本发明公开了一种PRRSV基因组全长cDNA全长质粒、PRRS病毒及其构建方法和应用,属于生物技术领域,以PBR322作为基础载体,包括PRRSV基因组全长cDNA序列和CMV启动子序列,bGH poly(A)signal序列,CMV启动子序列设置在PRRSV基因组全长cDNA序列的上游,bGH poly(A)signal序列设置在PRRSV基因组全长cDNA序列的下游,PRRSV基因组全长cDNA全长质粒为pBR322‑CMV‑rJXA1R,其序列如如SEQ ID No.1所示。该PRRSV基因组全长cDNA全长质粒保真度高,构建便捷效率高。
本发明公开了多种转运RNA片段,它是来源于以下全长序列的包含20‑55核苷酸的片段:tRNA‑val、tRNA‑gly、tRNA‑glu或tRNA‑his;其中,tRNA‑val的全长序列如SEQ IDNO1所示;tRNA‑gly的全长序列如SEQ ID NO2所示;tRNA‑glu的全长序列如SEQ ID NO3所示;tRNA‑his的全长序列如SEQ ID NO4所示。
本发明公开了一种表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV载体、PRRSV重组病毒及其构建方法和应用,属于生物技术领域,以PBR322作为基础载体,包括PRRSV基因组全长cDNA序列和p30蛋白基因序列,PRRSV基因组全长cDNA序列如SEQ ID No.1所示,p30蛋白基因序列插入到PRRSV基因组全长cDNA序列的ORF1b和ORF2a之间的区域,在插入p30蛋白基因序列的PRRSV基因组全长cDNA序列的上游设置位于CMV启动子,即得到表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV载体。