本发明公开了一种适用于拟茎点霉FS508的过表达载体及其构建方法和应用。本发明在拟茎点霉FS508中过表达GPAT基因,所述的GPAT基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次构建了适用于深海真菌拟茎点霉FS508的次级代谢产物生物合成基因的过表达载体,为促进lithocarpins在抗肿瘤先导化合物的应用及其他丝状真菌次级代谢生物合成基因的过表达及活性次级代谢产物生物合成效率的提升奠定了可靠的分子生物学基础。
本发明公开了抗胶霉毒素自我保护基因GliK在协助宿主细胞抵抗胶霉毒素中的应用。抗胶霉毒素自我保护基因GliK,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。因此本发明从深海真菌FS140的cDNA文库中获得了抗胶霉毒素自我保护基因GliK序列,并成功导入到酿酒酵母S.cerevisiae BJ5464中进行了抗毒功能验证,从而为后期提高酿酒酵母抗胶霉毒素的能力,提升胶霉毒素的异源表达水平并获得新型胶霉毒素奠定分子生物学基础。
本发明公开了基因GNATB作为筛选标记基因在抗性筛选中的应用及其应用。基因GNATB的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的新型筛选标记基因GNATB能够高效协助酿酒酵母抵抗放线菌酮,从而为后期在酿酒酵母重构放线菌酮的生物合成通路和解析筛选标记基因GNATB与放线菌酮的作用机制奠定基础,提升放线菌酮的异源表达水平并获得新型放线菌酮奠定分子生物学基础。此外,乙酰转移酶基因GNATB可开发成一种高效表达且高抗的筛选标记基因,用来筛选和维持培养成功转染放线菌酮抗性基因的真核细胞,应用于分子生物学、微生物学和医药等领域。