本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种高转化率的蔗糖异构酶及其应用，该蔗糖异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入PB、纯水，加入该蔗糖异构酶的粗酶液，30℃反应。其中，酶的最高底物浓度≤700g/L，底物：粗酶液投比≤100：1。本发明的高转化率蔗糖异构酶比野生型蔗糖异构酶具有更高的底物浓度，更快的反应速度，投酶量低，可有效缩减成本；转化率高，大于95％。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种蔗糖磷酸化酶及其在制备葡萄糖‑1‑磷酸中的应用，该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入缓冲液、纯水，加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液，37℃反应。本发明的反应体系转化率高，反应速度快，在高浓度蔗糖反应时，仍可保持3小时反应时间蔗糖转化率大于85％，并有效抑制副产物葡萄糖的生成。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种高反应浓度下的异麦芽酮糖快速制备方法及其蔗糖异构酶，该蔗糖异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入PB、纯水，加入该蔗糖异构酶的粗酶液，30℃反应。其中，酶的最高底物浓度≤800g/L，底物：粗酶液投比≤200：1。本发明的制备方法可以实现在高反应浓度下对异麦芽酮糖的快速制备，基本所有反应都可以在6小时结束；而且本发明的蔗糖异构酶比野生型蔗糖异构酶具有更高的底物浓度，更快的反应速度，投酶量低，可有效缩减成本。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种高活性的蔗糖磷酸化酶及其应用，该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入缓冲液、甘油、纯水，加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液，37℃反应。本发明的高活性蔗糖磷酸化酶比野生型蔗糖磷酸化酶反应速度更快、活性更高，而且在高浓度底物中可以有效缩短反应时间、提高生产效率、减小能耗并综合缩减成本。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种高活性的蔗糖异构酶及其应用，该蔗糖异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入PB、纯水，加入该蔗糖异构酶的粗酶液，30℃反应。其中，酶的最高底物浓度≤750g/L，底物：粗酶液投比≤200：1。本发明的高活性蔗糖异构酶比野生型蔗糖异构酶具有更高的底物浓度，更快的反应速度，投酶量低，可有效缩减成本；转化率高，大于90％。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种蔗糖磷酸化酶及其应用，该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入缓冲液、甘油、纯水，加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液，37℃反应。该蔗糖磷酸化酶的最高底物浓度可达400g/L；且3小时内转化率大于90％。本发明的蔗糖磷酸化酶比野生型蔗糖磷酸化酶反应速度更快，而且在高浓度底物下可以有效缩短反应时间、提高生产效率、减小能耗并综合缩减成本；尤其适用于工业大规模生产甘油葡萄糖苷。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种蔗糖磷酸化酶及葡萄糖基甘油生产工艺，该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入缓冲液、甘油、纯水，加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液，37℃反应。本发明的高活性蔗糖磷酸化酶比野生型蔗糖磷酸化酶反应速度更快、活性更高，而且在高浓度底物中可以有效缩短反应时间、提高生产效率、减小能耗并综合缩减成本。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种葡萄糖基甘油的生物催化生产工艺及其蔗糖磷酸化酶，该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。在生物催化生产葡萄糖基甘油时，取蔗糖母液，加入缓冲液、甘油、纯水，加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液，37℃反应。本发明生物催化生产工艺中的蔗糖磷酸化酶比野生型蔗糖磷酸化酶反应速度更快、活性更高，而且在高浓度底物时能够有效缩短反应时间、提高生产效率、减小能耗并综合缩减成本。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种蔗糖磷酸化酶及葡萄糖‑1‑磷酸生产工艺，该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取蔗糖母液，加入缓冲液、纯水，加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液，37℃反应。本发明的反应体系转化率高，反应速度快，在高浓度蔗糖反应时，仍可保持3小时反应时间蔗糖转化率大于85％，并有效抑制副产物葡萄糖的生成。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种烟酰胺核糖激酶突变体的应用，所述烟酰胺核糖激酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示，在该烟酰胺核糖激酶突变体存在下，可在45℃‑50℃高温条件下将烟酰胺核糖生成烟酰胺单核苷酸。本发明的烟酰胺核糖激酶突变体高温催化烟酰胺核糖生成烟酰胺单核苷酸，反应温度更高，可有效缩短反应时间，并有效灭活杂酶，减少产物的降解。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种烟酰胺核糖激酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示，与野生型烟酰胺核糖激酶相比具有更高的催化活力及热稳定性。本发明的烟酰胺核糖激酶突变体在45℃‑50℃的活性更持久，能有效缩短反应周期；该突变体对反应的冷却系统要求不高，因而降低了能耗并降低了成本。而且可在室温下运输保存，有效延长保质期。另外，在高温催化反应的条件下，避免了杂菌的生长机会，从而减少了细菌的代谢产物对产品的污染，有助于增加底物的溶解度，提高单位体积的生产效率。
本发明公开了一种抗艾滋病药物阿扎那韦中间体的生物转化方法，属于医药生物技术领域，对基因的二级结构以及密码子偏好性进行调整，引物长度控制在60base以内，得到引物，并将获得的引物加双蒸水溶解后，加到反应体系中，将配制好的PCR反应体系进行扩增，将得到的DNA片段进行切胶纯化，利用同源重组的方法克隆进pET30a的NdeI/XhoI位点，测序成功的DNA序列为SEQ ID NO.3，命名为Sst‑2，其对应的氨基酸序列为SEQ ID NO.4。本发明反应条件温和，对设备要求低，生产过程无需高温或者冷却，能耗低，纯化方便，整个体系使用单酶催化，辅酶循环次数高，且反应条件温和。
本发明实施例公开了一种高温生物转化制备L‑2‑氨基丁酸的方法，涉及生物化学技术领域，通过热稳定的苏氨酸脱氨酶能将L苏氨酸转化成2‑丁酮酸，再通过亮氨酸脱氢酶及醇脱氢酶转化2‑丁酮酸生成L‑2‑氨基丁酸，所述苏氨酸脱氨酶源于Chryseobacterium takakiae的野生型苏氨酸脱氨酶或其突变体，且所述突变体与SEQ ID NO.2具有90％以上相似性并具有以下特征中的一个或多个突变：H63N，I78V，E202S，R375K，所述苏氨酸脱氨酶突变体的序列为SEQ ID NO.5。利用热稳定的苏氨酸脱氨酶，避免使用甲酸铵引入铵离子，利用热稳定的醇脱氢酶循环辅酶再生，优势在于整个体系不引入无机盐，适用于较高温度下催化L苏氨酸生成2‑丁酮酸再生成L‑2‑氨基丁酸，因此更适合于工业化应用。
本发明公开了一种用于阿扎那韦中间体生产的醇脱氢酶，属于医药生物技术领域，该醇脱氢酶与SEQ ID NO.8的野生型醇脱氢酶相比表现出更强的催化活性，醇脱氢酶可以通过使编码该酶的体外重组、多核苷酸诱变、DNA改组、易错PCR和定向进化方法等获得，上述醇脱氢酶，具有选自以下特征中的一个或多个突变：T37A、D38E、P41K、D44N、V45K。本发明反应条件温和，对设备要求低，生产过程无需高温或者冷却，能耗低，由于酶催化具有高效，专一的选择性，故以此法生产阿扎那韦的关键中间体无副产物产生，纯化方便；此外反应溶剂主要为水，三废排放低，绿色环保。
