本发明提供了一种抗苯妥英钠抗体或其抗原结合片段及其应用，涉及抗体技术领域。抗苯妥英钠抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区；重链可变区包含SEQ ID NO.1所示氨基酸序列N末端第25～32位氨基酸残基的VHCDR1、第50～57位氨基酸残基的VHCDR2和第96～106位氨基酸残基的VHCDR3，轻链可变区包含SEQ ID NO.2所示氨基酸序列N末端第27‑37位氨基酸残基的VLCDR1、第55～57位氨基酸残基的VLCDR2和第94～103位氨基酸残基的VLCDR3。该抗体或其抗原结合片段可用免疫学检测，经验证具有良好的特异性结合能力。
本说明书实施例提供了一种结合依托咪酯的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段包括：重链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的CDRH1、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的CDRH2和氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的CDRH3；轻链可变区，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示的CDRL1、氨基酸序列为LTS的CDRL2和氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的CDRL3。
本发明公开了一种抗氨基甲酸酯类农药的宽谱单克隆抗体，其重链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示,轻链可变区编码基因的氨基酸序列为SEQ ID NO:4所示。本发明又公开了一种抗氨基甲酸酯类农药的宽谱重组全长抗体的表达质粒。将本发明得到的可变区序列基因分别连接到包含了重链恒定区基因和轻链恒定区基因的表达载体，采用双质粒系统的哺乳动物细胞表达获得了抗氨基甲酸酯类农药宽谱重组全长抗体。该宽谱单克隆抗体的可变区序列可应用于重组抗体的大批量及稳定生产，为克百威等氨基甲酸酯类农药多残留免疫分析方法提供了可靠、稳定的核心试剂。
本发明公开了一种检测腐霉利的方法及试剂盒，本发明利用一种氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的抗腐霉利纳米抗体，建立了一种检测腐霉利的方法并基于此方法研发了一种检测腐霉利的试剂盒。本发明制备得到的纳米抗体可以应用于腐霉利残留的实际样品检测，具有灵敏度高，特异性强、耐高温、耐酸碱、易保存的优点，并且还具有生产成本低，生产周期短等优势，可作为检测腐霉利的新型材料。本发明制备纳米抗体的方法具有普遍适用性，可用于其他小分子物质纳米抗体的筛选和制备，具有较高的应用价值。
本发明公开了一种亲和力成熟的抗喹硫磷纳米抗体及其应用。本发明通过噬菌体展示及生物淘筛技术对抗喹硫磷纳米抗体进行了亲和力成熟，获得了一种对喹硫磷亲和力相较野生型纳米抗体更高的纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体能够特异性识别喹硫磷农药，相比原来的纳米抗体灵敏度提高了18％，最低检测限降低了25％；将本发明提供的纳米抗体用于检测喹硫磷农药的酶联免疫分析方法中，其IC50为18.62ng/mL，最低检测限为1.93ng/mL，线性范围为5.14‑67.45ng/mL，该方法的检测结果准确、灵敏度更高、效果好、稳定性好，可以更加广泛的应用于喹硫磷农药残留的检测。
本发明公开了一种抗甲萘威单克隆抗体的轻链和重链可变区及其应用，单克隆抗体轻链可变区分别为CDR‑L1、CDR‑L2、CDR‑L3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7所示；单克隆抗体重链可变区分别为CDR‑H1、CDR‑H2、CDR‑H3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示。本发明提供的一种对甲萘威具有较高亲和力和检测灵敏度的单克隆抗体具有特异性强、亲和力和检测灵敏度高、检测方便快捷的优点，可以作为酶联免疫检测和胶体金免疫检测的原料，可以为间接竞争ELISA试剂盒以及胶体金试纸条的研发推广奠定基础。
本发明属于生物技术领域，具体公开了一种抗玉米赤霉烯酮的单链抗体、抗免疫复合物肽及应用，所述单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述单链抗体与传统常规抗体相比，其成本低、制备简便、可操作性强；本发明以玉米赤霉烯酮(ZEN)与单链抗体形成的免疫复合物为靶标，利用噬菌体展示技术筛选获得了一种能够特异性识别“单链抗体和ZEN免疫复合物”的抗免疫复合物肽，所述抗免疫复合物肽具有SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列及SEQ ID NO.7所示的核苷酸序列，所述抗免疫复合物肽可以以噬菌体展示的形式进行大量制备，其可与本申请所述的单链抗体免疫磁珠一起实现ZEN的非竞争型分析检测，提供了ZEN高灵敏的非竞争型免疫分析方法。
本发明公开了一种特异性抗异菌脲的单克隆抗体，其重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明又公开了一种抗异菌脲重组全长抗体的表达质粒。将本发明得到的可变区序列基因分别连接到包含了重链恒定区基因和轻链恒定区基因的表达载体，采用双质粒系统的哺乳动物细胞表达获得了抗异菌脲重组全长抗体。该单克隆抗体的可变区序列可应用于异菌脲重组抗体的长期稳定及大批量生产，为农产品、环境等样品中异菌脲残留免疫检测方法提供了可靠、稳定的核心试剂。
