲线，通过比对每次获取的各个反应单元图像信号以及扩增曲线的差异，判断并识别出有效反应单元，或判断独立反应单元内靶核酸分子数；通过扩增终点的有效反应单元的光信号，判断阳性扩增反应单元或阴性扩增反应单元个数。
实时数字 pcr 方法及其装置

[发明专利]一种Bst DNA聚合酶活性的检测方法及其试剂盒-CN202310357964.0在审
发明人：马耀争;晋莲;钟芳林;潘超;杨小岚;蒋如飞 -专利权人：武汉纳磁生物科技有限公司
申请日： 2023-04-06 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12Q1/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种Bst DNA聚合酶活性检测方法及其试剂盒，其包括以下步骤：利用Bst DNA聚合酶进行等温扩增，绘制Bst DNA聚合酶标准品酶量与扩增产物双链DNA对应的扩增曲线线性增长期内单位时间最大荧光增量的标准曲线，通过检测Bst DNA聚合酶待测样品扩增产物在线性增长期内单位时间最大荧光增量，根据标准曲线计算待测样品的酶活。该检测方法绘制的标准曲线为线性曲线，R2在0.99以上，检测酶活范围更广，而且在检测酶活在10‑80U范围检测准确性高、重复性好且操作简便，能够快速准确测定Bst
一种 bst dna 聚合活性检测方法及其试剂盒

[发明专利]数字PCR检测方法-CN201810932950.6有效
发明人：盛广济 -专利权人：思纳福（北京）医疗科技有限公司
申请日： 2018-08-16 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本申请提供的数字PCR检测方法，在制备待测核酸扩增反应液时，可以使用基于染料即可实现基因分型、突变扫描、甲基化研究等，具有高分辨率与灵敏度，降低了检测成本。并且，可以使得微液滴阵列在同一个高度集成化的数字PCR检测仪上完成聚合酶链式反应，并在微液滴阵列PCR扩增后对PCR产物进行熔解曲线分析。同时，通过数字PCR检测方法，可以获得微液滴阵列的荧光曲线与熔解曲线，完全可以实现PCR扩增整个过程的实时监测与PCR产物的熔解曲线分析的无痕连接。从而，实现了基于不同荧光曲线的拷贝数识别，与不同特性熔解曲线的核酸扩增特性的识别，以及通过高分辨率熔解曲线实现基因的分型、突变扫描等，更加全面、简便、高效的完成数字PCR的检测。
数字 pcr 检测方法

[发明专利]多重扩增循环检测-CN201710384601.0在审
发明人： R.P.拉斯穆森;R.J.克里斯普;A.C.赫默特;E.D.B.坎贝尔;T.C.罗宾斯;D.J.艾尔 -专利权人：拜奥法尔诊断有限责任公司
申请日： 2013-09-09 - 公布日： 2017-11-28 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：提供了用于将多个样品孔同时扩增预定量的扩增、检测第一组孔中是否发生扩增、扩增额外量的扩增和检测第二组孔中是否发生扩增的方法和装置。还提供了用于使用多个扩增循环中所产生的熔解曲线分析靶核酸序列的方法。
多重扩增循环检测

[发明专利]多重扩增循环检测-CN201380046847.7在审
发明人： R.P.拉斯穆森;R.J.克里斯普;A.C.赫默特;E.D.B.坎贝尔;T.C.罗宾斯;D.J.艾尔 -专利权人：拜奥法尔诊断有限责任公司
申请日： 2013-09-09 - 公布日： 2015-07-15 - 主分类号： C40B30/04 文献下载
摘要：提供了用于将多个样品孔同时扩增预定量的扩增、检测第一组孔中是否发生扩增、扩增额外量的扩增和检测第二组孔中是否发生扩增的方法和装置。还提供了用于使用多个扩增循环中所产生的熔解曲线分析靶核酸序列的方法。
多重扩增循环检测

[发明专利]一种用于犬巴贝斯虫分型的引物、探针组合-CN201910623887.2在审
发明人：庄建立 -专利权人：兽丘生物科技（上海）有限公司
申请日： 2019-07-11 - 公布日： 2021-01-12 - 主分类号： C12Q1/6893 文献下载
摘要：本发明扩增曲线整体平行性极好，基线平无上扬现象，低浓度样本扩增曲线指数期明显、扩增效率高、试剂灵敏度表现好；曲线与曲线间平行性非常好，各反应管扩增效率相近，定量的重复性和准确性就越好。
一种用于犬巴贝斯虫分型引物探针组合

[发明专利]一种基于分子信标溶解曲线的可用于核酸扩增的快速、特异性检测方法-CN201710217335.2在审
发明人：吴坚;王瑞;钱程;应义斌 -专利权人：浙江大学
申请日： 2017-04-05 - 公布日： 2017-08-29 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：快速、方便的一种基于分子信标溶解曲线的用于核酸扩增的快速、特异性检测方法，步骤为(1).针对目的基因设计合成引物和分子信标；(2).提取待测物DNA；(3).将所述引物和分子信标加入核酸扩增体系，对所述待测物DNA作核酸扩增；其特征在于—(4).所述核酸扩增完成后设置分子信标溶解曲线，检测判断所述待测物。
一种基于分子信标溶解曲线用于核酸扩增快速特异性检测方法

[发明专利]一种监测核酸文库复杂程度的方法-CN201710491638.3在审
发明人：罗昭锋;方晓娜;王进军;何磊;杨伟丽 -专利权人：中国科学技术大学
申请日： 2017-06-23 - 公布日： 2019-01-04 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本文提供一种确定或监测核酸文库复杂程度的方法，所述方法包括以下步骤：1)以文库中的核酸为模板进行PCR扩增，获得扩增曲线，2)当曲线达到平台期后，将扩增曲线对扩增循环数求导，导数值越小，指示库容越大。
核酸文库监测扩增曲线核酸适配体扩增循环平台期核酸求导文库判定改进自动化

[发明专利]用于扩增反应的分析工具-CN201080047305.8有效
发明人： J.A.H.M.卡尔曼;T.M.E.尼森;B.尹 -专利权人：皇家飞利浦电子股份有限公司
申请日： 2010-10-14 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： G06F19/24 文献下载
摘要：本发明涉及一种方法和装置，该方法和装置用于通过定义描述扩增曲线并包含与影响所记录的信号的物理量相关的至少一个参数的至少一个模型函数，将所述模型函数拟合至该扩增曲线，并通过确认导致模型函数的最佳拟合的所述参数的值而获得关于所述物理量的信息，从而从一个或多个靶核酸序列的扩增曲线获得信息。
用于扩增反应分析工具

[发明专利]一种pH敏感的核酸定量检测方法和装置-CN202110755544.9在审
发明人：弥胜利;徐菲;陈百良;黄嘉骏 -专利权人：清华大学深圳国际研究生院
申请日： 2021-07-05 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：一种pH敏感的核酸定量检测方法和装置，该方法包括如下步骤：S1、使用多个参照模板，进行核酸扩增反应并检测扩增反应液的实时pH值；S2、获得各参照模板扩增过程中pH值随时间变化的S型曲线，并确定各参照模板的S型曲线在快速扩增期的pH阈值；S3、根据各参照模板的初始浓度和扩增过程到达pH阈值所用的时间，建立初始浓度‑时间标准曲线；S4、将待测样本在与步骤S1相同的条件下进行核酸扩增反应并检测实时pH值，确定到达pH阈值所用的时间；其中，待测样本与参照模板的核酸种类和序列相同；S5、根据初始浓度‑时间标准曲线和步骤S4确定的时间，确定待测样本的初始浓度。
一种 ph 敏感核酸定量检测方法装置

[发明专利]一种ACE基因分型的方法及试剂盒-CN202211347977.1在审
发明人：乔志宏;霍笑笑;方忠海;宋立洁;孙隽;石超男 -专利权人：天津华大医学检验所有限公司
申请日： 2022-10-31 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：一种ACE基因分型的方法及试剂盒，基于Ct值进行ACE基因分型的方法包括：扩增步骤，包括将待测样本、引物、探针加入反应体系中，进行荧光定量PCR反应，获得扩增曲线；预测步骤，包括根据扩增曲线，预测待测样本的基于Tm值进行ACE基因分型的方法，包括：熔解步骤，包括将待测样本、用于扩增目标位点的引物、用于靶向结合至目标位点的探针加入反应体系中，进行荧光定量PCR反应，获得熔解曲线；预测步骤，包括根据熔解曲线的
一种 ace 基因方法试剂盒

[发明专利]一种多通道荧光检测数据处理方法-CN202110099268.5在审
发明人：张辉;严伟斌;王明元;陈炜;汤龙海 -专利权人：苏州市中心血站
申请日： 2021-01-25 - 公布日： 2021-04-30 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：S1、开启加热单元，对多通道加热至荧光检测温度；S2、采集每单通道内待检测样品的第一荧光数据并获取其检测结果；S3、若检测结果为阳性，检测结束或5～8秒后重复步骤S2；若检测结果为阴性，5～8秒后进行扩增反应；S4、实时采集扩增反应中第二荧光数据，生成荧光扩增曲线；S5、若所述荧光扩增曲线无拐点，则为阴性；反之，则为阳性并停止荧光数据追踪；S6、采集熔断后单通道荧光数据并获取熔断检测结果。扩增反应中，若荧光扩增曲线出现拐点则停止荧光数据追踪，降低数据分析系统的运行负担。在扩增反应后，增加熔断检测，降低误检几率，提高检测精度。
一种通道荧光检测数据处理方法

[发明专利]实时荧光环介导恒温扩增检测人类嗜T淋巴细胞I型病毒的方法及试剂盒-CN202310715656.0在审
发明人：王自强;蔡志成;林惠燕;吴泳伦;彭蕊;李乔 -专利权人：中山市中心血站
申请日： 2023-06-16 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种实时荧光环介导恒温扩增检测人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒的方法及试剂盒，本发明通过对HTLV‑1的PX基因及ACTB基因通过专业软件分别设计用于实时荧光环介导恒温扩增技术检测的特异性寡核苷酸引物，以引物序列组扩增待测样品模板，进行目的基因片段的特异性扩增，根据加入的荧光染料判断是否出现两条荧光扩增曲线果来分析样本是否含有HTLV‑1病毒。本发明能够避免在扩增结束后电泳污染的情况，只需荧光扩增曲线就可以实现对HTLV‑1的检测，方便判读，保证了检测的特异性和灵敏度。
实时荧光环介导恒温扩增检测人类淋巴细胞病毒方法试剂盒

[发明专利]一种低序列依赖高阶恒温指数扩增检测microRNA的方法-CN201810954236.7有效
发明人：戴宗;郑旭玲;李裕;陈俊;邹小勇 -专利权人：中山大学
申请日： 2018-08-21 - 公布日： 2021-11-16 - 主分类号： C12Q1/6876 文献下载
摘要：本发明公开了一种低序列依赖高阶恒温指数扩增检测microRNA的方法，该方法通过设计特定的能够检测目标microRNA的模板T1和T2，将模板T1和T2、DNA聚合酶、切刻内切酶、dNTP混合，并于35～50℃条件下反应，检测扩增曲线，根据扩增曲线和标准曲线判定样品中是否含有目标microRNA，本发明方法能够进一步计算出样品中目标microRNA的具体含量。本发明方法扩增效率高，灵敏度高，缩短了分析时间；该方法对目标microRNA的序列依赖性小，通用性强；检测线性范围宽，特异性好；扩增体系简单，可发展成为试剂盒并向市场推广。
一种序列依赖恒温指数扩增检测 microrna 方法

[发明专利]使用高分辨率熔解曲线法同时鉴别三种诺卡氏菌的方法-CN201910356416.X在审
发明人：李振军;徐帅;侯雪新 -专利权人：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
申请日： 2019-04-27 - 公布日： 2019-08-02 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明提供了一种使用高分辨率熔解曲线法鉴别诺卡氏菌菌种的方法，以及用于该方法的基因扩增引物。所述方法包括如下步骤：(1)以待检测样本的DNA为模板，扩增诺卡氏菌SecA1基因的区间序列，所述区间序列为鼻疽诺卡氏菌SecA1的181‑451bp，盖尔森基兴诺卡氏菌SecA1的181‑451bp，或者星形诺卡氏菌SecA1的182‑452bp；(2)使用高分辨率熔解曲线法获取步骤(1)的扩增产物的高分辨率熔解曲线；(3)对步骤(2)获得的熔解曲线进行判读。本发明提供的高分辨率熔解曲线法扩增条件简单，反应快速，具有优异的灵敏度和特异性，可特异性的检出鼻疽诺卡氏菌、盖尔森基兴诺卡氏菌和星形诺卡氏菌。
诺卡氏菌高分辨率熔解曲线法熔解曲线星形鉴别基因扩增引物待检测样本扩增产物扩增条件区间序列灵敏度检出菌种扩增判读基因