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[发明专利]一种原发性牙齿萌出障碍的PTH1R基因点突变小鼠模型的构建方法及应用-CN202310971946.1在审
发明人：孔卫东;查蕴宸;李舒舒;孔德明 -专利权人：暨南大学附属第一医院（广州华侨医院）
申请日： 2023-08-03 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： A01K67/027 文献下载
摘要：本发明公开了一种原发性牙齿萌出障碍的PTH1R基因点突变小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：基于目标基因PTH1Rc.1325_1336del突变位点设计gRNA；根据所述gRNA序列设计供体寡核苷酸供体DNA；将小鼠Pth1r基因的gRNA、含有c.1325_1336del突变的供体DNA和Cas9共同注射到小鼠受精卵中，再将受精卵移植到假孕母鼠子宫中，获得F0代小鼠；经PCR和测序验证正确的F0代阳性杂合子小鼠与C57BL/6JGpt小鼠交配获得可稳定遗传的阳性F1代小鼠，F1代杂交得到F2，经基因测序验证得到Pth1r基因c.1325_1336del的原发性牙齿萌出障碍小鼠模型。
一种原发性牙齿障碍 pth1r 基因突变小鼠模型构建方法应用

[发明专利]单位点鉴别KM小鼠和ICR小鼠的引物、试剂盒和方法-CN202111635086.1在审
发明人：王妍;张晓晴;谢飞;陈红 -专利权人：斯贝福（北京）生物技术有限公司
申请日： 2021-12-29 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了单位点鉴别KM小鼠和ICR小鼠的引物、试剂盒和方法，方法包括以下步骤：选择SNP位点rs3089604，设计引物序列；提取小鼠样品的基因组DNA；进行PCR扩增，得到扩增产物；扩增产物进行凝胶电泳，使用质量体积比浓度为1.0％的琼脂糖凝胶，电泳，显示电泳图；扩增产物进行测序，得到测序峰图；比对测序峰图，判断小鼠样品为KM小鼠或ICR小鼠，若SNP位点rs3089604处显示单峰且为T基因型，则小鼠样品为ICR小鼠，若SNP位点rs3089604位点处显示单峰且为C基因型，则小鼠样品为KM小鼠，鉴别方法简单准确。
单位鉴别 km 小鼠 icr 引物试剂盒方法

[发明专利]一种嵌合人HLA-DP基因组区域的人源化转基因小鼠模型的构建方法-CN201910937188.5在审
发明人：李峰;周晓辉;朱孟敏;牛博文;秦波音;彭秀华;刘玲玲;陈丽香;徐春华;王超 -专利权人：上海市公共卫生临床中心
申请日： 2019-09-29 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明的BAC克隆含有124kb的HLA‑DP基因组区域(DOA‑DPA1*0103‑DPB1*0401)，经过DNA测序、脉冲场凝胶电泳鉴定，纯化后通过原核显微注射技术，将BAC‑DNA引入小鼠的受精卵，再移植到假孕的小鼠输卵管，获得阳性转基因动物。与野生型小鼠杂交获得子代，通过分子生物学、免疫学、组织学技术鉴定分析，最终获得5个整合不同人HLA‑DP基因组区域的转基因小鼠品系。利用本发明的方法构建的小鼠模型在血细胞、脾脏、肺脏等主要组织器官上均存在高水平HLA‑DPA1、HLA‑DPB1的表达，可用于T细胞表位和表位特异性T细胞的免疫致病和免疫保护作用研究。
一种嵌合 hla dp 基因组区域人源化转基因小鼠模型构建方法

[发明专利]SX1近交系小鼠的DNA分子标记及其应用-CN201010033346.3无效
发明人：张建琴;杨美玲;任连生;张建珍;马恩波;闻建华 -专利权人：山西大学
申请日： 2010-01-05 - 公布日： 2010-05-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明通过筛选SSR分子标记，获得山西省自行培育的SX1近交系小鼠特异的4个SSR位点条带，经对其克隆、测序和同源比较，获得该小鼠4个SSR位点的DNA序列，该序列可作为分子遗传学标记，用于SX1近交系小鼠的鉴定本发明克服了常规形态标记，细胞标记及生化标记鉴定方法的不足，提供了对实验动物小鼠快速、准确鉴定的分子标记方法。
sx1 近交系小鼠 dna 分子标记及其应用

[发明专利]一种免疫缺陷小鼠模型的建立方法-CN201310229629.9有效
发明人：李鹏;刘志新;蒋志武;王素娜;尹爱兰;钟梅;贾蓓 -专利权人：中国科学院广州生物医药与健康研究院
申请日： 2013-06-09 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明公开的免疫缺陷小鼠模型的建立方法，包括如下步骤：(1)构建使小鼠细胞中免疫相关基因功能丧失的DNA；(2)步骤(1)构建出的DNA纯化后经逆转录酶经体外转录为mRNA；(3)mRNA纯化并冻存于RNAase收集受精卵；(6)用显微注射法将步骤(3)获得的mRNA注射进步骤(5)得到的受精卵的原核内；(7)将步骤(6)获得的受精卵移植入步骤(4)获得的假孕雌鼠体内，假孕雌鼠开始培育第二代；(8)建立稳定的缺陷小鼠品系本发明的优点，能够得到完全对异体移植无免疫排斥作用的小鼠模型用于试验。
一种免疫缺陷小鼠模型建立方法

[发明专利]用于抗辐射的药物及制备方法和应用-CN201110303366.2有效
发明人：周光明;陈卫强;裴海龙 -专利权人：中国科学院近代物理研究所
申请日： 2011-10-10 - 公布日： 2012-06-20 - 主分类号： A61K31/421 文献下载
摘要：本发明属于医药技术领域，具体涉及一种用于抗辐射的药物对人肺胚成纤维细胞、实验小鼠辐射损伤的保护作用。本发明的优点是化合物(A)对于X射线、碳离子等电离辐射以及紫外线、微波等非电离辐射造成的人肺胚成纤维细胞(MRC-5)、实验小鼠的DNA和基因组损伤有显著的防护效果，可以显著提高上述射线照射后细胞的相对存活率、降低DNA损伤、降低基因组的不稳定性、降低小鼠脏器MDA产量、增强小鼠脏器SOD活性。
用于辐射药物制备方法应用

[发明专利]一种使用大剂量DNA免疫技术免疫动物使血清中抗体滴度提高的方法-CN201711214901.0有效
发明人：梅芹;刘玮;丁毅;陆青玲;马诗静;施利波;李竞;陈智胜 -专利权人：上海药明生物医药有限公司
申请日： 2017-11-28 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： C07K16/18 文献下载
摘要：本发明公开一种使用大剂量DNA免疫技术免疫动物使血清中抗体滴度提高的方法，包括：步骤1)将蛋白质抗原表达质粒、CPG‑ODN佐剂和Aluminum Phosphate佐剂混合，制成混合液；步骤2)用该混合液对动物进行多个部位的注射免疫，每间隔7‑14天重复注射一次，经过多次注射后检测动物血清中针对特异性抗原的抗体滴度；免疫动物为大鼠、小鼠。蛋白质抗原表达质粒的用量为每只大鼠或小鼠100～500ug，CPG‑ODN佐剂的用量为每只大鼠或小鼠5‑15ug，Aluminum Phosphate佐剂用量为免疫材料总体积的1/2体积。本发明的方法能够明显增加受者动物免疫反应，提高血清中抗体滴度，获得比常规DNA免疫更高的血清效价。本发明还提供DNA免疫与蛋白免疫交叉轮流免疫方法能提高血清效价，并增加单克隆抗体的多样性。
一种使用剂量 dna 免疫技术动物血清抗体提高方法

[发明专利]基于人TLR9受体功能区片段LRR11的新型多肽及其应用-CN201210118353.2有效
发明人：周红;丁国富;李斌;潘夕春;郑江 -专利权人：中国人民解放军第三军医大学
申请日： 2010-06-29 - 公布日： 2012-08-22 - 主分类号： C07K14/705 文献下载
摘要：本发明所述的基于人TLR9受体功能区片段的新型多肽(LRMs)具有抑制CpG DNA刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF-α的作用，可以降低CpG DNA攻击小鼠的血清TNF-α浓度，提高被攻击小鼠生存率，其可用于制备防治细菌脓毒症药物
基于 tlr9 受体功能片段 lrr11 新型多肽及其应用

[发明专利]小鼠pTarget/mutated-LPL超表达载体的构建及用途-CN201110392772.0无效
发明人：向兰;汪以真;戚建华;黄艳娜 -专利权人：浙江大学
申请日： 2011-12-01 - 公布日： 2012-06-13 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：本发明提供一种构建小鼠pTarget/mutated-脂蛋白脂酶超表达载体的方法，通过提取正常ICR雄性小鼠白色脂肪组织中的RNA，反转录为cDNA，得到小鼠脂蛋白脂酶的DNA片段，并回收目的DNA片段连至
小鼠 ptarget mutated lpl 表达载体构建用途

[发明专利]新型小鼠CXC趋化因子受体-CN97182099.6无效
发明人：岸本忠三;长泽丘司;橘和延;饭笹久;吉田进昭;中岛俊洋;义江修 -专利权人：盐野义制药株式会社;岸本忠三
申请日： 1997-02-07 - 公布日： 2000-04-26 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种DNA,它编码包括序列表中序列号17记载的全部或部分氨基酸序列的多肽,或包括该多肽的多肽,其中任一种多肽具有能与小鼠PBSF/SDF－1结合的受体活性;由该DNA所编码的、具有能与小鼠PBSF由此本发明提供对研究AIDS的治疗药和HIV－1感染的作用机制有用的、新型小鼠CXC趋化因子受体基因和HIV－1感染抑制剂的筛选方法等。
新型小鼠 cxc 因子受体

[发明专利]一种能够生产人神经生长因子的转基因小鼠的制备方法-CN201510039597.5有效
发明人：宋海鹏;李敏;王庆东 -专利权人：深圳市国创纳米抗体技术有限公司
申请日： 2015-01-27 - 公布日： 2017-08-22 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过同源重组技术生产转基因小鼠的方法。所述方法通过Cas‑9/CRISPR基因敲入技术，将人NGF基因取代小鼠染色体上的鼠NGF基因，通过繁殖获得带有纯合人NGF基因的基因敲入小鼠，从而获得颌下腺能够分泌人NGF的子代小鼠。较常规的利用正负双筛选同源重组基因打靶技术相比，本发明方法操作简单，只需将3种质粒DNA同时转染小鼠胚胎干细胞或者对小鼠的受精卵进行原核注射就可以，成功率高，可以达到2‑5％，显著高于普通基因打靶技术的0.1％的小鼠胚胎干细胞阳性率。
一种能够生产神经生长因子转基因小鼠制备方法

[发明专利]一种调控表达丙型肝炎病毒NS3/NS4A蛋白酶的构建方法-CN200910145246.7有效
发明人：尹文;赵亚;孙梦宁;吕欣;雷迎峰;杨敬;康健;姚敏;薛采芳 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2009-05-23 - 公布日： 2010-03-17 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种调控表达蛋白酶的构建方法，尤其是调控表达表达丙型肝炎病毒NS3/NS4A蛋白酶的构建方法，所述转基因动物的基因组中含有编码丙型肝炎病毒NS3/NS4A的转基因DNA，并在所述目的基因HCVNS3/4A DNA前加入调控基因序列及报告基因序列，能在调控因素存在下表达活性的NS3/4A蛋白酶。(2)得到NS3/4A首建鼠，得到遗传背景基本接近于该种野生型小鼠的转基因杂合子小鼠。本发明获得的HCV NS3/NS4A转基因小鼠模型可用于与双转基因小鼠的杂交，进而获得三转基因小鼠并在HCV致病机理研究和药物的筛选与评价中应用。
一种调控表达肝炎病毒 ns3 ns4a 蛋白酶构建方法

[发明专利]粘多糖贮积症II型动物模型的构建方法及应用-CN201610803487.6有效
发明人：高恩;侯增淼;李晓颖;李敏;杨小琳;赵金礼 -专利权人：陕西慧康生物科技有限责任公司
申请日： 2016-09-06 - 公布日： 2020-01-03 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了粘多糖贮积症II型动物模型的构建方法，包括针对小鼠IDS基因设计靶点，合成寡核苷酸链，合成的寡核苷酸链经退火与pUC57‑T7‑sgRNA质粒进行连接，获得sgRNA表达载体；获得小鼠受精卵；将转录好的Cas9mRNA和sgRNA混合均匀得到RNA混合物，将RNA混合物显微注射至小鼠受精卵的细胞质，随后将存活的受精卵植入雌性小鼠体内，繁殖获得F0代小鼠；提取F0代小鼠的基因组DNA，作为模板，进行PCR反应，产物经酶切，选择突变小鼠，从而确定Founder小鼠；Founder小鼠与野生型雄性小鼠交配获得F1代小鼠。
小鼠寡核苷酸链小鼠受精卵动物模型混合物粘多糖构建细胞质合成退火转录基因组DNA 表达载体雌性小鼠基因设计突变小鼠显微注射雄性小鼠受精卵野生型交配靶点酶切植入质粒存活繁殖体内研究

[发明专利]一种抗羊口疮和绵羊痘的重组DNA疫苗及其重组质粒-CN202210448759.0在审
发明人：陆慧君;文美玲;赵魁;王妍;高飞;贺文琦;关继羽;李姿 -专利权人：吉林大学
申请日： 2022-04-26 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组DNA疫苗及其重组质粒，DNA疫苗重组质粒包括抗原编码序列和质粒载体，所述抗原编码序列包括串联的羊口疮抗原编码序列和绵羊痘抗原编码序列，所述羊口疮抗原和绵羊痘抗原表达为独立的抗原蛋白本发明提供了一种羊口疮病毒基因和绵羊痘病毒基因的双基因重组DNA疫苗的构建，以及小鼠免疫效果分析。本发明所制备的重组DNA疫苗在免疫小鼠后也产生了较好的免疫效果，可作为候选疫苗的参考。
一种口疮绵羊重组 dna 疫苗及其质粒

[发明专利]一种双价DNA疫苗连接肽及其应用-CN201410132066.6有效
发明人：胡勤学;阎岩;胡凯 -专利权人：中国科学院武汉病毒研究所
申请日： 2014-04-02 - 公布日： 2014-06-18 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种双价DNA疫苗连接肽及其应用。-2糖蛋白基因及佐剂基因并引入酶切位点，通过重叠延伸PCR法引入连接肽(G₄S)₂IZ(G₄S)₂，获得一种双价DNA采用prime-boost原则免疫小鼠，检测该疫苗引发的体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫应答反应；通过阴道感染150LD₅₀的HSV-2病毒，检测血清分型抗体及评价15天内各组的疾病严重程度发现重组的双价DNA疫苗可以比单价DNA疫苗产生更强的体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫应答反应，还检测到了更强的中和病毒的能力；重组的双价疫苗的免疫性反应和记忆性免疫反应能更迅速的产生高滴度的抗体，对小鼠有更好的保护效果
一种 dna 疫苗连接及其应用