[发明专利]5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗原、抗体及制备与应用

权利要求书

1.一种5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原，其特征在于，具有式I所示结构：

其中，R为-CH₂-CH₂-和-CH＝CH-。

2.权利要求1所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原在制备5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原或抗体方面的应用。

3.一种5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原，其特征在于，由权利要求1所述半抗原与大分子载体偶联得到的，具有式II所示结构：

其中，R为-CH₂-CH₂-和-CH＝CH-。

4.根据权利要求3所述的人工抗原，其特征在于，结构式中的载体为牛血清蛋白、α-淀粉酶、藻蓝素、伴刀豆球蛋白A或卵清蛋白。

5.权利要求3或4所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原在制备抗5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗体方面的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述抗体为多克隆抗体、单克隆抗体或者基因工程抗体。

7.一种抗5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮抗体，其特征在于，是以权利要求3或4所述人工抗原为免疫原和包被原制备得到。

8.权利要求7所述抗体在免疫法检测5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮中的应用。

9.权利要求1所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：先使DL-苹果酸和三氟乙酸酐反应，然后除去溶剂得到油状物，在油状物中加入适量的苄醇，室温搅拌反应以制备中间体2；将中间体2与三乙胺和DPPA发生反应制备中间体3，再加入10％的钯碳反应得到中间体4；再将中间体4与草酰氯反应制备中间体5；在三乙胺或二异丙基乙胺存在的条件下，吗啡啉和中间体5反应以制备中间体6；以乙腈为溶剂，依次加入中间体6、三乙胺和DMAP，再向混合物中加入丁二酸酐或马来酸酐，搅拌反应，即可制备半抗原Ia或Ib，其反应式为：

10.权利要求3或4所述5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原、DCC和NHS溶于适量的DMF中，4℃搅拌反应过夜，离心取上清即得活化好的5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原衍生物；将活化好的半抗原衍生物逐滴加入到含有5mg/mL大分子载体的PBS缓冲溶液中，4℃搅拌反应12h，4℃用PBS透析3天，每天更换透析液3次，得到5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮人工抗原，分装，并低温保存备用；所述的5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮半抗原与载体蛋白的的摩尔比为40～100:1。