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- [发明专利]修饰基因组的组合物和方法-CN202080076311.X在审
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M·贝其曼;G·C·纽曼
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本森希尔股份有限公司
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2020-09-08
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2022-07-08
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C12N15/82
- 提供了用于修饰基因组DNA序列的组合物和方法。该方法在靶向的DNA序列中的预定靶位点产生双链断裂(DSB)，导致一个或多个靶向的位点处DNA序列的突变、插入和/或缺失。组合物包括DNA构建体，其包括编码Cpf1蛋白的核苷酸序列，其可操作地连接至在感兴趣的细胞中可操作的启动子。DNA构建体可以用于指导在预定位置的基因组DNA修饰。本文描述了使用这些DNA构建体来修饰基因组DNA序列的方法。此外，提供了用于调节基因表达的组合物和方法。组合物包括DNA构建体，其包括在感兴趣细胞中可操作的启动子，其可操作地连接至编码消除了生成DSB能力的突变型Cpf1蛋白的核苷酸序列，任选地连接至调节转录活性的结构域。该方法可以用于上调或下调预定基因组基因座处的基因表达。
- 修饰基因组组合方法
- [发明专利]一种筛选基因组DNA中差异位点及其侧翼序列的方法-CN200710063835.1无效
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王涛;李春雨;董江丽
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中国农业大学
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2007-02-12
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2007-08-08
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C12Q1/68
- 本发明公开了一种筛选基因组DNA中差异位点及其侧翼序列的方法。该方法包括以下步骤：1)用能产生粘性末端的限制性核酸内切酶消化参比基因组DNA和待测基因组DNA；2)根据所述粘性末端设计接头H，使其与所述带有粘性末端的DNA片段连接；3)以所述连接产物作为模板，利用引物H1进行PCR扩增；4)先利用S1核酸酶切割含有错配碱基的异源双链DNA；然后再加入所述限制性核酸内切酶；5)对所述待测基因组DNA中差异位点侧翼序列片段加dATP尾；6)对所述具有dATP尾的待测基因组DNA中差异位点侧翼序列片段连接接头T；7)利用引物H1和T1扩增所述待测基因组DNA中差异位点侧翼序列片段，并进行测序，获得所述侧翼序列；确定所述待测基因组DNA中的差异位点。
- 一种筛选基因组dna差异及其侧翼序列方法
- [发明专利]外源基因定点整合的双重荧光筛选方法-CN00116072.9无效
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汪亚平;胡炜;陈尚萍;朱作言
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中国科学院水生生物研究所
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2000-10-11
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2002-05-08
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C12Q1/68
- 本发明公开了一种外源基因定点整合的双重荧光筛选方法,该方法以受体基因组靶位DNA顺序为定点整合载体的同源DNA片段,以绿色荧光蛋白GFP基因为正向选择基因,置于同源DNA片段内,以蓝色荧光蛋白BFP基因为负向选择基因,置于同源DNA片段,构建双重荧光筛选定点整合载体。本发明方法易行,操作简便,在转基因细胞中进行荧光筛选获得定点转基因细胞,在转基因胚胎中直接筛选定点整全的转基因动物嵌合体,不需要胚胎干细胞和胚胎嵌合体操作。
- 基因定点整合双重荧光筛选方法
- [发明专利]基因大片段、单拷贝缺失检测芯片及其应用-CN03131741.3无效
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王亚平;张晓梅;李金田;吴晓柳;朱明;张元颖
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江苏省肿瘤医院
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2003-07-25
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2004-03-24
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C12Q1/68
- 本发明公开了一种基因大片段、单拷贝缺失检测芯片及其应用，解决了现有技术中受技术方法或样本通量限制而难以临床常规开展遗传性疾病的基因大片段缺失检测的不足和相关基因检出率不高的缺点，提供一种样本能量高、基因捡出率高的基因大片段、单拷贝缺失检测芯片和检测方法，其特征在于：选取检测基因，以基因外显子为单位，根据基因的基因组DNA结构，选择外显子中具有相近Tm值长度为30～50个碱基的序列并合成探针；探针点样固定于玻片，探针的分布符合统计量的要求；待检DNA样本酸化处理，制备成一定大小的DNA片段；待检DNA样本内加引物低度扩增，并标记荧光；待检DNA样本与芯片杂交，专用软件分析各杂交探针点荧光信号，确定待检DNA的目标基因是否存在大片段缺失。
- 基因片段拷贝缺失检测芯片及其应用
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