[发明专利]淀粉蔗糖酶SaAS及其编码基因和应用

说明书

本发明公开了淀粉蔗糖酶SaAS及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质，来源于盐螺旋菌JH(Salinispirillum sp.JH)，是一种淀粉蔗糖酶，命名为SaAS蛋白，是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。本发明还保护SaAS蛋白作为淀粉蔗糖酶的应用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉淀粉蔗糖酶SaAS及其编码基因和应用。

背景技术

淀粉蔗糖酶(Amylosucrase，AS，EC 2.4.1.4)属于糖苷水解酶家族中的葡糖基转移酶。它以蔗糖为底物，能够催化α-D-葡糖从蔗糖转移到α-葡聚糖链的非还原端，同时伴随着D-果糖的释放，导致不溶性直链淀粉类α-葡聚糖的产生。与其他参与α-(1，4)葡聚糖合成的酶不同，淀粉蔗糖酶不需要任何昂贵的核苷酸激活糖，如ADP-或UDP-葡萄糖作为葡萄糖供体，因此被认为是工业合成和修饰淀粉多糖的一种有吸引力的生物催化剂。

另外，随着人们生活水平的提高，不合理的饮食导致许多慢性疾病如肥胖、糖尿病等大幅度上升，因此选择合适的饮食至关重要。淀粉是人类能量的重要来源之一，人类在摄入淀粉之后，淀粉会发生一系列的水解反应而生成葡萄糖，进而影响到人类血液葡萄糖水平和健康，通过淀粉蔗糖酶的转糖基反应可以有效提高淀粉中SDS和RS的含量，进而起到控制高血糖和心血管疾病的作用，因此获取一种具有高转糖基活性的淀粉蔗糖酶引起了越来越广泛的关注。本发明提供了新颖来源的淀粉蔗糖酶SaAS及其编码基因和应用。

发明内容

本发明的目的是提供淀粉蔗糖酶SaAS及其编码基因和应用。

本发明提供的蛋白质，来源于盐螺旋菌JH(Salinispirillum sp.JH)，是一种淀粉蔗糖酶，命名为SaAS蛋白，氨基酸序列如序列表中序列1所示。由于氨基酸序列的特殊性，任何含有序列表中序列1所示氨基酸序列的肽蛋白的片段或其突变体，只要其与前述氨基酸序列具有99％以上同源性，且具有淀粉蔗糖酶功能，均属于本发明保护范围。具体的，所述改变包括氨基酸序列中一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加和/或替换。

SaAS蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围。

优选的，所述基因的碱基序列如序列表中序列2所示，该基因序列来源于盐螺旋菌JH(Salinispirillum sp.JH)，由1968个碱基组成。由于核苷酸序列的特殊性，任何序列表中序列2所示多核苷酸的变体，只要其与该多核苷酸具有90％以上同源性，均属于本发明保护范围之列。所述多核苷酸的变体是指一种具有一个或多个核苷酸改变的多核苷酸序列。此多核苷酸的变体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。

含有所述基因的重组表达载体、表达盒或重组微生物均属于本发明的保护范围。

本发明还保护SaAS蛋白作为淀粉蔗糖酶的应用。应用SaAS蛋白作为淀粉蔗糖酶时，采用的温度为20-60℃，采用的pH为3-11。应用SaAS蛋白作为淀粉蔗糖酶时，采用的温度为40℃，采用的pH为8。

本发明提供的淀粉蔗糖酶SaCA具有较高的酶活力，且反应温度宽泛，反应pH宽泛。

盐螺旋菌JH(Salinispirillum sp.JH)已于2020年7月29日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址：中国，武汉，武汉大学；邮编：430072)，保藏编号为CCTCC NO:M 2020375。

附图说明

图1为菌株JH的照片。

图2为菌株JH的系统发生树。

图3为SaAS蛋白溶液的电泳图。

图4为检测最适pH时的相对酶活结果。

图5为检测最适反应温度时的相对酶活结果。

具体实施方式