本发明公开了磷脂酶D‑PKV‑S109L及其应用，属于酶的基因工程技术领域。所述磷脂酶D‑PKV‑S109L的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。所述磷脂酶D‑PKV‑S109L在制备磷脂酰肌醇中的应用。本发明还公开了一种制备磷脂酰肌醇的方法：以磷脂和肌醇为底物，在磷脂酶D‑PKV‑S109L的作用下，生成磷脂酰肌醇。本发明通过改变DNA序列中的碱基来实现某些氨基酸的替换，从而获得了底物特异性更强的磷脂酶D‑PKV‑S109L，可用于高效制备磷脂酰肌醇。本发明的制备磷脂酰肌醇的方法，磷脂酰肌醇的产率可达57.04%，相比于磷脂酶D‑PKV，产率提升了22.64%。
本发明公开了壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49P及其应用，属于壳聚糖酶技术领域。所述壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49P的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。所述壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49P在制备壳寡糖中的应用，所述壳寡糖的聚合度为2～5。本发明的壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49P具有产物特异性，降解壳聚糖可得到高聚合度的壳寡糖。本发明拓宽了GH 46家族的壳聚糖酶酶解壳聚糖的产物谱，可用于制备高聚合度的壳寡糖。
本发明公开了壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I及其应用和制备壳寡糖的方法，属于壳聚糖酶技术领域。所述壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。所述壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I在制备壳寡糖中的应用，所述壳寡糖的聚合度为2～5。所述制备壳寡糖的方法，以壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I降解壳聚糖得到壳寡糖，壳寡糖的聚合度为2～5。本发明的壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I具有产物特异性，降解壳聚糖可得到高聚合度的壳寡糖。本发明拓宽了GH 46家族的壳聚糖酶酶解壳聚糖的产物谱，可用于制备高聚合度的壳寡糖，应用潜力巨大，应用前景广阔。
本发明公开了一种小分子肽及在抑制黄嘌呤氧化酶中的应用，属于酶解加工产品技术领域。所述小分子肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述小分子肽在制备抑制黄嘌呤氧化酶的药物中的应用，在制备具有抑制尿酸水平功效的药物中的应用。本发明通过实验研究筛选得到了对黄嘌呤氧化酶具有高抑制活性的小分子肽。本发明对高尿酸血症的治疗具有重要意义。
本发明公开了N‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯，其结构式如式Ⅰ所示，所述R1、R2独立地为脂肪酸形成的酰基；所述脂肪酸选自短链脂肪酸、中链脂肪酸或长链脂肪酸。制备时，先利用N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶的逆水解活性催化甘油和N‑乙酰氨基葡萄糖合成糖基甘油，再利用脂肪酶催化糖基甘油与不同的酰基供体酰化，合成N‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯。本发明还提供了N‑乙酰氨基葡萄糖基甘油，N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶SbNag2550，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明首次合成了N‑乙酰氨基葡萄糖基甘油及其糖基甘油酯，丰富了糖基甘油酯产品的种类，该化合物有望应用于医药、食品等领域，作为药物或膳食补充剂。
本发明公开了一种脂肪酶OUC‑Lipase17，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述脂肪酶OUC‑Lipase17在水解虾青素酯或制备游离虾青素中的应用。本发明还公开了一种水解虾青素酯或制备游离虾青素的方法：利用脂肪酶OUC‑Lipase17水解虾青素酯，得到游离虾青素。本发明还公开了包含有脂肪酶OUC‑Lipase17的编码基因的重组表达载体和重组工程菌。本发明的脂肪酶OUC‑Lipase17，属于脂类水解酶第Ⅱ家族，可快速水解虾青素酯得到游离虾青素，该脂肪酶具有水解虾青素酯制备游离虾青素的应用潜力。
本发明公开了一种蜂王浆多肽，其制备方法为：(1)取蜂王浆，加水制成蜂王浆溶液，加入酸性蛋白酶，在30～70℃条件下反应3～8小时，得酶解液；(2)酶解液通过G‑15葡聚糖凝胶层析柱分离洗脱，共出现5个洗脱峰，收集F1～F5中的任意一种或两种以上的洗脱液，冻干，即得蜂王浆多肽。本发明还公开了若干条小分子肽，氨基酸序列如如SEQ ID NO.1、2、3所示。所述蜂王浆多肽、小分子肽均具有作为抑制氧化应激的功能性产品的潜力，可用于制备具有抗氧化活性功效的药物或保健品，制备具有抑制氧化应激功效的药物或保健品。
本发明公开了一种裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A在裂解甲壳素中的应用，裂解甲壳素可得到聚合度4～10的几丁质醛酸。本发明还公开了裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A在制备N‑乙酰化壳二糖中的应用，具体应用时，协同甲壳素酶SmChi B处理甲壳素，制备得到N‑乙酰化壳二糖。本发明还公开了一种降解甲壳素或制备N‑乙酰化壳二糖的方法。本发明的裂解性多糖单加氧酶EbLPMO10A具有优良的酶学性质和高效解聚β‑甲壳素活性，在酶法预处理甲壳素和制备甲壳寡糖中具有重要的工业应用价值及经济价值。
本发明公开了小分子肽及其在制备抑制黄嘌呤氧化酶的药物中的应用，属于活性肽技术领域。所述小分子肽有5种，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2、3、4、5、6所示；这5种小分子肽在制备抑制黄嘌呤氧化酶的药物中的应用，在制备具有抑制尿酸水平功效的药物中的应用。本发明的5种小分子肽均对黄嘌呤氧化酶具有抑制活性，尤其是WGWGW，其IC50值为1.86±0.024 mmol/l，因此，这5种小分子肽均具有作为抑制尿酸水平的功能性产品的潜力。
本发明公开了一种制备壳寡糖的方法：（1）取壳聚糖，在2.0～2.5 MPa的蒸汽压力下爆破4分钟后快速降压，得到预处理的壳聚糖；（2）向浓度为2%～10%的预处理的壳聚糖溶液中加入SEQ ID NO.1所示的壳聚糖酶CsnBUT，在50～58℃条件下孵育20～80小时，得到降解产物，降解产物中包括壳二糖、壳三糖和壳四糖，以壳三糖为主。本发明的壳寡糖的制备方法，可高效地降解壳聚糖，过程中不使用酸，绿色无污染；制备得到的壳寡糖中壳三糖的纯度高，可大大减少寡糖精制过程后期产品分离纯化的耗时和操作成本。本发明的方法可一步制备生产具有理想DP的COS，具有巨大的经济效益。
