本发明提供的试剂盒包括以下6对引物中的至少2对:SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10以及SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12。
该引物组合包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18中的至少两组引物。本申请构建的2个微卫星多重PCR体系包含9个微卫星位点,与现有的简单PCR方法相比,其效率提高了4‑5倍,检测成本大大降低。
本发明提供了一种用于检测BRAC1基因SNP的试剂盒与方法,所述试剂盒包括(1)SNP位点的上下游引物组:分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示;(2)DNA guides:分别如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示;(3)不同荧光基团标记的分子信标:如SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16所示;(4)DNA编辑酶PfAgo;该方法特异性强,灵敏度高。
该分离的表达增强子可以选自nbMT78(SEQ ID NO:1)、nbATL75(SEQ ID NO:2)、nbDJ46(SEQ ID NO:3)、nbCHP79(SEQ ID NO:4)、nbEN42(SEQ ID NO:5)、atHSP69(SEQ ID NO:6)、atGRP62(SEQ ID NO:7)、atPK65(SEQ ID NO:8)、atRP46(SEQ ID NO:9)、nb30S72(SEQ ID NO:10)、nbGT61(SEQ ID NO:11)、nbPV55(SEQ ID NO:12)、nbPPI43(SEQ ID NO:13)、nbPM64(SEQ ID NO:14)和nbH2A86(SEQ ID NO:15)。