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[发明专利]重组微生物的构建方法、相关生物材料及其应用-CN202110470691.1在审
发明人：张学礼;戴住波;石玉松;王冬 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-04-28 - 公布日： 2022-10-28 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了重组酿酒酵母的构建方法、相关生物材料及其应用。该构建方法包括将重组融合蛋白的编码基因导入出发微生物，得到重组微生物；所述重组融合蛋白含有Pln1蛋白和萜合成相关蛋白。该构建方法通过Pln1蛋白对三萜生物合成路径中的部分关键酶进行重新定位，以促使酶从空间上接近底物，促进储存在脂滴中的天然产物脂溶性中间体的转化。
重组微生物构建方法相关生物材料及其应用

[发明专利]在重组宿主中产生甜菊醇糖苷-CN201680071933.7有效
发明人：简·丹诺·迪埃凯;延斯·霍顿-拉森;韦罗尼克·杜尚 -专利权人：埃沃尔瓦公司
申请日： 2016-12-09 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及用于产生甜菊醇糖苷和甜菊醇糖苷前体的重组微生物和方法。
重组宿主产生甜菊醇糖苷

[发明专利]一种毕赤酵母菌株及其在甘露聚糖酶生产中的应用-CN202210918755.4在审
发明人：康丽华;鲍锴;程斯达;张静静;刘文瑶;葛菁华 -专利权人：青岛蔚蓝生物集团有限公司
申请日： 2022-08-02 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种毕赤酵母菌株及其在甘露聚糖酶生产中的应用。申请人首先将来源于棒曲霉（Aspergillus clavatus）的甘露聚糖酶基因在毕赤酵母宿主中过表达，然后进一步通过紫外诱变方法筛选获得甘露聚糖酶产量显著提高的突变菌毕赤酵母BG‑18（Pichia pastoris BG‑18），其保藏编号为CCTCC NO：M 20221137。该突变菌可以作为甘露聚糖酶的生产菌种，能大大降低该酶的生产成本，促进其广泛应用。
一种酵母菌株及其甘露聚糖生产中的应用

[发明专利]用于谷胱甘肽生物合成的重组质粒的构建方法-CN202110153381.7有效
发明人：赵剑锋;伍虹蓉;高融 -专利权人：南华大学
申请日： 2021-02-04 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：用于谷胱甘肽生物合成的重组质粒的构建方法，涉及生物工程技术领域，通过上述方法构建的重组质粒为酿酒酵母双基因共表达质粒，通过过表达丝氨酸O‑乙酰转移酶（SATase），向酿酒酵母细胞内引入半胱氨酸的OAS合成代谢途径，能够促进酿酒酵母内源性半胱氨酸的合成，联合过表达γ‑谷氨酰半胱氨酸合成酶（GSH I），能够提高酿酒酵母谷胱甘肽合成能力，并且在有效提高酿酒酵母谷胱甘肽产量的同时，还能够加快酿酒酵母对数生长期的生长速度。
用于谷胱甘肽生物合成重组质粒构建方法

[发明专利]一种具有启动、终止双功能调控元件的构建方法、双功能元件库和应用-CN202110211960.2有效
发明人：张根林;刘政洋;倪晓霞;张燕 -专利权人：石河子大学
申请日： 2021-02-25 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明提供了一种具有启动、终止双功能调控元件的构建方法、双功能元件库和应用，涉及合成生物学技术领域。所述构建方法包括：将启动序列和终止序列按照先终止后启动的原则进行组装；所述启动序列包括上游活性序列和核心启动子序列，所述上游活性序列包括Mig1/Mig2结合位点、Rap1结合位点、Gcr1结合位点、weakMig1结合位点、GC框、CAAT框和八聚体框；所述核心启动子序列包括TATA框、BRE元件、MTE元件和Inr元件；所述终止序列包括效率元件、位置元件和polyA。采用本发明提供的具有启动、终止双功能调控元件应用到途径构建中，简化了构建过程，途径组装效率相比于现有技术提高了约18％。
一种具有启动终止功能调控元件构建方法元件库应用

[发明专利]一种用于毕赤酵母表达宿主的多基因敲入方法-CN201910403132.1有效
发明人：蔡孟浩;刘启;师晓娜;张元兴 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2019-05-15 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于毕赤酵母表达宿主的多基因敲入方法。针对毕赤酵母缺乏高效的靶向性敲入技术的问题，本发明提供了合适的gRNA靶点。应用本发明的方法进行基因组改造后的毕赤酵母，其生长代谢不受影响。所述方法能够高效地实现多个基因的快速敲入，且可以进行筛选标记的回收，为毕赤酵母异源合成天然产物提供强有力的工具。
一种用于酵母表达宿主多基因方法

[发明专利]一种酵母优化的工艺制备方法-CN202210793497.1在审
发明人：朱也;陈彦羽 -专利权人：南京瑞源生物技术有限公司
申请日： 2022-07-05 - 公布日： 2022-10-04 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种酵母优化的工艺制备方法，包括，构建载体：对目的基因信号肽预测，去除信号肽序列，根据毕赤酵母表达系统进行密码子优化，基因合成至pPICZαA；目的基因信号肽预测采用SignalP 4.0和SignalP5.1预测；在对毕赤酵母表达系统进行密码子优化时，避开SacI酶切位点；当基因合成至pPICZαA时，目的基因紧挨着载体α‑factor，C端带上6×His；本发明通过酵母表达克服大肠杆菌表达系统的不足，能繁殖快，高密度发酵，可以对蛋白质进行翻译后的修饰和加工。其次，目的蛋白分泌到培养基中，后续纯化过程大大简便。最后，适合真核生物的蛋白表达，人表皮生长因子为真核蛋白，酵母表达能提高产量，降低成本。
一种酵母优化工艺制备方法

[发明专利]一种毕赤酵母突变菌株及其在海藻酸裂解酶生产中的应用-CN202210888125.7在审
发明人：程斯达;鲍锴;王华明;康丽华;张静静 -专利权人：青岛蔚蓝生物集团有限公司
申请日： 2022-07-27 - 公布日： 2022-10-04 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种毕赤酵母突变菌株及其在海藻酸裂解酶生产中的应用。所述突变菌株为毕赤酵母NJU‑12（Pichia pastoris NJU‑12），已于2022年5月30日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2022758。所述突变菌能大幅度提高海藻酸裂解酶的表达量，其摇瓶发酵上清液中海藻酸裂解酶酶活高达3006 U/ml，比出发菌提高了57%，有利于降低该酶的生产成本，促进其在工业领域中的广泛应用。
一种酵母突变菌株及其海藻裂解生产中的应用

[发明专利]一种重组载体、转化体及其在五环三萜类化合物糖基化修饰中的应用-CN202210663948.X在审
发明人：冯旭东;郭芳;李春;刘护 -专利权人：北京理工大学
申请日： 2022-06-14 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组载体、转化体及其在五环三萜类化合物糖基化修饰中的应用，具体地，本发明的毕赤酵母重组载体和/或其转化体和/或重组载体组合物和/或转化体组合物和/或细胞表面共展示糖基转移酶和蔗糖合酶的重组毕赤酵母，用于五环三萜类化合物的糖基化修饰，具有重复利用率高，催化效率高，反应条件温和，高效，绿色安全等优点。
一种重组载体转化及其三萜类化合物糖基化修饰中的应用

[发明专利]一种生产柠檬烯的解脂耶氏酵母工程菌及应用-CN202011129990.0有效
发明人：于爱群;李建;苗琳;荣兰新;赵禹;李圣龙;张翠英;肖冬光 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2020-10-21 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种生产柠檬烯的解脂耶氏酵母工程菌及其构建与应用。本发明首先提供一种基因在柠檬烯生产中的应用，所述基因具体为YALI0F19492p，Genbank编号为2907674，所述YALI0F19492p基因对柠檬烯的生产具有显著的调控作用。本发明提供一种生产柠檬烯的解脂耶氏酵母基因工程菌，所述菌株是在解脂耶氏酵母宿主细胞中过表达YALI0F19492p基因并表达柠檬烯合酶所得，发酵生产柠檬烯产量提高8倍左右，提高产量的同时为柠檬烯生产菌株的研究提供思路。
一种生产柠檬解脂耶氏酵母工程应用

[发明专利]一种提高解脂耶氏酵母油脂产量的方法-CN201910747616.8有效
发明人：王士安;李家欣;李福利 -专利权人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所
申请日： 2019-08-14 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种提高解脂耶氏酵母油脂产量的方法。以解脂耶氏酵母菌株为出发菌株采用同源重组或CRISPR‑Cas9基因编辑方式，敲除其CAG79599.1编码基因YAIL0_E16060g，获得提高解脂耶氏酵母油脂产量的重组菌株。本发明重组菌株油脂产量和细胞的油脂含量都比对照菌株提高24％以上。本发明所提供的方法可用于构建高产油酵母，在可再生能源、化工、医药保健等领域具有广泛的应用前景。
一种提高解脂耶氏酵母油脂产量方法

[发明专利]一种产地黄源红景天苷酵母工程菌的构建及应用-CN202210142171.2有效
发明人：杨艳会;杨大帅;陈佳怡;董柯炜;吴梦杰;谭曦;王驰;李瑞芳;伊艳杰;张长付 -专利权人：河南工业大学
申请日： 2022-02-16 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种产地黄源红景天苷酵母工程菌的构建及应用，属于合成生物学技术领域。产地黄源红景天苷酵母工程菌，以酵母BY4741为原始菌株，表达SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示基因。以酪氨酸为底物，利用该工程菌进行发酵，可实现地黄源红景天苷的高效异源合成，且发酵产物易于分离纯化。
一种地黄红景天酵母工程构建应用

[发明专利]一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母及其构建方法与应用-CN202210743085.7在审
发明人：曾斌;黄慧 -专利权人：深圳技术大学
申请日： 2022-06-28 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母及其构建方法与应用，其中，构建方法包括步骤：获取米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因的克隆片段，所述米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因记为AoErg10D基因，所述AoErg10D基因的核苷酸序列为SEQ NO.1；将所述克隆片段连接到载体pYes2.0上，得到AoErg10D表达载体；将所述AoErg10D表达载体转化至酿酒酵母ScPot1基因突变体Y02319中，构建转基因菌株AoErg10D‑Y02319，即得到所述可降解油酸的基因改造酿酒酵母。本发明构建得到的基因改造酿酒酵母AoErg10D‑Y02319能够在以油酸为唯一碳源的培养基生长良好，且油酸利用率高，因此可将该因改造酿酒酵母AoErg10D‑Y02319用来降解油酸。
一种降解油酸基因改造酿酒酵母及其构建方法应用

[发明专利]一种调控/降低乙酰辅酶A支路代谢高效合成7-脱氢胆固醇的方法-CN202210488049.0在审
发明人：范超;刘龙;吴文忠;陈坚;吕雪芹;修翔;齐佳琨;洪皓 -专利权人：大连医诺生物股份有限公司
申请日： 2022-05-06 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种调控/降低乙酰辅酶A支路代谢高效合成7‑脱氢胆固醇的方法，其利用一类有关乙酰辅酶A分解代谢的关键基因降低乙酰辅酶A分解，同时平衡细胞内还原力，进而高效合成7‑脱氢胆固醇的方法。该方法克服了传统的只通过增强乙酰辅酶A用于提升7‑脱氢胆固醇的技术，而是提供有关7‑脱氢胆固醇合成相关的基因，并通过对这些基因的过表达和敲除，进而增强乙酰辅酶A的合成，同时降低乙酰辅酶A消耗，实施例证明其最终7‑DHC的产量达到269mg/L；比SC001的7‑DHC产量提高了25倍；达到增强7‑脱氢胆固醇在微生物中合成的目的。
一种调控降低乙酰辅酶支路代谢高效合成脱氢胆固醇方法

[发明专利]一种基于毕赤酵母GS115培养的酵母外泌蛋白表达方法-CN202210825199.6在审
发明人：朱也 -专利权人：南京瑞源生物技术有限公司
申请日： 2022-07-13 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及蛋白表达技术领域，具体为一种基于毕赤酵母GS115培养的酵母外泌蛋白表达方法，该方法包含有菌株的保存与培养、试剂的配置，方法包含有蛋白质可行性分析构建载体、目的基因的克隆与重组质粒、大肠杆菌感受态的制备转化、毕赤酵母电转感受态的制备转化、蛋白鉴定。该基于毕赤酵母GS115培养的酵母外泌蛋白表达方法，蛋白质可行性分析先构建载体，然后目的基因的克隆与重组质粒，在这一过程中进行大肠杆菌感受态的制备、大肠杆菌感受态的转化、毕赤酵母电转感受态的制备与毕赤酵母感受态电击转化，制备结束过后进行蛋白表达与鉴定、最终进行蛋白表达鉴定，从而得出蛋白可以表达，该种方式进一步加深了人们对于酵母外泌蛋白表达领域的研究。
一种基于酵母 gs115 培养蛋白表达方法