本发明涉及一种环状RNA circ‑ERBB2及其检测试剂与应用,属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑ERBB2对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示,所述环状RNA circ‑ERBB2由ERBB2母基因的第3,4,5,6和7外显子反向拼接环化产生;本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测引物如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示;本发明环状RNA circ‑ERBB2的检测探针如SEQ ID NO:4所示,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑ERBB2,并以该环状RNA circ‑ERBB2作为分子标志物诊断乳腺癌;本发明还设计针对环状RNA circ‑ERBB2分子的荧光定量检测引物及taqman探针,通过该探针和引物申请人在多个乳腺癌细胞及正常乳腺细胞中检测到了circ‑ERBB2分子的表达情况。
本发明公开了一种人白血病FLT3基因内部串联重复突变检测的引物探针组合、试剂盒及应用。引物探针组合中,引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;探针序列如SEQ ID NO.3所示。试剂盒为微滴式数字PCR检测试剂盒,包含FLT3基因的引物探针组合和内参基因RPP30的引物探针组成的检测混合液、反应预混液、阴性质控品、空白对照。本发明的引物探针组合及试剂盒用于检测人白血病FLT3基因内部串联重复突变,具有检测过程简单高效、绝对定量、灵敏度和准确性高等优点,对于携带FLT3‑ITD突变的AML患者持续监控治疗效果、指导用药和预测疾病进展具有潜在的应用价值。
本发明涉及一种环状RNA circ‑GPC3及其检测试剂与应用,属于生物技术领域。本发明的环状RNA circ‑GPC3对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示,所述环状RNA circ‑GPC3由GPC3母基因的第3个独立外显子反向拼接环化产生;本发明环状RNA circ‑GPC3的检测引物如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示;本发明环状RNA circ‑GPC3的检测探针如SEQ ID NO:4所示,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。本发明提供了一种新的环状RNA分子—环状RNA circ‑GPC3,并以该环状RNA circ‑GPC3作为分子标志物诊断肝癌。本发明还设计针对环状RNA circ‑GPC3分子的荧光定量检测引物及taqman探针,该探针和引物能很好的检测生物体内的circ‑GPC3表达情况,可以为肝癌的诊断提供一种基于环状RNA检测的方案。
本发明公开了一种遗传性结直肠癌易感基因检测用的多重PCR引物系统、检测方法和应用。该遗传性结直肠癌易感基因检测用的多重PCR引物系统,包括第一多重PCR引物组合和/或第二多重PCR引物组合;其中,第一多重PCR引物组合含有112对PCR引物对,且该112对PCR引物对的序列分别如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:224所示;第一多重PCR引物组合含有113对PCR引物对,且该113对PCR引物对的序列分别如SEQ ID NO:225~SEQ ID NO:450所示。本发明的多重PCR引物系统能同时检测结直肠癌相关的11个易感基因,各引物之间相互干扰性小,特异性强,扩增效果好,可提高检测效率,降低检测成本,并且可配合高通量测序技术,进行高通量测序,对结直肠癌易感人群,尤其是具有结直肠癌家族遗传史的人群有一定的辅助诊断和提示作用。
本发明提供了一种扩增BRCA1/2基因的多重PCR引物及一种多重PCR引物的设计方法,所述多重PCR引物包括SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:234所示的核苷酸序列。本发明还提供了一种多重PCR引物的设计方法。本发明提供的多重PCR引物可以快速的完成BRCA1/2目标序列的富集,进而进行NGS文库构建和测序,实现高度自动化、高通量的遗传性乳腺癌BRCA1/2基因检测。
本发明提供了一种环状RNA circ‑NFATC3及其用途,所述环状RNA circ‑NFATC3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;另外,本发明提供了一种药物组合物、一种肝癌诊断试剂盒及circ‑NFATC3基因作为靶基因在制备治疗肝癌的药物中的用途。circ‑NFATC3基因及其表达产物作为诊断肝癌的标志物,使肝癌诊断更加准确、快速,作为制备治疗肝癌药物的靶基因为治疗肝癌提供了新的治疗靶点和治疗途径。