[发明专利]PCSK2在制备用于胰腺神经内分泌肿瘤检测和治疗的产品中的应用

说明书

本发明公开了胰腺神经内分泌肿瘤分子标记物PCSK2在制备用于胰腺神经内分泌肿瘤检测和治疗的产品中的应用，本发明人发现PCSK2在胰腺神经内分泌肿瘤组织或胰腺神经内分泌肿瘤细胞中的表达下调。本发明还公开了用于胰腺神经内分泌肿瘤检测或预后的试剂盒，所述试剂盒包括特异性扩增PCSK2的引物序列。利用本发明的试剂盒进行胰腺神经内分泌肿瘤的辅助诊断和预后评估，对后续临床治疗具有指导意义。另外，将PCSK2用来制备治疗胰腺神经内分泌肿瘤的药物组合物也可用于胰腺神经内分泌肿瘤的基因治疗、药物治疗等临床应用。

技术领域

本发明涉及肿瘤分子生物学技术领域，具体涉及PCSK2在制备用于胰腺神经内分泌肿瘤检测和治疗的产品中的应用。

背景技术

神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasms，NEN)起源于多潜能神经内分泌干细胞，其具有神经内分泌标记物、能够产生生物活性胺和/或多肽激素，并具有显著异质性。过去30年间，NEN患病率从1.09/10万上升至5.25/10万。相比其他肿瘤，NEN的增加更为迅速，这可能与诊断技术进步、肿瘤筛查更加频繁以及环境因素等有关。

胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine tumors，PNET)约占所有神经内分泌肿瘤的1/3，在胰腺肿瘤中所占百分率约为2％～5％。PNET尽管少见，但往往因有激素分泌而作用于全身多系统，严重影响病人的健康和生活质量，且较易发生肝转移，常因肝功能衰竭而死亡。随着影像学技术的进步，检出率亦呈现升高趋势。由于临床表现、病理特征、恶性程度及预后差异较大，目前临床上对PNET的认识尚不充分，易误诊和漏诊。

对于各种PNET，2017版内分泌肿瘤WHO分类分为：①分化型PNET(胰腺神经内分泌肿瘤)，又分为G1、G2和G3三个级别；②未分化型PNEC(胰腺神经内分泌癌)，又分为小细胞型和大细胞型，属于高度恶性；③混合型神经内分泌-非神经内分泌肿瘤。从临床表现方面看，PNET可分为功能性和非功能性两类，功能性可产生典型的临床症状，最常见的有胰岛素瘤和胃泌素瘤。非功能性近年明显升高，它们仅分泌多肽片段，较少或不分泌激素，不产生临床内分泌异常征象。功能性PNET因早期即可产生症状而获得及时治疗；非功能性者则常延误诊断，肿瘤常生长很大，产生局部侵袭或远处转移。

目前PNET的治疗以外科手术为主，适用于肿瘤比较局限的患者，但预后差异较大。药物治疗可应用生长抑素类似物如奥曲肽和善的定，能部分缓解症状。分子靶向药物舒尼替尼已被批准用于PNET的治疗，但临床观察显示，舒尼替尼治疗PNET，在短暂获益后，肿瘤侵袭能力显著增强，更易发生转移。抗血管生成及抗生长因子的靶向药物治疗是新近尝试的治疗方法，但疗效有待确定。通过寻找PNET相关基因并研究它们在PNET组织或细胞中的表现，是探索进行基因治疗及相关药物治疗的方向。

人PCSK2(前蛋白转化酶枯草溶菌素2)基因具有NCBI数据库的基因ID:5126，其位于染色体20的NC_000020.11位置，人PCSK2的参考包括NCBI(GenBank)参考序列转录变体1(NM_002594.5)及其编码的较长蛋白同种型1(NP_002585.2)；NCBI参考序列转录变体2(NM_001201529.2)及其编码的较短蛋白同种型2(NP_001188458.1)；以及NCBI参考序列转录变体3(NM_001201528.1)及其编码的具有较短N末端的较短蛋白同种型3(NP_001188457.1)。该基因编码枯草杆菌蛋白酶样前蛋白转化酶家族的成员，其包括通过调节型或组成型分泌途径来加工蛋白和肽前体的蛋白酶。该蛋白经历最初的自催化加工事件并与内质网中的神经内分泌分泌蛋白相互作用，离开内质网并分选成分泌颗粒，其在细胞内转运过程中被切割和催化活化。该编码的蛋白酶被包装到密集的核心分泌颗粒中并在其中活化，并在神经内分泌系统和脑中表达。该基因编码7种碱性氨基酸特异性成员中的一种，其在单个或成对的碱性残基上切割其底物。它在多肽激素和神经肽前体的蛋白水解活化中起作用。该基因中的单核苷酸多态性可能增加对心肌梗塞和2型糖尿病的易感性。该基因也可能在肿瘤发生和进展中起作用。已经观察到该基因的编码多种同种型的替代性剪接转录物变体。