[发明专利]具有酪氨酸酶抑制活性的小分子肽及其应用

说明书

本发明公开了一种小分子肽，其氨基酸序列为IIPFIF，如SEQ ID NO.2所示。所述小分子肽在制备具有酪氨酸酶抑制功效的药物或保健品中的应用。一种具有酪氨酸酶抑制活性的药物或保健品，其有效成分为该小分子肽。本发明还提供了一种具有酪氨酸酶抑制活性的蜂王浆多肽，是利用酸性蛋白酶酶解蜂王浆得到的。本发明通过实验研究，筛选得到了对酪氨酸酶具有高抑制活性的小分子肽，具有作为抑制黑色素水平功能性产品的潜力。

技术领域

本发明涉及具有酪氨酸酶抑制活性的小分子肽及其应用，属于酶解加工产品技术领域。

背景技术

蜂王浆是年轻工蜂下咽和下颌腺分泌物，由水、蛋白质、碳水化合物、脂质、矿物质和维生素组成，具有很高的营养价值，广泛应用于食品、生物和医疗等领域，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤、增强机体免疫等多种生理功能。但是其加工利用程度很低，经济附加值低。

生物活性肽是蛋白质在水解、裂解或成熟过程中产生的功能性肽片段，其相对分子质量通常小于6000Da。常见的生物活性肽有大豆肽、谷胱甘肽、酪蛋白磷酸肽等，酶生物技术是一种适用于生产生物活性肽的高效方案，已被广泛应用于生物活性肽的生产。

酪氨酸酶是黑色素合成的限速酶，对于黑色素的合成至关重要，抑制酪氨酸酶的活性可以有效减少黑色素的含量。目前常见的酪氨酸酶抑制剂存在热不稳定性和潜在的毒副作用等诸多不足，对其使用造成了极大限制。近年来，人们更趋向于从天然物质中分离提取出新的酪氨酸酶抑制剂，例如玫瑰、苦参等，研究表明这些植物提取物具有很强的酪氨酸酶抑制活性。目前尚未有从蜂王浆中提取酪氨酸酶抑制活性物质的报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明对蜂王浆进行酶解研究，发现了具有很强的酪氨酸酶抑制活性的小分子肽。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种小分子肽，命名为TIP-II(Tyrosinase inhibitory peptide)，其氨基酸序列为IIPFIF，如SEQ ID NO.2所示。

经实验证明，上述小分子肽具有良好的酪氨酸酶抑制活性，具有作为抑制黑色素形成的功能性产品的潜力，因此，可用于制备具有酪氨酸酶抑制功效的药物或保健品。

具有酪氨酸酶抑制活性的药物或保健品，其有效成分为上述小分子肽。

本发明还提供了具有酪氨酸酶抑制活性的蜂王浆多肽，通过以下方法制备得到：

(1)将蜂王浆与水混合，制成料液比为1:3～11(g:mL)的底物液，调节初始PH值为2～6(用氢氧化钠溶液或盐酸调节)，按加酶量2000～10000U/g(酶活/蜂王浆)加入酸性蛋白酶，于30～70℃下反应2～6h，得酶解液；

(2)酶解液通过G-15葡聚糖凝胶层析柱分离洗脱，流动相为超纯水，洗脱速度为3.5mL/min，共出现5个洗脱峰，收集D1～D4中的任意一种或两种以上的洗脱液，冻干，即得蜂王浆多肽。

优选的，所述步骤(1)中，料液比为1:4。

优选的，所述步骤(1)中，初始PH值为4.0。

优选的，所述步骤(1)中，加酶量为10000U/g。

优选的，所述步骤(1)中，酶解温度为55℃。

优选的，所述步骤(1)中，酶解时间为4h。

优选的，所述步骤(2)中，G-15葡聚糖凝胶层析柱的规格为16mm×70cm。

优选的，所述步骤(2)中，收集洗脱峰D4的洗脱液，冻干，得组分D4；经分离富集后的组分D4的酪氨酸酶抑制率较原酶解液和其它组分有显著提高。