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[发明专利]选择甲基化标记的方法-CN201180034459.8有效
发明人： A·P·米德;M·J·威尔金森;C·M·R·罗佩茨 -专利权人：阿伯里斯特维斯大学
申请日： 2011-05-12 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及鉴定DNA基因座组的方法以用于鉴定非典型生长条件和鉴定感兴趣细胞种类或来源。所述方法能包含鉴定多组DNA基因座，所述基因座可以鉴定不同来源和/或基因型的细胞中的多个非典型生长条件。也提供了DNA基因座组及其应用。
选择甲基化标记方法

[发明专利]参与精子转染外源DNA的基因筛选方法-CN201510035764.9在审
发明人：赵永聚 -专利权人：赵永聚
申请日： 2015-01-23 - 公布日： 2015-04-29 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：参与精子转染外源DNA的基因筛选方法，它涉及一种参与精子转染外源DNA的基因筛选方法。本发明的目的是提供一种筛选参与精子转染外源DNA基因的方法。方法：一、构建重组质粒pGB-mCD4；二、cDNA文库筛选获得待测基因；三、待测基因阳性克隆抽提酵母质粒并扩增；四、质粒pGB-mCD4与待测基因阳性克隆酵母质粒共转入酵母双杂交菌株Y190；五、进行β-galactosidase显色反应，显色结果变蓝的为阳性，分析，获得参与精子转染外源DNA的基因。通过本发明的方法能够大量、快速的获得与CD4共同作用转运外源DNA的基因，为精子介导基因转移机理的研究开辟新的思路，最终为建立简单、稳定、高效的精子介导转基因方法学奠定基础。
参与精子转染 dna 基因筛选方法

[发明专利]一种鱼类转基因育种的方法-CN200910183768.6无效
发明人：曹哲明;丁炜东;杨健 -专利权人：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
申请日： 2009-08-07 - 公布日： 2010-01-27 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：一种鱼类转基因育种的方法，属于分子生物学鱼类育种技术领域。本发明主要将某种鱼类本身的基因组DNA经过预处理，获得有别于原基因组DNA的DNA重排片断，用转基因的方法将DNA重排片断导入原种鱼类的卵细胞中，和原种鱼类的基因组发生作用，形成变异的基因，并产生外形突变的个体并用目标区域扩增多态性(TRAP)方法判断DNA重排片断是否进入原种鱼类的基因组，并用两步扩增法获得变异的基因，为以后进行功能基因组研究提供一个基础，同时获得独特的分子标记。本发明方法简单，可广泛应用于鱼类以及其他动植物等育种和相关功能基因组的研究中。
一种鱼类转基因育种方法

[发明专利]一种快速区分转基因植物及其产品的DNA检测方法-CN201410030823.9无效
发明人：计皖;李健;柳金凤 -专利权人：宁夏林业研究所股份有限公司
申请日： 2014-01-23 - 公布日： 2014-04-30 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种快速区分转基因植物及其产品的DNA检测方法，其特点是，包括如下步骤：（1）提取并纯化已知转基因植物的DNA；（2）选取转基因构建中已知DNA序列，设计PCR反应一端的引物；（3）设计简并寡聚核苷酸；（4）设计PCR反应；（5）用凝胶电泳分离PCR产物，得出与每个转基因植物相应的特异的凝胶电泳图谱；（6）提取待检测的植物或其产品的DNA，扩增转基因及毗邻序列，获得凝胶电泳图谱；（7）比较待检测的植物或其产品与已知转基因植物的凝胶电泳图谱本发明提供了一种快速区分转基因植物及其产品的DNA检测方法，该方法利用转基因随机插入宿主基因组这一特性，鉴定转基因产品的来源。
一种快速区分转基因植物及其产品 dna 检测方法

[发明专利]重组腺相关病毒基因组及由其包装的单极rAAV载体-CN202111663496.7在审
发明人：邵嘉红;谈鹏程;吴相;赵晓明;陆阳;荀婷君;雷真真 -专利权人：苏州吉恒基因科技有限公司
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C07K14/015 文献下载
摘要：本文涉及一种重组腺相关病毒(rAAV)基因组及由其包装而成的单极rAAV(spAAV)载体。本文提供了一种包装前spAAV基因组，其两端均为线性开放性末端，其中一端不具有倒置末端重复序列(ITR)或其部分，另一端具有ITR截短部分(ITRt)，所述ITRt不形成T型发卡回文结构。所述spAAV基因组为单极、单链DNA。由本文提供的包装前spAAV基因组包装产生的spAAV载体只有一种极性的单链DNA，即，要么是正链DNA的spAAV载体，要么是负链DNA的spAAV载体，两者不同时产生。本文所述的spAAV载体能够递送线性单极、单链DNA，以供基因表达，基因治疗，基因编辑，基因调控等应用。
重组相关病毒基因组包装单极 raav 载体

[发明专利]STR分型标准物质的制备方法-CN201110195001.2有效
发明人：赵兴春;叶健 -专利权人：公安部物证鉴定中心
申请日： 2011-07-12 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：该制备方法包括如下步骤：将如下1)-31)的31个DNA片段混合得到DNA混合物。本发明围绕目前法医分子遗传学中业已发现的STR基因座位点，调查研究中国人群在上述位点中存在的全部等位基因，并利用生物统计技术研究每个等位基因的基因频率分布。在此基础上综合利用分子遗传学、分子生物学、细胞生物学、基因工程等实验技术，首次研发建立等位基因DNA信息库，包含STR基因座位点全部等位基因DNA片段，进而建立我国自主研发的法医DNA标准参照物体系，形成特有的人工合成的
str 标准物质制备方法

[发明专利]STR分型标准物质-CN201110194233.6有效
发明人：赵兴春;叶健 -专利权人：公安部物证鉴定中心
申请日： 2011-07-12 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：该STR分型标准物质是DNA混合物，包括核苷酸序列分别如1)-31)的31个DNA片段。本发明围绕目前法医分子遗传学中业已发现的STR基因座位点，调查研究中国人群在上述位点中存在的全部等位基因，并利用生物统计技术研究每个等位基因的基因频率分布。在此基础上综合利用分子遗传学、分子生物学、细胞生物学、基因工程等实验技术，首次研发建立等位基因DNA信息库，包含STR基因座位点全部等位基因DNA片段，进而建立我国自主研发的法医DNA标准参照物体系，形成特有的人工合成的
str 标准物质

[发明专利]一种产广谱耐热细菌素基因工程菌及其构建方法与应用-CN201310008505.8无效
发明人：崔德凤;张永红;阮文科;李焕荣;刘凤华 -专利权人：北京农学院
申请日： 2013-01-10 - 公布日： 2013-11-27 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了产广谱耐热型细菌素基因工程菌及其构建方法与应用。本发明提供了一种基因工程菌，细菌素的编码基因如序列1DNA分子或与序列1DNA分子杂交且有相同功能的DNA分子或与上述DNA分子具有90％以上同源性而且具有相同功能的DNA分子。其步骤：(1)细菌素编码基因引物的设计与扩增(2)PCR产物的纯化、回收，克隆与鉴定(3)目的基因与表达载体质粒pET-28a(+)的酶切(4)目的基因与表达载体质粒的连接与转化(5)重组基因工程菌的鉴定与细菌素表达本发明提供的基因工程菌可超量表达耐热型广谱细菌素，稳定性好可连续批量生产。
一种广谱耐热细菌基因工程及其构建方法应用

[发明专利]人45S核糖体DNA拷贝数检测试剂盒及检测方法-CN202111679613.9在审
发明人：王艳华;段化伟;王婷;林杨 -专利权人：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提供一种人45S核糖体DNA拷贝数检测方法，包括：提取待测样本基因组DNA，对待测样本基因组DNA和参考标准品分别利用荧光定量PCR方法进行检测，并通过PCR反应收集核糖体基因荧光信号(R)和单拷贝基因荧光信号(S)，基于所述标准曲线和待测样本基因组DNA检测得到的R/S比值计算得到待测样本的人核糖体DNA拷贝数相对量；PCR反应中以白蛋白基因作为内参基因并使用合适的引物，控制每10μL的反应体系中含有10μM的上游引物0.5μL、10μM的下游引物0.5μL和1μL的待测样本DNA或参考标准品DNA。本发明还提供用于检测人45S核糖体DNA拷贝数的试剂盒。本发明的检测方法和试剂盒检测准确性高、操作简便、需样量低，适用于大样本量的人群检测。
45 核糖体 dna 拷贝检测试剂盒方法

[发明专利]人5S核糖体DNA拷贝数检测试剂盒及检测方法-CN202111679625.1在审
发明人：段化伟;王艳华;王婷;张丽雅 -专利权人：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提供一种人5S核糖体DNA拷贝数检测方法，包括：提取待测样本基因组DNA，对待测样本基因组DNA和参考标准品分别利用荧光定量PCR方法进行检测，并通过PCR反应收集核糖体基因荧光信号(R)和单拷贝基因荧光信号(S)，基于所述标准曲线和待测样本基因组DNA检测得到的R/S比值计算得到待测样本的人核糖体DNA拷贝数相对量；PCR反应中以白蛋白基因作为内参基因并使用合适的引物，控制每10μL的反应体系中含有10μM的上游引物0.5μL、10μM的下游引物0.5μL和1μL的待测样本DNA或参考标准品DNA。本发明还提供用于检测人5S核糖体DNA拷贝数的试剂盒。本发明的检测方法和试剂盒检测准确性高、操作简便、需样量低，适用于大样本量的人群检测。
核糖体 dna 拷贝检测试剂盒方法

[发明专利]一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒-CN201610945971.2有效
发明人：刘东;石运伟;董张及;王新 -专利权人：南通大学
申请日： 2016-11-02 - 公布日： 2020-04-07 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒，采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达，包括NgAgo基因的改造，表达质粒的构建，表达质粒经过线性化、体外转录、回收步骤获得Argonaute mRNA，根据目的基因序列设计并合成5’‑p‑ss‑DNA Oligo，将Argonaute mRNA和5’‑p‑ss‑DNA Oligo导入靶细胞中等步骤；本发明所述的方法中改造的NgAgo基因能够在靶细胞中快速高效的进入细胞核；5’‑p‑ss‑DNA Oligo序列依据目的基因设计，对靶序列识别具有良好的特异性；5’‑p‑ss‑DNAOligo/NgAgo系统通过对真核细胞DNA水平的抑制作用，能够稳定高效的下调目的基因表达；5’‑p‑ss‑DNA Oligo具有良好的稳定性，利于在细胞内发挥作用；真核细胞自然条件下不存在内源性的5’‑p‑ss‑DNA Oligo因此特异性高。
一种下调基因表达方法及其试剂盒

[发明专利]CRISPR-Cas9高效敲入嵌合抗原受体基因到T细胞特定基因组位点的方法及应用-CN201810634963.5有效
发明人：彭作翰;李玏 -专利权人：西安桑尼赛尔生物医药有限公司
申请日： 2018-06-20 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及CRISPR‑Cas9高效敲入嵌合抗原受体基因到T细胞特定基因组位点的方法及其应用。本发明具体涉及一种将CAR基因精确敲入到T细胞目的基因组DNA的方法，所述方法包括a)采用基因编辑物质剪切目的基因组DNA，其中所述目的基因组DNA位于基因启动子区后，起始密码子和其所处的外显子3端之间；b)将CAR基因克隆至修复模版载体后导入T细胞，细胞以同源重组方式修复被剪切的目的基因组DNA，从而将CAR基因嵌入，其中所述修复模版载体为腺相关病毒载体。
crispr cas9 高效嵌合抗原受体基因细胞特定基因组方法应用

[发明专利]一种基于粪便总DNA应用于不同遗传分析的可行性评估方法-CN202210639547.0在审
发明人：徐艳春;崔靓玉;杨淑慧;刘博洋;兰天明;李晓平;刘欢;张小芳;李海盟;朱翌馨;张乐 -专利权人：东北林业大学;深圳华大生命科学研究院
申请日： 2022-06-08 - 公布日： 2022-09-02 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：一种基于粪便总DNA应用于不同遗传分析的可行性评估方法，属于分子生物学技术领域。为了填补当前粪便DNA应用于不同遗传分析场景下的质控方法以及可行性标准的空白，本发明以细菌的16srRNA基因、动物线粒体基因组上的ND5基因和核基因组上的RPS27A基因为目标，采用相应引物建立荧光定量PCR体系，分别测定粪便总DNA中细菌DNA、动物线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nuDNA)的拷贝数。DNA应用于以PCR技术为基础的SNP分型、STR分型和以高通量测序技术为基础的线粒体基因组组装和全基因组重测序场景下的成功率与RmtDNA和RnuDNA的关系模型，作为预评估粪便DNA在不同遗传分析中可用性的工具。
一种基于粪便 dna 应用于不同遗传分析可行性评估方法

[发明专利]基于RNA和DNA双外参实时定量PCR的表达校准值的检测方法-CN201310594531.3有效
发明人：陆长德;李园园 -专利权人：上海生物信息技术研究中心
申请日： 2013-11-21 - 公布日： 2014-02-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于RNA和DNA双外参实时定量荧光PCR策略的基因表达校准值的检测方法，包括：选定外参基因；配制外参基因的RNA与DNA的预混合液；样品中加入预混合液，收集样品RNA和DNA；实时定量荧光PCR，检测待测基因和内参基因RNA拷贝数、内参基因DNA拷贝数以及外参基因RNA和DNA拷贝数，计算得到内参基因的表观表达水平后，再根据公式得到待测基因的表达校准值。本发明将基因的表观表达水平概念和检测方法与传统表达检测体系相结合，以更少的检测反应、更低廉的成本实现更精确的基因表达水平检测，修正由内参基因真实表达水平在不同样本间不恒定所造成的检测结果的不准确。
基于 rna dna 双外参实时定量 pcr 表达校准检测方法

[发明专利]基于AlcR/alcA和Cre/loxP系统的标记基因诱导删除体系-CN201110046131.X无效
发明人：姚磊;赵青;马荣才;谢华;赵亮 -专利权人：北京农业生物技术研究中心
申请日： 2011-02-25 - 公布日： 2011-09-14 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于AlcR/alcA和Cre/loxP系统的标记基因诱导删除体系。本发明提供了一种将选择标记基因通过诱导予以删除，培育无标记转基因植物的方法，包括如下步骤：(1)用重组质粒转化出发植物，通过所述筛选基因筛选得到同时含有所述筛选基因和所述外源目的基因的转基因植物；重组质粒包括特异DNA片段甲和特异DNA片段乙；特异DNA片段乙含有外源目的基因的表达盒；DNA片段甲中将Cre基因置于alcA-min35S嵌合启动子下游，诱导前Cre基因不表达，不发生删除，乙醇存在时，转录因子AlcR构象改变，结合到alcA-min35S上，激活下游Cre基因的表达，Cre重组酶识别2个同向loxP位点，剔除位点之间的DNA片段。本发明可以解决因标记基因可能产生的潜在安全性隐患。
基于 alcr alca cre loxp 系统标记基因诱导删除体系