[发明专利]一种还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法在审
| 申请号： | 202111432318.3 | 申请日： | 2021-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN114107412A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 丁雪峰;钱明;李佳松;李帅杰;刘珊珊 | 申请（专利权）人： | 南京诺云生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/36 | 分类号： | C12P19/36;C12N9/96;C12N9/02 |
| 代理公司： | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 32231 | 代理人： | 张红艳 |
| 地址： | 210000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及工业催化技术领域，尤其是一种还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法，包括以下步骤：1)高温条件下甲酸脱氢酶活性的筛选；2)酸性条件下甲酸脱氢酶活性的筛选；3)根据步骤(1)和步骤(2)的结果，选择在高温条件和酸性条件下同时具有较高活性的甲酸脱氢酶待用；分别称取甲酸铵、NAD至烧瓶中，加纯水，在水浴中搅拌溶解并使用氢氧化钠调节pH为酸性；最后加入筛选得到的甲酸脱氢酶开始反应，并用氢氧化钠维持pH为酸性，制得还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。本方法可以使得反应能够在短时间内完成，既避免了酸性条件下产物的水解，又避免了碱性条件下生成的碳酸盐；完成反应后无大量碳酸盐，纯化成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 原型 烟酰胺腺 嘌呤 核苷酸 制备 方法 | ||
【主权项】：
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京诺云生物科技有限公司，未经南京诺云生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/202111432318.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一种糖核苷酸类产品的制备方法-202310649116.7
- 丁冯玲;邓俊云;刘全;肖聪 - 武汉糖智药业有限公司
- 2023-06-02 - 2023-09-29 - C12P19/36
- 本发明公开了一种糖核苷酸类产品的制备方法，涉及生物药物技术领域。包括如下步骤：S1：将单糖、ATP、XTP、氯化镁溶解到水中，调节溶液pH值，再加入酶相应的激酶、合成酶、辅助酶进行反应，得到产物液1，所述XTP为UTP、GTP或CTP；S2：向产物液1中加入碱性磷酸酶，进行反应，得到产物液2，经微孔滤膜过滤后，采用蛋白膜包超滤除去蛋白残留，得到产物液3；S3：将产物液3通过C18层析柱进行纯化，得到产物液4；S4：将产物液4经过旋蒸浓缩后，通过离子色谱填料层析柱进行纯化，得到产物液5；S5：将产物液5采用卷式膜分离系统进行除盐处理，最后浓缩冻干，得到糖核苷酸类固体产品。本发明产品收率高，生产成本低，操作简便，产品纯度可达98％以上。
- 一种电促固定化酶催化合成NADPH的方法-202310715036.7
- 范怡麟 - 深圳津合生物有限公司
- 2023-06-16 - 2023-09-12 - C12P19/36
- 本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种电促固定化酶催化合成NADPH的方法。本发明采用三电极体系，以含有NADP
- 多酶级联反应合成3’-甲氧基鸟苷二磷酸的方法及其应用-202310649114.8
- 吴结缘;冯连顺;肖聪 - 武汉糖智药业有限公司
- 2023-06-02 - 2023-09-08 - C12P19/36
- 本发明公开了一种多酶级联反应合成3’‑甲氧基鸟苷二磷酸的方法及其应用，涉及生物合成技术领域。包括如下步骤：(1)鸟苷激酶EaGSK和鸟苷酸激酶PfGMK的克隆、表达和纯化；(2)3’‑甲氧基鸟苷合成3’‑甲氧基鸟苷单磷酸：以3’‑甲氧基鸟苷和三磷酸腺苷ATP为底物，加入鸟苷激酶，反应生成3’‑甲氧基鸟苷单磷酸，超滤除酶后作为下一步反应的底物；(3)3’‑甲氧基鸟苷单磷酸合成3’‑甲氧基鸟苷二磷酸：以3’‑甲氧基鸟苷单磷酸和三磷酸腺苷ATP为底物，加入鸟苷酸激酶，合成3’‑甲氧基鸟苷二磷酸。本发明的制备方法方便快捷，能在较短的时间内合成3’‑甲氧基鸟苷二磷酸，且使用的底物价格低廉，转化率高；对于3’‑甲氧基鸟苷二磷酸的大量合成具有较高的参考价值，适于推广应用。
- 第二信使小分子2’,3’-cGAMP的制备与纯化方法-202310473674.2
- 丛晓燕;吴香菊;李均同;齐静;杜以军 - 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
- 2023-04-24 - 2023-08-01 - C12P19/36
- 本发明提供了一种第二信使小分子2’,3’‑cGAMP的制备与纯化方法。本发明首先重组构建了鼠mcGAS蛋白，在引入双链DNA的条件下，催化合成2',3'‑cGAMP小分子，用高效液相色谱的方法纯化获得高纯度的2',3'‑cGAMP小分子，随后通过汽相扩散坐滴的结晶办法结晶，显微镜下捞取晶体，有效去除经液相纯化后产品中含有的液相流动相的盐乙酸铵。本发明通过引入双链DNA的方式进行催化合成提高了催化合成率。
- 一种酶法制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的方法-202310400406.8
- 陈永贵;李家龙;杨述章;任杰;范谦 - 湖南利尔生物科技有限公司
- 2023-04-14 - 2023-07-11 - C12P19/36
- 本发明涉及一种酶法制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的方法，所述方法包括如下步骤：第1步反应：在反应体系I中，以NMN，和三磷酸腺苷或三磷酸腺苷盐为底物，在NMNAT的催化下，生成NAD和焦磷酸；可选的，在IPP1的催化下水解所述焦磷酸，促进反应正向进行；第2步反应：在反应体系II中，第1步反应生成的所述NAD在磷酰基供体的参与下，在MfnK的催化下，生成NADP。本发明提供的方法底物成本适中，工艺路线短，原子经济性高，副产物少；通过优选酶源及合成条件，合成时间短，酶催化效率高，底物耐受强，合成转化率高，可满足高浓度底物高效催化合成NADP。
- 一种利用甲酸还原NAD类似物的方法-201910293679.0
- 赵宗保;郭潇佳;王雪颖 - 中国科学院大连化学物理研究所
- 2019-04-12 - 2023-06-20 - C12P19/36
- 本发明公开了一种利用甲酸还原NAD类似物的方法及其应用。该方法中还原剂为甲酸化合物，催化剂为可利用甲酸化合物的甲酸脱氢酶，甲酸脱氢酶氧化甲酸化合物的同时，将NAD类似物转化为其还原态。该方法可用于生产还原态NAD类似物或氘代的还原态类似物，也可为消耗还原态NAD类似物的酶促反应提供还原力，还原态的NAD类似物可作为辅酶应用于苹果酸酶ME‑L310R/Q401C、D‑乳酸脱氢酶DLDH‑V152R、酿酒酵母醇脱氢酶等酶催化的还原反应，有利于NAD类似物的广泛应用。该NAD类似物还原方法可在温和条件下，再生还原态NAD类似物用于苹果酸或乳酸的制备；也可作为一种氧化还原力调控微生物体内苹果酸或乳酸的代谢强度。
- 一种6-羟基-黄素腺嘌呤二核苷酸的制备方法及其作为铁死亡抑制剂的应用-202310139279.0
- 朱德裕 - 山东大学
- 2023-02-21 - 2023-05-26 - C12P19/36
- 本发明涉及一种6‑羟基‑黄素腺嘌呤二核苷酸的制备方法及其作为铁死亡抑制剂的应用。所述制备方法包括：(1)构建重组质粒pET28a‑Sumo‑hFSP1；(2)构建重组菌hFSP1；(3)将重组菌hFSP1培养，经诱导、裂解、离心和纯化后，得到hFSP1蛋白；(4)将hFSP1蛋白变性、纯化后，得到6‑羟基‑黄素腺嘌呤二核苷酸。本发明还发现6‑羟基‑黄素腺嘌呤二核苷酸(6‑hydroxy‑FAD)具有抑制细胞铁死亡的功能，细胞实验显示6‑hydroxy‑FAD能够明显抑制由RSL3引起的铁死亡，可以用于制备铁死亡抑制剂、制备抑制细胞铁死亡药物以及制备由铁死亡引发的疾病治疗药物，为高效的铁死亡抑制剂相关药物的研发提供了新的选择。
- 一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法-202310350807.7
- 张超;陆雯洁;甄明;王继明;霍明娟;王海彬 - 江苏诚信药业有限公司;内蒙古金达威药业有限公司;厦门金达威集团股份有限公司;金达威生物技术（江苏）有限公司
- 2023-04-04 - 2023-05-23 - C12P19/36
- 本发明提供一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：以烟酰胺单核苷酸为原料，与ATP、金属盐和碱在烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶催化下反应得到烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。在本发明的制备方法中，摒弃价格昂贵的缓冲液的应用，采用ATP‑碱形成的缓冲体系，取得了降低成本、阻止二价金属盐沉淀的技术效果，该路线反应简单，反应较为温和，无高危反应，生成的废弃物较少，很适合进行工业化生产。
- 制备辅酶NADH的方法-202210945115.2
- 付琳;赵弘;杨苑丽;陈海英;伍伟林;邓小清;潘俊锋;刘建 - 深圳瑞德林生物技术有限公司
- 2022-08-08 - 2023-04-07 - C12P19/36
- 本发明涉及生物酶催化合成领域，具体涉及制备辅酶NADH的方法。本发明利用一锅法生物酶催化反应制备NADH，并对反应体系各组分配比进行了优化，实现了NADH的高产率(84％)。与现有技术相比，本发明所利用的技术方案有效减少了反应时间及操作步骤，节约了工业化生产成本；本发明使用的葡萄糖脱氢酶酶活性高，稳定性强，可以有效解决现有工艺中FDH稳定性及比活性较低的问题。综上所述，本发明的制备方法操作简单、成本低且产率高，具有广阔的应用前景。
- 一种NAD+的制备方法及NMNAT的应用-202110853020.3
- 王舒;田振华;焦琦;程占冰 - 弈柯莱生物科技（上海）股份有限公司
- 2021-07-27 - 2023-02-03 - C12P19/36
- 本发明公开了一种NAD+的制备方法及NMNAT的应用。所述NAD+的制备方法包括以下步骤：在反应体系中，使用烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶催化NMN和ATP或其二钠盐，从而合成NAD+，其中所述烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶选自GenBank登录号为WP_137651209.1、SUF38787.1、EAA7244348.1、WP_013799818.1和WP_011972696.1的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶中的一种或多种。所述制备方法可在高浓度底物NMN的情况下高转化率地生产NAD+，大大提升了NAD+的生产效率。
- 一种利用甲醛还原NAD类似物的方法-201811154805.6
- 赵宗保;郭潇佳;刘武军 - 中国科学院大连化学物理研究所
- 2018-09-30 - 2022-11-29 - C12P19/36
- 本发明公开了一种利用甲醛还原NAD类似物的方法及其应用。该方法以甲醛脱氢酶为催化剂，以NAD类似物为电子受体，将甲醛特异性氧化成甲酸，起到解毒作用，同时将NAD类似物转化为其还原态。该方法可用于生产还原态的NAD类似物，为消耗还原态NAD类似物的酶促反应提供还原力，应用于苹果酸酶ME‑L310R/Q401C、D‑乳酸脱氢酶DLDH‑V152R、酿酒酵母醇脱氢酶等酶催化的还原反应，有利于NAD类似物的广泛应用。该方法也可在胞内或胞外的复杂反应体系中以NAD类似物为电子受体，以甲醛脱氢酶为催化剂特异性氧化甲醛，实现解毒作用，同时不干扰体系中其他反应的正常进行。
- 一种利用甲醇还原NAD类似物的方法-201811154784.8
- 赵宗保;郭潇佳;刘武军 - 中国科学院大连化学物理研究所
- 2018-09-30 - 2022-10-25 - C12P19/36
- 本发明公开了一种利用甲醇还原NAD类似物的方法及其应用。该方法中还原剂为甲醇，催化剂为可利用甲醇的甲醇脱氢酶，甲醇脱氢酶氧化甲醇的同时，将NAD类似物转化为其还原态。该方法可用于生产还原态NAD类似物或氘代的还原态类似物，也可为消耗还原态NAD类似物的酶促反应提供还原态辅酶，还原态的NAD类似物可作为辅酶应用于苹果酸酶ME‑L310R/Q401C、D‑乳酸脱氢酶DLDH‑V152R、酿酒酵母醇脱氢酶等酶催化的还原反应，有利于NAD类似物的广泛应用。该NAD类似物还原方法可在温和条件下，再生还原态NAD类似物用于苹果酸或乳酸的制备；也可作为一种氧化还原力调控微生物体内苹果酸或乳酸的代谢强度。
- 酶促合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸的方法及其应用-201911004591.9
- 赵宗保;王雪颖 - 中国科学院大连化学物理研究所
- 2019-10-22 - 2022-10-04 - C12P19/36
- 本发明涉及一种酶促合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸的方法及其应用。利用烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体为催化剂，催化烟酰胺单核苷酸和胞嘧啶核苷三磷酸耦合反应，制备烟酰胺胞嘧啶二核苷酸。在微生物细胞内表达烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体的编码基因，工程菌利用内源代谢物合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸，并且胞内烟酰胺胞嘧啶二核苷酸可作为辅酶，选择性介导氧化还原反应，提高目标代谢产物产量。在一个典型实例中，L‑苹果酸产量提高了79％。在另一个典型实例中，L‑苹果酸生产D‑乳酸的转化率提高了2.4倍。
- 一种还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法-202111432318.3
- 丁雪峰;钱明;李佳松;李帅杰;刘珊珊 - 南京诺云生物科技有限公司
- 2021-11-29 - 2022-03-01 - C12P19/36
- 本发明涉及工业催化技术领域，尤其是一种还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法，包括以下步骤：1)高温条件下甲酸脱氢酶活性的筛选；2)酸性条件下甲酸脱氢酶活性的筛选；3)根据步骤(1)和步骤(2)的结果，选择在高温条件和酸性条件下同时具有较高活性的甲酸脱氢酶待用；分别称取甲酸铵、NAD至烧瓶中，加纯水，在水浴中搅拌溶解并使用氢氧化钠调节pH为酸性；最后加入筛选得到的甲酸脱氢酶开始反应，并用氢氧化钠维持pH为酸性，制得还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。本方法可以使得反应能够在短时间内完成，既避免了酸性条件下产物的水解，又避免了碱性条件下生成的碳酸盐；完成反应后无大量碳酸盐，纯化成本低。
- 一种酶催化氧化型烟酰胺辅酶的再生方法及应用-201910049344.4
- 李宁;贾浩宇;宗敏华 - 华南理工大学
- 2019-01-18 - 2021-12-17 - C12P19/36
- 本发明属于生物催化及生物制造领域，公开了一种酶催化氧化型烟酰胺辅酶的再生方法及应用，具体步骤如下：将还原型烟酰胺辅酶加入pH为6.0～9.0的缓冲液中，混合均匀，再加入0.1～2.0mg/mL血红素蛋白、0～0.4mM介体及0.1～15mM过氧化氢，于25～40℃下反应，得到相应的氧化型辅酶。并将该方法与脱氢酶耦合用于催化氧化反应，合成各种高附加值产品。本发明涉及氧化型烟酰胺辅酶再生方法具有效率高、适应性强，能在工业反应条件应用等特点。可与多种烟酰胺辅酶依赖的脱氢酶耦合用于催化氧化反应，该氧化反应具有反应条件温和、简单易控、选择性高、环境友好、辅酶转化系数高及生产成本低等优点。
- 一种氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的生产方法-201810107997.9
- 彭继先;于海勤;刘艳平;孟中英;乔久生;李辉;吴桂平 - 山东睿智医药科技有限公司
- 2018-02-02 - 2021-10-12 - C12P19/36
- 本发明属于生物产品提取领域，特别涉及一种氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的生产方法。本方法以枯草芽孢杆菌¸巨大芽孢杆菌为原料，用去离子水重悬后破碎，加絮凝剂絮凝，过滤收集滤液；滤液经超滤膜脱除蛋白后，即得产品I；产品I在等电点附近经两步阳离子树脂分离，用纳滤膜脱盐后，即为产品Ⅱ；产品Ⅱ中滴加有机溶媒，低温结晶，晶体经低温干燥后，即得产品Ⅲ。本发明的有益效果是：本发明生产方法填补了国内生产技术空白；满足了工业生产及科研等不同层次的需要，生产成本得到有效控制；利用氧化型NADP+分子的两性特点，在等电点附近利用两种不同的阳离子树脂，对产品进行了精密提取分离。
- 亮氨酸脱氢酶偶联光电催化制备辅因子的方法-202110791108.7
- 江伟;吴静芳;肖静冉 - 华侨大学
- 2021-07-13 - 2021-10-08 - C12P19/36
- 本发明公开了亮氨酸脱氢酶偶联光电催化制备辅因子的方法。步骤包括重组蛋白的诱导表达、粗酶液的纯化、蛋白浓度及酶活的测定、催化剂的光电性能检测、生物催化偶联光电催化制备辅因子。通过在三电极体系下对不同体系的光电性能及其催化反应进行研究，结果表明了光电催化可以为反应提供辅因子，验证了生物催化偶联光电催化进行辅因子再生的可行性。本发明成本低廉、对环境友好，对辅因子再生有重要意义。
- 一种应用生物酶法制备NADP的方法-202110814121.X
- 王康林;汪晓东;王磊;金永红 - 合肥康诺生物制药有限公司
- 2021-07-19 - 2021-10-08 - C12P19/36
- 本发明涉及生物制药领域，具体涉及应用生物酶制备烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸的方法。所述方法包括建立应用生物酶制备烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸的酶促反应体系，所述生物酶选自NAD激酶，所述NAD激酶的CAS号为9032‑66‑0；所述酶促反应体系还包括NAD、偏磷酸盐、pH调节剂、以及Mg
- 使用重组大肠杆菌发酵制备环二核苷酸的方法-201810545363.1
- 朱德裕;吕云;朱敬 - 山东大学
- 2018-05-31 - 2021-09-21 - C12P19/36
- 本发明公开了一种使用重组大肠杆菌发酵制备环二核苷酸的方法，包括使用目的基因和质粒构建重组载体，将所述重组载体转化至大肠杆菌感受态细胞中，验证并选择转化成功的重组大肠杆菌加以诱导和培养，使其产生目标环二核苷酸，并从培养物分离纯化所述环二核苷酸。本发明方法的步骤较少，所需原材料和设备较少，从而显著降低生产成本，且产率较高。
- 一种细菌第二信使分子环二核苷酸的制备方法-202110667590.3
- 景志忠;何小兵;龙朝琳;陈国华;杨帆;贾怀杰;房永祥;李维克;娄忠子 - 中国农业科学院兰州兽医研究所
- 2021-06-16 - 2021-08-17 - C12P19/36
- 本发明涉及基因工程与生物化学技术领域，具体为一种运用同一种细菌源重组生物酶催化生成三种第二信使分子，即环二核苷酸c‑di‑GMP、c‑di‑AMP和3′3′‑cGAMP的方法。所述重组生物酶为重组霍乱弧菌二核苷酸环化酶DncV，即重组DncV酶。DncV的氨基酸序列如序列表的序列1所示。本发明利用基因工程学技术首先制备可溶性表达的重组霍乱弧菌二核苷酸环化酶DncV，然后利用生物化学方法以ATP、GTP或ATP和GTP为底物，该生物酶分别催化合成高活性、专一性的c‑di‑GMP、c‑di‑AMP或3’3’‑cGAMP，提供简单快速、成本低廉、条件温和、产率高以及可大规模生产三种CDNs的制备方法；同时提供一种能够鉴定重组DncV酶及其催化产物c‑di‑GMP、c‑di‑AMP或3’3’‑cGAMP生物学活性的方法。
- 一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类化合物生物合成方法-201810613079.3
- 陈义华;丁勇 - 中国科学院微生物研究所
- 2018-06-14 - 2021-08-03 - C12P19/36
- 本发明公开了一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类化合物生物合成方法。本发明提供的合成路径以分支酸为起点，在PhzD蛋白的作用下经过转氨重排反应生成氨基脱氧异分支酸，氨基脱氧异分支酸在PhzE蛋白的催化下脱去丙酮酸部分生成2,3‑二氢‑3‑羟基邻氨基苯甲酸，采用特定酶将2,3‑二氢‑3‑羟基邻氨基苯甲酸催化生成3‑羟基邻氨基苯甲酸，在nabC蛋白的作用下3‑羟基邻氨基苯甲酸通过氧化开环重排反应生成喹啉酸，随后进入NAD补救途径，完成NAD的合成。本发明解除了NAD合成与色氨酸或天冬氨酸合成的耦联，同时，分支酸广泛存在于各种生命形式中，且对其他生命必需代谢途径的影响较小。
- 一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法-202011613569.7
- 李斌;张超;刘发光;张晨晨;翁秋景;缪朱玲 - 江苏诚信药业有限公司
- 2020-12-30 - 2021-04-30 - C12P19/36
- 本发明提供一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法，所述制备方法包括：向电渗析槽中加入烟酰胺单核苷酸、三磷酸腺苷、烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶和水，开启电渗析设备，进行反应。所述制备方法通过电渗析法将反应的副产物焦磷酸从反应体系中移除，从而打破反应平衡，促使反应向正反应方向进行，能够提高产物NAD+的生成率，并降低反应后处理的难度。
- 用cGAMP或cGAsMP治疗癌症的方法-202011366626.6
- P.李;C.王;C.舒 - 立博美华基因科技有限责任公司
- 2015-12-15 - 2021-04-09 - C12P19/36
- 在一个实施方式中，治疗患者癌症的方法包括向患有癌症的患者施用cGAMP或cGAsMP并允许cGAMP或cGAsMP治疗癌症。在另一个实施方式中，用于酶促合成和纯化cGAMP或cGAsMP的方法包括：提供cGAS；将cGAS分别与ATP或ATP硫代磷酸酯结合，并与GTP结合产生cGAMP或cGAsMP；通过超滤将cGAMP或cGAsMP与cGAS和DNA分离；并使用离子交换色谱法和任选的凝胶过滤色谱法纯化cGAMP或cGAsMP。
- 酶促合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸的方法-201510940681.4
- 赵宗保;王雪颖;刘玉雪 - 中国科学院大连化学物理研究所
- 2015-12-16 - 2020-10-30 - C12P19/36
- 本发明涉及一种酶促合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸的方法及其应用。利用烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体为催化剂，催化烟酰胺单核苷酸和胞嘧啶核苷三磷酸耦合反应，制备烟酰胺胞嘧啶二核苷酸。在微生物细胞内表达烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体的编码基因，工程菌利用内源代谢物合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸，并且胞内烟酰胺胞嘧啶二核苷酸可作为辅酶，选择性介导氧化还原反应，提高目标代谢产物产量。在一个典型实例中，苹果酸产量提高了30％。
- 一种利用甲醇还原NAD类似物的方法-201910303618.8
- 赵宗保;王俊婷 - 中国科学院大连化学物理研究所
- 2019-04-16 - 2020-10-27 - C12P19/36
- 本发明公开了一种利用甲醇还原NAD类似物的方法及其应用。该方法中还原剂为甲醇，催化剂为可利用甲醇的甲醇脱氢酶，甲醇脱氢酶氧化甲醇的同时，将NAD类似物转化为其还原态。该方法可用于生产还原态NAD类似物或氘代的还原态类似物，也可为消耗还原态NAD类似物的酶促反应提供还原态辅酶，还原态的NAD类似物可作为辅酶应用于苹果酸酶ME‑L310R/Q401C、D‑乳酸脱氢酶DLDH‑V152R、酿酒酵母醇脱氢酶等酶催化的还原反应，有利于NAD类似物的广泛应用。该NAD类似物还原方法可在温和条件下，再生还原态NAD类似物用于苹果酸或乳酸的制备；也可作为一种氧化还原力调控微生物体内苹果酸或乳酸的代谢强度。
- 酶促合成烟酰胺尿嘧啶二核苷酸的方法-201510939556.1
- 赵宗保;王雪颖;刘玉雪 - 中国科学院大连化学物理研究所
- 2015-12-16 - 2020-10-16 - C12P19/36
- 本发明涉及一种酶促合成烟酰胺尿嘧啶二核苷酸的方法及其应用。利用烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体为催化剂，催化烟酰胺单核苷酸和尿嘧啶核苷三磷酸耦合反应，制备烟酰胺尿嘧啶二核苷酸。在微生物细胞内表达烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体的编码基因，工程菌利用内源代谢物合成烟酰胺尿嘧啶二核苷酸，并且胞内烟酰胺尿嘧啶二核苷酸可作为辅酶，选择性介导氧化还原反应，提高目标代谢产物产量。在一个典型实例中，琥珀酸产量提高了35％。
- 一种提高辅酶I产量的发酵方法-202010723233.X
- 王伟;金永红;潘丽英;普坤;周多玲;王磊 - 开封康诺药业有限公司
- 2020-07-24 - 2020-10-02 - C12P19/36
- 本发明公开了一种提高辅酶I产量的发酵方法，包括如下步骤：S1、将酿酒酵母接种到培养基中，然后进行发酵，当发酵液的OD
- 一种β-烟酰胺核糖二核苷酸的制备方法-202010529554.6
- 王杰;颜祥飞;彭文静;李卓;王姝昕;宋辉;冯晓燕 - 辽宁天华生物药业有限公司
- 2020-06-11 - 2020-09-08 - C12P19/36
- 本发明涉及生物酶催化制备领域，具体涉及一种β‑烟酰胺核糖二核苷酸的制备方法。该方法首先通过高密度发酵法制备烟酰胺核糖激酶和烟酰胺单核苷酸转移酶，然后烟酰胺核糖和ATP在烟酰胺核糖激酶和烟酰胺单核苷酸转移酶作用下生产β‑烟酰胺核糖二核苷酸。本发明提供制备烟酰胺核糖激酶和烟酰胺单核苷酸转移酶的高密度发酵方法，方法中使用发酵培养基中含有适合大肠杆菌生长的必需元素，在诱导剂IPTG的作用下，使得大肠杆菌在发酵培养基中良好生长并且能够高产烟酰胺核糖激酶和烟酰胺单核苷酸转移酶，酶活比较高。本发明提供β‑烟酰胺核糖二核苷酸的制备方法效率高，操作简单，收率高，使用的烟酰胺核糖和ATP是常见的原料，成本低，适合产业化生产。
- 一种cGAMP生物合成方法-201811338217.8
- 张学敏;李涛;周涛;李爱玲;何昆;刘朝山;夏天 - 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
- 2018-11-12 - 2020-05-19 - C12P19/36
- 本发明公开了一种cGAMP生物合成方法。本发明提供了一种合成cGAMP的方法，为用核苷转移酶cGAS和蛋白G3BP1催化反应缓冲液中的ATP、GTP和DNA，收集反应产物，即得到合成的cGAMP；所述反应缓冲液包括ATP、GTP和DNA。本发明的实验证明，蛋白G3BP1能促进核苷转移酶cGAS催化ATP、GTP和DNA合成cGAMP，与已报道的cGAS催化ATP、GTP和DNA合成cGAMP方法相比，能够显著提高cGAMP的合成效率。
- 一种酶法制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法-202010069632.9
- 周浩 - 杭州唯泰生物药业有限公司;马鞍山唯泰生物技术有限公司
- 2020-01-21 - 2020-05-15 - C12P19/36
- 本发明属于生物制药和生物化工技术领域，公开了一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸生产用酶组合物及一种酶法制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法。本发明所述酶组合物由腺苷激酶、腺嘌呤磷酸核糖转移酶、烟酰胺磷酸核糖转移酶和烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶组成。四种酶合理组合可以高效催化制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。本发明所述酶组合物可循环利用，成本低，节能环保。本发明所述酶法制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法以腺苷为底物，通过添加所述酶组合物，可以低成本、安全可靠制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，降低现有路线的成本，使其适应规模化生产，为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在生物催化和药品领域的使用提供保证。
- 专利分类
