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[发明专利] 一种生产米黑根毛霉脂肪酶酶粉的工程菌株及其应用 -CN201811092263.4 有效
发明人：
黄金金 ;黄蓉 ;马艳 ;郑维发
- 专利权人：
江苏师范大学
申请日：
2018-09-19
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公布日：
2022-06-03
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主分类号：
C12N15/81 文献下载
摘要： 一种生产米黑根毛霉脂肪酶酶粉的工程菌株的构建方法，将含前导肽的脂肪酶基因pro‑rml插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZα+Mα上构建得到含2拷贝目的基因的表达载体pPICZα+Mα‑2prorml。将含有2拷贝的目的基因的表达载体分别转到巴斯德毕赤酵母中并筛选获得含4拷贝数目的基因的能够表达Pro‑RML的基因工程菌mα‑4pRML‑X33。一种制备米黑根毛霉脂肪酶酶粉的方法，采用过表达转录调控因子HAC1的4拷贝脂肪酶基因的毕赤酵母菌株进行发酵，酶活达到1078U/mL。将该菌株产生的发酵液用丙酮制备酶粉。当发酵液pH调整到4.0，丙酮和发酵液的体积比为2:1，40mL发酵液获得酶粉的重量为1.0116g，酶粉的比活为7936.5U/g，酶粉的回收率为37.935％。为该酶的储存、运输和使用提供新的方式。一种 生产 根毛 脂肪酶 工程 菌株 及其 应用
[发明专利] 融合酶的制备方法及融合酶 -CN202210081967.1 在审
发明人：
高静 ;李彦洁 ;姜艳军 ;周丽亚
- 专利权人：
河北工业大学
申请日：
2022-01-24
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公布日：
2022-05-13
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主分类号：
C12N15/81 文献下载
摘要： 本发明提供了一种融合酶的制备方法及融合酶，本发明的融合酶的制备方法首先构建融合酶质粒，之后提取融合酶质粒，并将其转入到毕赤酵母中，进行发酵表达；再利用毕赤酵母制备粗酶液，并进行融合酶的分离纯化。在非特异性过氧化酶(UPO)的突变体JaWa、SoLo、WamPa的C端融合6×His‑SUMO标签，以及融合酶在毕赤酵母中的诱导表达及其后期的分离纯化，JaWa可去除酶的过氧化活性，WamPa本身在有机溶剂中具有良好的稳定性，而SUMO标签能可有效提高酶的表达量，使之高效的催化反应。此外，将JaWa、SoLo、WamPa融合6×His‑SUMO标签后能够利用组氨酸与金属离子Ni2+ 的螯合作用进行分离纯化，分离纯化后的酶催化活性大大提高。融合 制备 方法
