本发明公开了一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因及其在制备病毒样颗粒中的应用。本发明经优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因如SEQ ID NO.1所示，该序列是针对大肠杆菌表达系统进行的部分优化。与密码子全部优化或不优化相比，该序列能够高水平表达重组蛋白，并能够组装成完整的病毒样颗粒。本发明还公开了制备病毒样颗粒的方法，涉及猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因的优化、基因的克隆及其在大肠杆菌中表达，以及重组蛋白的纯化及病毒样颗粒的制备。本发明简单易行，成本较低，实现了猪圆环病毒3型衣壳蛋白在大肠杆菌中稳定表达，表达的重组衣壳蛋白可自组装形成病毒样颗粒，为猪圆环病毒3型的抗体检测及亚单位疫苗的研制提供了技术手段。
本发明涉及一种人工猪圆环病毒、制备方法及其应用，将如SEQ ID NO.2所示的Avi序列插入到猪圆环病毒全基因组序列中，具体插入位置为PCV Cap蛋白C端；所述的猪圆环病毒为PCV2、PCV3和PCV4中的一种，通过在PCV Cap蛋白的C端添加一个Avi标签，并且借用生物素‑亲和素系统将量子点标记到Avi标签修饰的PCV上，得到的标记PCV可用于疫苗研发、病毒感染检测方法的建立、病毒感染及致病机制的研究，进一步对PCV在细胞中的感染进行示踪分析。
本发明提供了一种治疗和/或预防非洲猪瘟病毒的疫苗及其制备方法，涉及疫苗技术领域。本发明疫苗包括两种mRNA，核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2；本发明将两种mRNA同时转染至293T细胞中时mRNA可以正确翻译形成P72蛋白，两种mRNA使用LNP包裹后递送至体内可以使机体产生免疫反应。
