本发明提供一种曲霉菌的引物探针组合及应用、PCR反应液,所述曲霉菌的引物探针组合用于检测四种曲霉菌,包括第一引物探针组合和第二引物探针组合,核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑12所示。第一引物探针组合包括针对烟曲霉菌的第一上游引物、第一下游引物和第一探针,以及针对土曲霉菌的第二上游引物、第二下游引物和第二探针;第二引物探针组合包括针对黄曲霉菌的第三上游引物、第三下游引物和第三探针,以及针对黑曲霉菌的第四上游引物、第四下游引物和第四探针。本发明提供的曲霉菌的引物探针组合针对四种曲霉菌菌种内保守区域,设计并筛选得到进行特异性扩增的引物和探针,减小了不同引物之间的相互作用,提高了扩增的特异性和灵敏度。
本发明涉及一种环状RNA circ‑ERBB2及其检测试剂与应用,属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示,所述环状RNA circ‑ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生;本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测引物如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示;本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测探针如SEQ ID NO:4所示,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑ERBB2,并以该环状RNA circ‑ERBB2作为分子标志物诊断乳腺癌;本发明还设计针对环状RNA circ‑ERBB2分子的荧光定量检测引物及taqman探针,通过该探针和引物申请人在多个乳腺癌细胞及正常乳腺细胞中检测到了circ‑ERBB2分子的表达情况。
本发明公开了一种人白血病FLT3基因内部串联重复突变检测的引物探针组合、试剂盒及应用。引物探针组合中,引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;探针序列如SEQ ID NO.3所示。试剂盒为微滴式数字PCR检测试剂盒,包含FLT3基因的引物探针组合和内参基因RPP30的引物探针组成的检测混合液、反应预混液、阴性质控品、空白对照。本发明的引物探针组合及试剂盒用于检测人白血病FLT3基因内部串联重复突变,具有检测过程简单高效、绝对定量、灵敏度和准确性高等优点,对于携带FLT3‑ITD突变的AML患者持续监控治疗效果、指导用药和预测疾病进展具有潜在的应用价值。
本发明涉及一种环状RNA circ‑GPC3及其检测试剂与应用,属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑GPC3对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示,所述环状RNA circ‑GPC3由GPC3母基因的第3个独立外显子反向拼接环化产生;本发明环状RNA circ‑GPC3的检测引物如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示;本发明环状RNA circ‑GPC3的检测探针如SEQ ID NO:4所示,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑GPC3,并以该环状RNA circ‑GPC3作为分子标志物诊断肝癌。本发明还设计针对环状RNA circ‑GPC3分子的荧光定量检测引物及taqman探针,该探针和引物能很好的检测生物体内的circ‑GPC3表达情况,可以为肝癌的诊断提供一种基于环状RNA检测的方案。
本发明提供一种念珠菌的引物探针组合,用于检测四种念珠菌,包括第一引物探针组合和第二引物探针组合,核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑12所示。第一引物探针组合包括针对白念珠菌的第一上游引物、第一下游引物和第一探针,以及针对光滑念珠菌的第二上游引物、第二下游引物和第二探针;第二引物探针组合包括针对近平滑念珠菌的第三上游引物、第三下游引物和第三探针,以及针对热带念珠菌的第四上游引物、第四下游引物和第四探针。本发明提供的念珠菌的引物探针组合减小了不同引物之间的相互作用,提高了扩增的特异性和灵敏度。