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[发明专利]人体基因组DNA样本的制备方法-CN03108990.9有效
发明人：陈枢青;厉朝龙;陈亦胜 -专利权人：陈枢青陈亦胜厉朝龙
申请日： 2003-04-16 - 公布日： 2004-10-20 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：操作方便，费用省，保存容易的人体基因组DNA样本的制备方法，取人体组织细胞样品，此样品经细胞裂解和RNA水解后，去除水解液中的蛋白质，获取含DNA的溶液，在所述含DNA的溶液中加入沉淀剂使DNA呈絮状沉淀的同时加入微孔玻璃颗粒并振摇，使沉淀的DNA吸附于微孔玻璃颗粒，经液－固分离后制得包含DNA的粒状样本——人体基因组DNA样本。本发明适用于人体基组DNA样本的制备、保存以用于基因分析。
人体基因组 dna 样本制备方法

[发明专利]一种测序小环形DNA分子的方法-CN202210758304.9在审
发明人：刘晓娟;陈基琛;王婉娜 -专利权人：南方海洋科学与工程广东省实验室（广州）;汕头大学
申请日： 2022-06-30 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供了一种测序小环形DNA分子的方法，包括包括：构建重组转座子片段；富集小环形DNA分子；构建重组小环形DNA分子；验证阳性克隆载体。利用转座子将抗生素抗性基因随机插入到各个小环形DNA分子之中，使得每个重组小环形DNA分子中均至少获得一段抗生素抗性基因，而由于后续培养过程中的培养基添加了相关的抗生素，所以只有成功转化有重组小环形DNA分子的克隆载体才能够在培养基中存活和繁殖，使得所述抗生素抗性基因成为重组小环形DNA分子的“保守序列”，从而能够针对该抗生素抗性基因设计相应的PCR扩增，再于分析小环形DNA分子序列的时候使用软件将抗生素抗性基因序列剔除
一种测序小环形 dna 分子方法

[发明专利]一种用于制备脱发模型猪的核移植供体细胞的试剂盒及其制备方法-CN202210544998.6在审
发明人：牛冬;汪滔;陶裴裴;王磊;曾为俊;程锐;赵泽英 -专利权人：南京启真基因工程有限公司
申请日： 2022-05-19 - 公布日： 2022-10-28 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明提供的试剂盒包括DNA分子乙或具有DNA分子乙的重组质粒。DNA分子乙中，具有上游同源臂、DNA分子甲且和下游同源臂，上游同源臂和下游同源臂用于将DNA分子甲整合至猪细胞的基因组DNA；DNA分子甲中具有KAP6.1启动子和猪II型5α‑还原酶基因，由KAP6.1启动子驱动猪II型5α‑还原酶基因的表达。本发明提供的试剂盒通过CRISPR/Cas9系统及同源重组制备在基因组整合DNA分子甲的重组猪细胞，其作为核移植供体细胞制备的克隆猪可用作脱发模型，有助于研究并揭示发病机制，进行药物筛选、药效检测、基因及细胞治疗等
一种用于制备脱发模型移植供体细胞试剂盒及其方法

[发明专利]一种样本稀释倍数定量方法及其应用-CN202310935498.X在审
发明人：侯军艳;张亚晰;熊春福;陈维之;杜波 -专利权人：臻和（北京）生物科技有限公司
申请日： 2023-07-28 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开一种样本稀释倍数定量方法及其应用，将外源重组质粒引入原始肿瘤细胞系DNA样本，得到含外源重组质粒的原始肿瘤细胞系DNA样本；所述原始肿瘤细胞系DNA样本为将肿瘤细胞系DNA样本利用与肿瘤细胞系DNA配对的正常细胞系DNA样本稀释至ctDNA丰度达到预设值的样本；利用正常细胞系DNA样本对含外源重组质粒的肿瘤细胞系DNA样本进行梯度稀释；选取管家基因作为内参基因，对各梯度样本中的非人源基因片段和管家基因的拷贝数进行定量本发明采用非人源基因片段拷贝数稀释策略，实现对各梯度样本中ctDNA丰度的精准定量，尤其能够实现百万级ctDNA丰度的精准定量。
一种样本稀释倍数定量方法及其应用

[发明专利]一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法-CN201711129996.6有效
发明人：张艳;江帆;樊伟;刘博;李书曲;王恒超;刘聪辉;任钰为;尹丽娟 -专利权人：中国农业科学院农业基因组研究所
申请日： 2017-11-15 - 公布日： 2021-06-15 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法。本发明提供了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法，包括如下步骤：1)将动物肠道内容物或粪便经过差速离心；2)将所述微生物细胞结合使用液氮反复冻融裂解法、玻璃珠研磨法和裂解液高温裂解法进行细胞破碎，得到破碎后细胞；3)先提取所述破碎后细胞的基因组DNA，再纯化所述基因组DNA。本发明添加了微生物细胞的洗涤和富集步骤，降低了宿主和食物DNA的污染；组合多种微生物细胞裂解破碎的方法，降低宏基因组DNA的物种偏好性；增加纯化的步骤，保证DNA的纯度，可以满足构建第二代高通量测序文库的DNA要求。
一种肠道内容提取微生物宏基 dna 方法

[发明专利]一种编码玉米mTERF蛋白的基因ZmSmk3及其克隆方法和应用-CN201710806831.1有效
发明人：邱法展;任雪梅;潘振远;谭增栋;秦瑶 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2017-09-08 - 公布日： 2019-11-05 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明涉及一种编码玉米mTERF蛋白的基因ZmSmk3和所述基因ZmSmk3的克隆方法，包括以下步骤：分别提取若干纯合突变体和纯合野生型植株叶片的DNA；将提取的纯合突变体DNA混合构建纯合突变体DNA池；将提取的野生型DNA混合构建野生型DNA池；分别对构建的纯合突变DNA池和野生型DNA池进行热不对称交错PCR，获得PCR产物片段；用琼脂糖凝胶电泳检测获得的PCR扩增产物片段，回收纯合突变体DNA池中均出现的特异条带，进行测序获得突变基因ZmSmk3的序列。所述基因ZmSmk3编码mTERF蛋白，该基因的突变影响籽粒发育进程，以及对育种实践具有重要的指导意义。
纯合突变体野生型DNA 基因构建蛋白编码玉米琼脂糖凝胶电泳检测克隆纯合突变发育进程突变基因影响籽粒育种实践植株叶片不对称野生型测序纯合条带突变交错回收应用

[发明专利]一种牡蛎疱疹病毒全基因组DNA富集方法-CN201611022172.4在审
发明人：白昌明;王崇明;史杰;汪清晨 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2016-11-21 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种牡蛎疱疹病毒全基因组DNA富集方法，步骤如下1）组织样品匀浆；2）低速离心去除杂质；3）基因组DNA提取；4）长片段PCR扩增；5）PCR扩增产物检测。与现有技术相比，本发明的有益效果是本发明是以牡蛎疱疹病毒种内相对保守的基因序列为模板，设计23对长片段PCR用引物。这些引物可以特异性地覆盖牡蛎疱疹病毒全基因组，并被经过优化的长片段PCR反应体系和程序所扩增，完成对对牡蛎疱疹病毒基因组DNA富集的目的，克服了之前无法富集和纯化病毒基因组DNA的问题。同时，该方法不仅可以用于新鲜组织样本内牡蛎疱疹病毒基因组DNA的富集，也可以用于冷冻保存组织样本内牡蛎疱疹病毒基因组DNA的富集。
一种牡蛎疱疹病毒基因组 dna 富集方法

[发明专利]真核细胞中DNA片段的维持、方法和用途-CN202180035899.9在审
发明人：乌韦·D·斯塔尔兹;颜·齐;杰娜·惠勒·卡尔 -专利权人：格雷菲克斯公司
申请日： 2021-03-29 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：将DNA片段引入真核细胞会使所述DNA片段暴露于细胞酶，此类DNA酶具有破坏这些DNA片段并因此降低功能的能力。本发明提供减少转染至细胞中的线性DNA片段的酶促破坏的手段和方法。为此目的，设计了表达构建体，其携带与DNA片段结合的蛋白质基因，并防止所述线性DNA片段的所述酶促破坏。提供了这些基因和表达载体在修饰包装细胞以增强病毒基因疗法载体的生产中的用途以及制备这些包装细胞的方法。
真核细胞 dna 片段维持方法用途

[发明专利]一种用于生物样本核酸检测的质控方法-CN201510559589.3在审
发明人：周立新;蒋峻峰;李丹;祝召虎;杨晓东;叶竹青;王大庆;孙晓磊;吴纯 -专利权人：健路生物科技（苏州）有限公司
申请日： 2015-09-07 - 公布日： 2015-12-16 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：包括以下步骤：1)采集多个待测生物样本并提取样本DNA备用；2)制备质控DNA以备用，所述质控DNA包括常见纯合型质控DNA、杂合型质控DNA和罕见纯合型质控DNA；3)将样本DNA和质控DNA一起进行基因分型检测；4)以质控DNA的检测结果作为参照进行基因分型分析。本发明的用于生物样本核酸检测的质控方法，可以有效降低最小等位基因频率对检测结果影响程度、有效提高检测准确性。
一种用于生物样本核酸检测方法

[发明专利]测定土壤样品DNA提取率的方法-CN201711066676.0在审
发明人：戴中民;徐建明 -专利权人：浙江大学
申请日： 2017-11-02 - 公布日： 2018-02-02 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了Aliivibrio fischeri菌株DNA的用途利用Aliivibrio fischeri菌株DNA测定土壤样品的DNA提取率。本发明还同时公开了一种测定土壤样品DNA提取率的方法，包括如下步骤培养Aliivibrio fischeri ATCC 7744T菌株，提取其DNA，作为测定土壤样品DNA提取率的内标；设计Aliivibrio fischeri中16S rRNA基因片段的特异性引物；先在土壤样品中加入内标的DNA，随后立即提取DNA；采用qPCR测定添加到土壤中内标的基因数量和提取之后土壤样品中内标的基因数量，计算DNA提取率
测定土壤样品 dna 提取方法

[发明专利]一种禾谷镰刀菌单链环状DNA病毒FgGMTV1/HB58及其应用-CN201910112468.2有效
发明人：郭立华;李鹏飞;王双超;邱德文;杨秀芬;曾洪梅;李广悦;袁京京;任杰 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2019-02-13 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种禾谷镰刀菌单链环状DNA病毒FgGMTV1/HB58及其应用，该病毒基因组包含两个单链环状DNA分子DNA‑A和DNA‑B，其基因组序列如SEQ ID NO:1‑2所示；且不含有单链环状DNA分子DNA‑C，其基因组序列如SEQ ID NO:3所示。只含有DNA‑A和DNA‑B的禾谷镰刀菌单链环状DNA病毒FgGMTV1/HB58可以减弱禾谷镰刀菌的致病性，具有在生物防治中的应用潜能，并具有广阔的应用前景。
一种禾谷镰刀链环 dna 病毒 fggmtv1 hb58 及其应用

[发明专利]DNA文库的制作方法和使用DNA文库的基因组DNA分析方法-CN201780040491.4有效
发明人：榎宏征;竹内由枝 -专利权人：丰田自动车株式会社
申请日： 2017-04-03 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：简便地制作再现性优异的DNA文库。用包含基因组DNA和高浓度的随机引物的反应液进行核酸扩增反应，获得以基因组DNA作为模板通过该核酸扩增反应而得的DNA片段。
dna 文库制作方法使用基因组分析方法

[发明专利]一种优化的获得无选择标记转基因生物的双T-DNA表达载体及其应用-CN201210576396.5有效
发明人：朱祯;孙兵;戴艳;冷春旭 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2012-12-26 - 公布日： 2014-07-02 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种优化的获得无选择标记转基因生物的双T-DNA表达载体及其应用。本发明提供的双T-DNA载体A，为将双T-DNA区域插入表达载体中上得到的载体；所述双T-DNA区域包括两个独立T-DNA区域：T-DNA区域A和T-DNA区域B；所述T-DNA区域A的右边界A和所述T-DNA区域B的右边界相邻，且所述T-DNA区域A的左边界A和所述T-DNA区域B的左边界相离。本发明的实验证明，本发明构建的双T-DNA质粒两个T-DNA区的右边界在质粒环中相互靠近，形成头对头的结构（LB-RB-RB-LR型），以期避免在转录的时候形成通读，降低转化基因与选择标记基因的连锁比例，从而提高T1代分离出无选择标记转基因株系几率，具有广阔的应用前景。
一种优化获得选择标记转基因生物 dna 表达载体及其应用

[发明专利]鉴定水稻DNA身份的方法及其应用-CN201610009053.9在审
发明人：周发松;喻辉辉;雷昉;韦懿;李菁;陈光;田冰川;张启发 -专利权人：中国种子集团有限公司
申请日： 2016-01-07 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： G06F19/22 文献下载
摘要：本发明提供鉴定水稻DNA身份的方法，包括通过检测水稻的全基因组的遗传多样性分子标记的基因型，获得水稻的标准基因指纹数据，由此鉴定所述水稻的DNA身份，或者进一步地，再通过特征基因指纹数据来鉴定水稻的DNA本发明提供的方法可以快速准确地鉴定水稻DNA身份，还可用于水稻新品种认定、种子监督管理或品种维权等。
鉴定水稻 dna 身份方法及其应用

[发明专利]通过测序平行分析单个细胞的RNA表达和靶向的酶切法片段化DNA-CN202180045323.0在审
发明人：任冰;朱成煦 -专利权人：路德维格癌症研究所
申请日： 2021-06-22 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及联合分析单个细胞中基因表达和基因表达的调节的方法。本发明提供了用于获得单核基因表达信息的方法，所述方法包括从一个或多个核中的基因组DNA中导出DNA文库，并从一个或者多个核的RNA中导出RNA文库，对RNA文库和DNA文库中的分子进行测序，以及将一个或者更多个核中每一个的RNA文库与DNA文库关联。
通过平行分析单个细胞 rna 表达靶向酶切法片段 dna