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[发明专利]一种提高大肠杆菌中可溶性重组原动蛋白2β表达水平的方法-CN201510516845.0有效
发明人：闻崇炜;赵烨清;周慧莲;欧阳臻;王晓燕 -专利权人：江苏大学
申请日： 2015-08-21 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种有效提高大肠杆菌中可溶性重组蛋白质表达水平的工艺方法，其步骤如下：将表达重组蛋白质的工程菌冻存液按0.1%比例接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃振荡培养过夜获得种子液，随后将种子液按照1%比例接种到表达用新鲜LB液体培养基中，37℃继续振荡培养至培养液OD₆₀₀达到预设诱导起点的75%～90%，然后将培养温度升高至40℃继续培养0.5～1.5hr，待培养液OD₆₀₀达预设诱导起点后，向培养液中添加诱导物，继续以37℃或者40℃振荡培养6hr，菌体内可以产生显著的可溶性重组蛋白质。本发明简便有效，成本低廉，易于放大，适用于生物工程及基因工程中用大肠杆菌表达各种可溶性异源重组蛋白质。
一种提高大肠杆菌可溶性重组蛋白质表达水平方法

[发明专利]重组蛋白的生产方法-CN201780047981.7在审
发明人：仓知建始;木下美保子 -专利权人：丝芭博株式会社
申请日： 2017-08-02 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组蛋白的生产方法，其为使用在诱导型启动子的调控下表达重组蛋白的重组细胞的该重组蛋白的生产方法，其中，包括在使重组细胞增殖后的培养液的一部分中添加新鲜的培养基并连续地进行培养的步骤，不重复使用诱导了重组蛋白的表达的重组细胞。
重组蛋白重组细胞培养液表达重组蛋白诱导型启动子培养基生产增殖诱导调控新鲜

[发明专利]从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法-CN201510720495.X有效
发明人：梁国斌;汪斌 -专利权人：江苏理工学院
申请日： 2015-10-30 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法，包括以下步骤：产朊假丝酵母种子培养和发酵；收集发酵培养完毕的发酵液，离心，收集的细胞冷冻；将冷冻后的产朊假丝酵母细胞加入硫酸溶液中，放置15～30分钟后离心分离，收集上清液；此时细胞内的还原型谷胱甘肽从胞内释放出来溶解在硫酸溶液中，完成提取。本发明将收集的细胞冷冻处理以增加细胞壁渗透性；将冷冻处理后的细胞加入强酸溶液中，在强酸溶液中胞内还原型谷胱甘肽完全释放出来，而胞内其他大分子物质如蛋白质、糖类、核酸等则基本留在胞内，简化了后续的纯化操作，降低了纯化成本，实现了高效、清洁化提取；同时在本发明的提取条件下还原型谷胱甘肽未被破坏。
产朊假丝酵母发酵提取谷胱甘肽方法

[发明专利]一种糖基化胶原蛋白改性聚己内酯的酶促合成方法-CN201610938600.1有效
发明人：袁久刚;王平;王文达;范雪荣;王强 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-10-25 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种糖基化胶原蛋白改性聚己内酯的酶促合成方法，属于聚己内酯改性技术领域。本发明首先利用还原胺化法将含有脂肪酶催化位点——伯羟基的小分子还原糖引入胶原蛋白表面，之后以此为引发剂，采用脂肪酶对ε‑己内酯单体进行开环聚合，反应完毕后通过除酶以及丙酮提纯，最终制得糖基化胶原蛋白改性聚己内酯。该方法具有反应条件温和，无金属离子残留等问题。聚己内酯的生物法改性对于提升材料的细胞亲和性能具有重要意义。
一种糖基化胶原蛋白改性内酯合成方法

[发明专利]一种抗生素NVP018中间体的分离纯化方法-CN201610133971.2有效
发明人：王欣彤;胡志浩;蔡昌银;刘斌 -专利权人：苏州华赛生物工程技术有限公司;苏州汉酶生物技术有限公司
申请日： 2016-03-10 - 公布日： 2019-03-15 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗生素NVP018中间体的分离纯化方法，通过在链霉菌接种至发酵培养基中进行发酵培养24h后,加入底物FS45并分批加入非极性大孔吸附树脂，而后将抗生素NVP018中间体从树脂中解吸出来并浓缩，之后采用硅胶柱层析法进行分离纯化，其中所采用的洗脱液为二氯甲烷‑甲醇，并进行梯度洗脱。通过本发明的分离纯化方法，可分离得到纯度达92%以上的HS457，且其纯度在85%以上的收率可达70%，HS457的总回收率可达93%；同时采用该方法还可将HS496分离纯化，得到纯度最高达95%以上的HS496，其纯度在85%以上的收率可达70%，总回收率可达95%，且通过本发明的方法还可得到收率为50%的固体粉末状的HS496。
一种抗生素 nvp018 中间体分离纯化方法

[发明专利]一种表达O型口蹄疫包涵体工程菌的培养基-CN201811269546.1在审
发明人：秦天达;扶星星;黄银君;温建波;王科;牟克斌;武志宇;刘斌;李金杰;李佳霞;邢向茹;陈晓宇;岑静;刘瑞;宫士越;史效茹 -专利权人：天津威特生物医药有限责任公司;四川百诺吉科技有限公司
申请日： 2018-10-29 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了属于生物技术领域的一种表达O型口蹄疫包涵体工程菌的培养基。本发明包括基础培养基及补料培养基，不含速效碳源，通过流加60%葡萄糖来缓慢补充碳源，能够降低乙酸的产生，也防止了氨水调节pH导致活菌数下降的发生。本培养基补料培养基通过菌体合成所需氨基酸比例，合理添加不同种类氨基酸，避免了营养过剩的浪费。本培养基能显著提高大肠杆菌工程发酵密度，同时保证高密度下有高的活菌数，不降低每单位菌体蛋白表达量。提高目的蛋白表达总量，提高生产效率，降低生产成本。
培养基补料培养基包涵体工程菌活菌数氨基酸乙酸生物技术领域大肠杆菌葡萄糖基础培养基氨水调节补充碳源菌体蛋白菌体合成目的蛋白生产效率速效碳源表达量流加发酵保证

[实用新型]一种可控温的泰诺灵制备设备-CN201821080180.9有效
发明人：罗长财;胡祥 -专利权人：江西科诺生物科技有限公司
申请日： 2018-07-09 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种可控温的泰诺灵制备设备，包括底座和两个发酵罐，底座的上端固定连接有加热箱，两个发酵罐均设置在底座的上端且位于加热箱的两侧，加热箱的内部横向设有超滤膜，两个发酵罐的外侧壁分别连通有出液管和进液管，且出液管和进液管分别与超滤膜的输入端和输出端固定连接，加热箱的内部位于超滤膜的上方横向设有滑杆，滑杆的杆壁对称滑动连接有两个移动块，两个移动块的下端均固定连接有加热装置，加热箱的上端固定连接有驱动箱，驱动箱的上端中心处固定设有驱动电机。本实用新型能够对加热箱内部的温度进行控制调节，使得加热箱内的温度保持在一定范围内，为泰诺灵发酵液提供了较好的生存环境。
加热箱超滤膜发酵罐底座本实用新型上端固定制备设备出液管进液管可控温驱动箱移动块滑杆滑动连接加热装置控制调节驱动电机上端中心生存环境温度保持发酵液输出端输入端外侧壁上端杆壁下端加热连通对称

[发明专利]在木霉属中生产发酵产物的方法-CN201780041533.6在审
发明人： A·詹格;S·梅里诺;K·汉森;G·蒙克沃德;B·普洛赫 -专利权人：诺维信公司
申请日： 2017-07-07 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本申请公开了使用蔗糖作为碳源使包含异源转化酶基因的重组里氏木霉发酵的方法。
重组里氏木霉转化酶基因发酵产物蔗糖木霉属异源发酵申请生产

[发明专利]一种深海鱼皮胶原蛋白肽-CN201811235114.9在审
发明人：李健 -专利权人：兰溪市哥特生物技术有限公司
申请日： 2018-10-23 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种深海鱼皮胶原蛋白肽，其制备方法为：首先将洗净的深海鱼皮进行脱脂除杂蛋白处理，然后使用酸性浸泡与水浴抽提相结合的方法提取鱼皮胶原蛋白，之后将经过活化的乳酸菌接种到含有鱼皮胶原蛋白粉的发酵液中培养发酵，发酵过程中控制发酵时间、温度及pH，发酵结束后过滤，离心，取上清液得到鱼皮胶原蛋白肽溶液，再对鱼皮胶原蛋白肽溶液进行脱色脱腥处理，最后超滤，将滤液旋转蒸发浓缩，低温冷冻，真空干燥即得到鱼皮胶原蛋白肽。本发明深海鱼皮胶原蛋白肽的纯度高、分子量低、生物活性好、亲水性强，其制备方法简单易行、反应条件温和、提取效率高、便于商业化推广。
鱼皮胶原蛋白深海鱼皮胶原蛋白肽肽溶液制备发酵鱼皮胶原蛋白粉旋转蒸发浓缩乳酸菌接种蛋白处理低温冷冻发酵过程反应条件方法提取培养发酵取上清液生物活性提取效率脱腥处理脱色脱脂发酵液亲水性超滤抽提除杂活化水浴洗净过滤浸泡

[发明专利]一种蛋白合成冻干制剂及其制备方法和应用-CN201710642759.3在审
发明人：郭敏;柴智;周子鉴;徐开;刘帅龙;于雪 -专利权人：康码（上海）生物科技有限公司
申请日： 2017-07-31 - 公布日： 2019-02-12 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种蛋白合成冻干制剂及其制备方法和应用，具体地，本发明提供的无细胞冻干制剂，可显著提高外源蛋白的合成活性。
冻干制剂制备方法和应用蛋白合成合成活性外源蛋白无细胞

[发明专利]一种发酵生产恩拉霉素的方法-CN201510992674.9有效
发明人：王芳;杨金环;穆晓玲;李维理;韩小芬 -专利权人：安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
申请日： 2015-12-23 - 公布日： 2019-02-12 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种发酵生产恩拉霉素的方法，通过在发酵培养基中恒温培养的发酵过程中，不同阶段分批添加无机盐溶液，促进恩拉霉素的合成并能改善发酵液的溶氧，提高恩拉霉素的发酵水平。本发明简单易行，在发酵培养过程中通过该工艺发酵后，恩拉霉素发酵水平的可提高25％。
恩拉霉素发酵发酵水平发酵培养基无机盐溶液发酵过程发酵培养分批添加恒温培养发酵液溶氧合成生产

[发明专利]一种利用磁场促进解淀粉芽孢杆菌高产抗菌肽的方法-CN201510369341.0有效
发明人：姜正军;陈溥言;刘海玉;匡宝晓;王少娟;周文福;别怀周;于海燕 -专利权人：山东华辰制药有限公司
申请日： 2015-06-29 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用磁场促进解淀粉芽孢杆菌高产抗菌肽的方法及装置。所述方法步骤如下：(1)将活化后的解淀粉芽孢杆菌接种于种子培养基中，经种子培养，制得种子液；(2)将步骤(1)制得的种子液转接至发酵培养基中，进行初发酵至菌体细胞进入对数生长期后，经连续或不连续的磁场发酵处理，然后经后续发酵处理，制得含抗菌肽的发酵液。本发明还涉及磁场发酵处理的装置。本发明利用磁场处理对数生长期的解淀粉芽孢杆菌细胞，显著提高了目标产物抗菌肽的产量和抗菌肽的活性，该方法步骤简单，易于操作，显著降低了抗菌肽的生产成本。
一种利用磁场促进淀粉芽孢杆菌高产抗菌方法装置

[发明专利]猪口蹄疫O型基因工程复合表位蛋白疫苗的生产方法-CN201811166475.2在审
发明人：宗惠;刘斌;刘杰;康文娟;邹慧芳;岳晓蓉;秦天达;陈晓宇;李金杰;牟克斌;黄银君;温建波;魏徵;邢向茹 -专利权人：天津威特生物医药有限责任公司
申请日： 2018-10-08 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种猪口蹄疫O型基因工程复合表位蛋白疫苗的工业化生产方法，按照先后顺序包括以下步骤：(1)工程菌发酵与诱导表达；(2)菌体收集与破碎；(3)包涵体洗涤与变性溶解；(4)蛋白纯化；(5)纯化蛋白复性；(6)疫苗乳化。本发明的有益效果为：产品质量方面：疫苗无菌，目的蛋白纯度达95％以上，有效抗原含量在1.0mg/mL以上，间接血凝抑制效价在1：2¹¹以上，内毒素在31.25EU/mL以下，生产成本和效率上：所用人员更少、消耗试剂量更少、生产周期更短。
蛋白疫苗基因工程复合表疫苗内毒素间接血凝抑制生产周期包涵体洗涤纯化蛋白蛋白纯化菌体收集目的蛋白有效抗原诱导表达猪口蹄疫工程菌试剂量变性复性无菌效价乳化种猪生产成本发酵口蹄疫破碎溶解消耗生产

[发明专利]改进的发酵工艺-CN201780027309.1在审
发明人： W·赖歇尔特;C·赫维希;J·卡格;P·扎格迈斯特;M·丰克 -专利权人：龙沙有限公司
申请日： 2017-03-02 - 公布日： 2019-01-15 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种生产重组目标蛋白(POI)的方法，包括步骤(a)在细胞培养基中培养细胞，通过向所述细胞培养物中加入包含至少一种基质的给料来表达所述POI，(b)在诱导阶段和/或POI产生阶段期间，基于计算、设定和任选地控制细胞的比基质摄取速率q_S来应用给料策略，其中q_S设定为接近细胞培养物的维持率，和(c)从细胞培养物中分离所述POI。
细胞培养物基质细胞培养基发酵工艺目标蛋白培养细胞生产重组摄取给料诱导细胞应用改进

[发明专利]禽法氏囊病毒VP2蛋白的高表达发酵工艺-CN201811083057.7在审
发明人：张改平;刘运超;邓瑞广;邢广旭;陈玉梅;刘东民;魏蔷;冯华;周景明;刘艳凯;赵孟孟 -专利权人：河南省农业科学院;河南中泽生物工程有限公司
申请日： 2018-09-17 - 公布日： 2019-01-08 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种禽法氏囊病毒VP2蛋白的高表达发酵工艺，旨在解决工程菌禽法氏囊病毒VP2蛋白表达量低的技术问题。该发酵工艺包括以下步骤：（1）菌种活化；（2）种子培养；（3）补料分批发酵：I.细胞快速繁殖阶段：制备基础培养基置于发酵罐中，将二级种子液按4～6%的接种量接入发酵罐中发酵，待溶氧量急剧上升开始补料；II.蛋白表达阶段：加入终浓度为0.5mmol/L诱导剂；加入补料培养基之二，继续发酵至结束即成。本发明的工艺方法蛋白表达量高，能够缩短生产周期、减少设备投资，降低生产成本，提高生产效率，能够极大地提高产品在商场上的竞争力，为IBDV基因工程亚单位疫苗的研制和生产奠定了基础。
法氏囊病毒发酵发酵工艺高表达基因工程亚单位疫苗补料分批发酵缩短生产周期补料培养基蛋白表达量二级种子液基础培养基蛋白表达减少设备菌种活化快速繁殖生产效率种子培养表达量工程菌接种量溶氧量诱导剂补料制备细胞投资生产