[发明专利]重组酶扩增结合免疫侧流向检测新冠病毒的方法在审
| 申请号： | 202010731921.0 | 申请日： | 2020-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN111793719A | 公开（公告）日： | 2020-10-20 |
| 发明（设计）人： | 林敏;郑玉忠;杨培奎;林丽云;陈江涛;吴显劲 | 申请（专利权）人： | 韩山师范学院;惠州市中心人民医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12Q1/6804;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京劲创知识产权代理事务所(普通合伙) 11589 | 代理人： | 徐家升 |
| 地址： | 521041*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 扩增 结合 免疫 流向 检测 病毒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.重组酶扩增结合免疫侧流向检测新冠病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：制备新冠病毒COVID-19检验样品比对盘；
S2：确定样品检测方式和相应检测体系；
S3：确定及优化核酸试纸条灵敏度；
S4：试验结果分析；
S5：由试验结果分析引物组合2测序结果与COVID-19 N基因的比对结果；
S6：研究分析引物对组合2敏感性及特异性；
S7：进行引物对组合2RT RAA扩增精密性和重复性试验。
2.如权利要求1所述的重组酶扩增结合免疫侧流向检测新冠病毒的方法，其特征在于，S1中具体方法为：
2.7μg新冠病毒COVID-19 N基因全序列的重组质粒COVID-19 N pBluescript IISK(+)购自上海生工，以紫外分光光度计测量重组质粒OD260、OD280及OD260/OD280值，并重复3次，确定质粒DNA浓度和纯度，再按照公式获得质粒的拷贝数：
拷贝数＝质粒浓度×6.02×1023/(660×质粒总长度)
计算拷贝数并稀释至1×108拷贝/μL，–20℃保存备用
以1×106拷贝/μL作为比对盘原液，进行10-1×比对盘原液样本，10-2×比对盘原液样本，10-3×比对盘原液样本，10-4×比对盘原液样本，10-5×比对盘原液和10-6×比对盘原液样本梯度稀释对比；将已定值的重组质粒稀释至1×105拷贝/μL，再10倍系列稀释，获得1×100拷贝/μL、1×101拷贝/μL、1×102拷贝/μL、1×103拷贝/μL、1×104拷贝/μL和1×105拷贝/μL稀释液为后续扩增模板。
3.如权利要求1所述的重组酶扩增结合免疫侧流向检测新冠病毒的方法，其特征在于，S2中的具体方法如下：
S201：新冠病毒的N基因RAA扩增引物设计：以新冠病毒COVID-19N基因作为靶基因，分析新冠病毒COVID-19N基因的序列特点后，应用Primer Premier5.0软件设计种属特异性扩增引物，探针序列位于扩增引物中间区段，经四氢呋喃修饰；引物设计遵循以下原则：①扩增引物长度20-30bp，不同引物的PCR退火温度尽可能一致或相似；②扩增产物长度200-500bp，具物种特异性；③探针长度为45-60bp；使用美国国家生物技术信息中心的BLAST功能对引物扩增区段序列进行比对，完成引物扩增特异性的初步鉴定；
S202：RAA核酸扩增的电泳检测：使用Tiosbio RT RAA核酸扩增试剂盒JY0203进行RAA反应体系的配制，吸取10μL的DNA纯化产物进行琼脂糖凝胶电泳检测；
S203：RAA核酸扩增试纸条检测：使用Tiosbio RT RAA核酸扩增试剂盒试纸条法JY0204进行RAA反应体系的配制，将试纸条的浸液区端插入eppendorf管，根据试纸条显色情况直接读取检测结果。
4.如权利要求1所述的重组酶扩增结合免疫侧流向检测新冠病毒的方法，其特征在于，S3中的具体方法如下：以检测时间最短的试验条件为最适条件，在S2的基础上对扩增体系进行调整，通过比较RAA核酸扩增试纸条检测体系使用的MgAc2添加量、不同的上游引物添加量、反应时间的多个因素，确定最佳的反应体系和反应条件。
5.如权利要求1所述的重组酶扩增结合免疫侧流向检测新冠病毒的方法，其特征在于，S5中的具体方法如下：对引物组合2上游引物、下游引物扩增产物的克隆测序结果显示，该引物对测序结果与通用公司提供的质粒测序结果完全一致，显示引物组合2可以进行特异性扩增。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于韩山师范学院;惠州市中心人民医院，未经韩山师范学院;惠州市中心人民医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010731921.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种智能微量多组份配料系统
- 下一篇：有色金属气体全保护焊接车间及其作业方法
- 同类专利
- 用于检测Ⅲ型鲤疱疹病毒的RAA-CRISPR试剂盒-202310980493.9
- 尹纪元;王浩;王庆;徐伟;李鹏飞;李莹莹;王英英;张德锋;任燕 - 中国水产科学研究院珠江水产研究所;上海海洋大学
- 2023-08-04 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种用于检测Ⅲ型鲤疱疹病毒的RAA‑CRISPR试剂盒。所述试剂盒包含Ⅲ型鲤疱疹病毒RAA的扩增引物以及crRNA序列；本发明还提出了基于RAA‑CRISPR‑Cas12a系统构建一种新型Ⅲ型鲤疱疹病毒的检测方法，具有高灵敏、高特异、便捷检测，灵敏度可达到10
- 一种基于Taqman探针的新型冠状病毒多重等温扩增检测试剂盒及方法-202310921583.0
- 许海坡;刘小龙;赵必星;蔡志雄;曾永毅;汤优 - 福建医科大学孟超肝胆医院
- 2023-07-26 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明涉及分子生物学检测技术，特别是涉及一种基于Taqman探针的新型冠状病毒多重等温扩增检测试剂盒及方法。所述试剂盒包括针对新型冠状病毒N基因和人源RNaseP基因的检测引物和检测探针。本发明采用弥补了Bst DNA聚合酶所缺失的5'→3'外切活性的结构特异性核酸酶FEN1，引入改良的以等温扩增LAMP引物为序列而淬灭基团标记在内部的Taqman式探针，实现了1~2小时内双重靶标最低检测下限为10
- 一种新型杯状病毒FCV检测用的实时荧光定量PCR引物系统、检测方法及应用-202311023859.X
- 张文;奚源;蒋晓捷;鲍思雯;赵敏;沈权;王晓春;刘雨薇;纪立凯;杨世兴 - 江苏大学
- 2023-08-15 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明涉及于病毒检测技术领域，具体涉及一种新型杯状病毒FCV检测用的实时荧光定量PCR引物系统、检测方法及应用。本发明根据新型杯状病毒的RdRp片段的基因序列设计并合成特异性引物系统，建立针对新型杯状病毒的实时荧光定量PCR检测体系，实现新型杯状病毒的定量检测。对SeV等多种病毒无特异性扩增；能够检测到10
- 检测猫消化道病原体的多重PCR试剂盒及应用-202311224551.1
- 孙依欣;李杰;黄挺;张晓婷 - 上海基灵生物科技有限公司
- 2023-09-21 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明涉及猫消化道病原体检测技术领域，具体涉及检测猫消化道病原体的多重PCR试剂盒及应用。该多重PCR试剂盒包括四种外引物对和四种内引物对，能够构成一个多重PCR反应体系，该反应体系能够有效、协同地扩增出待检测样品中猫消化道病原体：猫细小病毒、猫肠道冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒及猫衣原体的特异性序列，扩增效果准确，灵敏度和重复性高。
- 一种乙型肝炎病毒用药指导系统及其应用-202311205250.4
- 徐锋;方少彬;李健新;殷乐;翁丹容 - 广东凯普生物科技股份有限公司;广州凯普医学检验所有限公司;沈阳凯普医学检验所有限公司
- 2023-09-19 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明提供一种乙型肝炎病毒用药指导系统及其应用，并提供了一种引物组，含有核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示的反向引物。并基于上述引物组提供了一种乙型肝炎病毒用药指导，所述乙型肝炎病毒用药指导系统以利用引物组扩增待测样品并结合Sanger测序得到的ab1文件作为输入数据，即可实现氨基酸层面的突变分析，不仅能够基于氨基酸位点的突变分析指导乙肝病毒感染者的核苷酸药物用药，而且还能够发现新的氨基酸突变位点；同时该乙型肝炎病毒耐药突变位点检测模型能够准确高效地对大批量数据进行处理，相较于传统借助比对软件逐一判读，不仅显著提高了判读准确性，还大大缩短了时间。
- 一种基于免标记比率荧光PCR的诺如病毒核酸检测方法-202311072973.1
- 郭亚辉;梁婷娜;杜戎;霍翔;倪云龙 - 江南大学;江苏省疾病预防控制中心（江苏省公共卫生研究院）
- 2023-08-23 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明开发了一种基于免标记比率荧光PCR的诺如病毒核酸检测方法，属于生物和检测领域。本发明构建了一种GⅡ型NoV基因组的G4整合PCR策略，利用DAPI和NMM单激发波长、双信号输出的特点，采用比率荧光检测体系检测PCR产物，在降低成本的同时保证一定灵敏度和特异性，为NoV及其他食源性致病微生物的检测提供了新思路。本方法基于成熟的PCR技术体系，通过巧妙的引物设计实现了双荧光信号的同时输出，建立了比率荧光PCR检测方法，有望实现对食品中GⅡ型诺如病毒的检测。
- 犬瘟热病毒和犬腺病毒II型检测引物探针组合物、试剂盒及检测方法-202310745908.4
- 王蕾;谭业平;扈富哥;毕振威;欧卫军 - 南通伊仕生物技术股份有限公司
- 2023-06-21 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种犬瘟热病毒和犬腺病毒II型检测引物探针组合物、试剂盒及检测方法。本发明提供的一种犬瘟热病毒和犬腺病毒II型检测引物探针组合物，包括：第一组引物和探针，为基于如SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列设计的；第二组引物和探针，为基于如SEQ ID NO.11所示的核苷酸序列设计的；第三组引物和探针，为基于如SEQ ID NO.12所示的核苷酸序列设计的。上述引物探针组合物可以对待测样本的采集、运输和提取过程中进行监控，避免检测结果的假阴性和假阳性，从而提高检测的准确性、特异性和灵敏度。
- 一种猫冠状病毒和猫细小病毒检测引物探针组合物、试剂盒和检测方法-202310789346.3
- 王蕾;谭业平;郭存杰;钱晶;欧卫军 - 南通伊仕生物技术股份有限公司
- 2023-06-29 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种猫冠状病毒和猫细小病毒检测引物探针组合物、试剂盒和检测方法。本发明提供了一种猫冠状病毒和猫细小病毒检测引物探针组合物，包括：第一组引物和探针，为基于如SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列设计的；第二组引物和探针，为基于如SEQ ID NO.11所示的核苷酸序列设计的；第三组引物和探针，为基于如SEQ ID NO.12所示的核苷酸序列设计的；利用上述靶标序列设计的引物探针组合物进行检测时具有更高的灵敏度、准确度、特异性，更低的假阴性和假阳性。
- 一种检测传染性疾病病原体的引物组、试剂盒及其应用-202310730351.7
- 何建安;邓炜;张然;朱丽;叶颖;叶苑青;叶润娜;郭永超 - 深圳国际旅行卫生保健中心（深圳海关口岸门诊部）;深圳联合医学科技有限公司
- 2023-06-20 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种检测传染性疾病病原体的引物组、试剂盒及其应用，涉及生物技术领域。本发明提供了检测传染性疾病病原体的引物组，并采用该引物组制备检测传染性疾病病原体的试剂盒。本发明的试剂盒具有以下优点：(1)能够同时检测单个样本的多种病原，并在一批实验中可同时检测多个样本；(2)检测灵敏度及特异性高，可将低浓度样本中核酸信息放大化捕捉；(3)对单个病原多靶点进行检测能够提高可信度，检测结果可精准到种、分型；(4)操作简便，无人源基因组污染，所需数据量小；(5)可同时检测样本中DNA及RNA信息，涵盖不同遗传物质的病原体样本类型。
- 烟草曲茎病毒LAMP检测引物组、试剂盒及其应用和方法-202310881744.8
- 姜宁;刘雅婷;张俊蕾;盖晓彤;赵正婷;卢灿华;刘弟;夏振远;马俊红;吴玉萍 - 云南省烟草农业科学研究院;云南农业大学
- 2023-07-18 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明“烟草曲茎病毒LAMP检测引物组、试剂盒及其应用和方法”属于分子生物学技术领域。所述烟草曲茎病毒LAMP检测引物组包括：核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的外引物对TbC‑2‑F3和TbC‑2‑B3；核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的内引物对TbC‑2‑FIP和TbC‑2‑BIP；核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的环引物对TbC‑2‑LF和TbC‑2‑LB。本发明的烟草曲茎病毒LAMP检测引物组、试剂盒和方法检测烟草曲茎病毒的灵敏度是常规PCR检测的10,000倍。
- 单纯疱疹病毒Ⅰ型或Ⅱ型的荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒-202310970532.7
- 胡孟军;高志建;钟伟超;曾炜佳;卢孔鑫;吴涛;朱向莹 - 浙江恒驭生物科技有限公司
- 2023-08-03 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明属于病毒分子生物学领域，特别涉及一种单纯疱疹病毒Ⅰ型或Ⅱ型的荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒。一种单纯疱疹病毒Ⅰ型或Ⅱ型的荧光定量PCR检测组合物，所述检测组合物包括核苷酸序列如SEQ ID NO：1至6所示的检测单纯疱疹病毒Ⅰ型或Ⅱ型的引物和探针。
- 一种RT-qPCR检测异名百合斑驳病毒的方法-202311144026.9
- 刘艳梅;罗雯 - 南昌师范学院
- 2023-09-06 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种RT‑qPCR检测异名百合斑驳病毒的方法，涉及生物技术领域。该方法包括以下步骤：(1)提取得到待检样品的总RNA，之后反转录得到cDNA；(2)以所述cDNA为模板，利用引物q‑LMoV‑F和q‑LMoV‑R进行RT‑qPCR反应，根据Ct值判断所述待检样品中是否含有异名百合斑驳病毒：当15Ct值35时，为阳性，即为含有所述异名百合斑驳病毒；当Ct值≥35时，为阴性，即为不含有所述异名百合斑驳病毒。该方法对低浓度异名百合斑驳病毒含量的龙牙百合组织样本，具有较好的检出率，检测下限达到0.1pg/mL。
- 检测新城疫病毒和禽流感病毒的引物探针组及试剂盒-202211627719.9
- 温肖会;连聪;罗胜军;吕殿红;贾春玲;周秀蓉 - 广东省农业科学院动物卫生研究所
- 2022-12-16 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了检测新城疫病毒和禽流感病毒的引物探针组及试剂盒，属于试剂盒技术领域，仅有新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒和禽流感病毒能检测出Ct值，其他病毒均无Ct值，表明该方法具有良好的特异性，通过荧光定量PCR仪自带软件读取相应的Ct值。使用荧光定量PCR仪检测时，选择FAM通道检测新城疫，荧光信号为5′FAM‑3′BHQ1；选择VIC通道检测禽传染性支气管炎，荧光信号为5′VIC‑3′BHQ1；选择ROX通道检测禽流感，荧光信号为5′ROX‑3′BHQ2，3个梯度的组内重复性十分良好，组内变异系数不大于1.17％。其中，3.02×104copies/μL的组内变异系数依次为1.16％、1.16％和1.15％；3.02×105copies/μL的组内变异系数依次为1.15％、1.16％和1.17％；3.02×106copies/μL的组内变异系数均为0.95％。
- 浸润性宫颈鳞癌精准分期的检测引物、检测探针、试剂盒及方法-202311160451.7
- 陈涛;孙如美;刘栋;吴涛;程雅婷 - 广州市金域转化医学研究院有限公司
- 2023-09-08 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种浸润性宫颈鳞癌精准分期的检测引物、检测探针、试剂盒及方法，所述检测引物包括：针对HPV16检测的SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7、针对HPV18检测的SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10、针对HPV33检测的SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13、针对HPV52检测的SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16、针对HPV58检测的SEQ ID NO.18和SEQ ID NO.19。本发明可以明确ctHPV DNA载量与宫颈癌发生发展的相关性，从而实现了精准区分浸润性宫颈鳞癌癌前病变、宫颈癌早期和宫颈癌晚期。
- 用于检测临床样本中GI.5型诺如病毒的试剂盒及专用引物-202110838240.9
- 朱宝利;毛梦雨;律娜;张瑞芬 - 中国科学院微生物研究所
- 2021-07-23 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了用于检测临床样本中GI.5型诺如病毒的试剂盒及专用引物。本发明提供了引物对，由序列表的序列3所示的单链DNA分子和序列表的序列4所示的单链DNA分子组成。本发明提供了一种高效、快速、准确地检测GI.5型诺如病毒的方法以及试剂盒。通过本发明提供的方法或试剂盒，可以快速、及时地获得临床样本中诺如病毒的分型信息，时间短且准确性高，可以帮助推断传播途径，有助于疫情的调查。本发明可用于直接检测粪便中的GI.5型诺如病毒，可以极大地缩短检测的时间，减少检测的费用。本发明应用前景广阔，为检测样本诺如病毒分型信息提供了新的思路。
- 鸡圆圈病毒3型可视化LAMP检测成套试剂-202111492621.2
- 谢芝勋;张民秀;张艳芳;邓显文;谢志勤;谢丽基;李孟;罗思思;范晴;曾婷婷;黄娇玲;王盛;刘加波;李丹 - 广西壮族自治区兽医研究所
- 2021-12-08 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了鸡圆圈病毒3型可视化LAMP检测成套试剂。本发明所要保护的一个技术方案是鉴定或辅助鉴定圆圈病毒3型的组合物。所述组合物由核苷酸序列是序列表中序列3‑8所示的单链DNA分子组成。本发明建立的快速检测GyV3可视化LAMP成套试剂及方法具有很好的特异性、灵敏度强，当GyV3的质粒模板稀释至10
- 一种用于BKV的早期诊断和检测体系及其应用-201810729952.5
- 朱同玉;吴楠楠;石业静;戎瑞明;许明;代发辉;梅雪;高文君;曾毅刚;唐群业;胡春兰 - 上海公卫生物医药有限公司
- 2018-07-05 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开一种用于BKV的早期诊断和检测体系及其应用，具体提供了一种用于BKV早期诊断和检测的引物探针体系，包含上述引物探针的试剂盒以及他们的用途。本发明的引物探针体系覆盖度更广、特异性强、灵敏度更高，具有更大的临床应用潜力，利于有效预防BKV相关疾病，提高肾移植受者的生存质量。
- 利用二重实时荧光定量RT-PCR检测猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的方法-201910733836.5
- 王金良;胡绍良;邓凤林;魏凤;于新友;陈金龙 - 深圳市康百得生物科技有限公司;山东省滨州畜牧兽医研究院
- 2019-08-09 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及利用二重实时荧光定量RT‑PCR检测猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的方法。本发明提供用于猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的二重实时荧光定量RT‑PCR检测的引物和探针组，以及包含该引物和探针组的检测试剂盒和检测方法。该方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可实现对猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的鉴别诊断和排除检测，在猪流行性腹泻病毒和B型猪肠道病毒的快速检测中具有较高的应用价值。
- 一种百合病毒LCrV-1特异性检测靶序列、试剂盒及检测方法-202210312962.5
- 丁芳;霍妍妍;李晓婷;洪霓;王国平 - 华中农业大学
- 2022-03-28 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种百合病毒LCrV1特异检测靶序列、试剂盒及检测方法，所述靶序列的碱基序列如SEQ ID NO:1所示，所述检测试剂盒包括碱基序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物对，所述检测方法为：将待测样品用改进的Trizol法对RNA进行提取，逆转录得到cDNA，使用引物对进行PCR扩增后采用凝胶电泳分析。本发明能够实现百合病毒LCrV1的快速、特异性检测，能够广泛用于田间采集的百合样品检测。
- 一种新型鸭依赖属病毒环介导等温扩增检测引物组及试剂盒-202011358982.3
- 万春和;黄瑜;程龙飞;傅光华;施少华;陈红梅;刘荣昌;傅秋玲 - 福建省农业科学院畜牧兽医研究所
- 2020-11-27 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明涉及一种新型鸭依赖属病毒环介导等温扩增检测引物组及试剂盒。该方法根据新型鸭依赖属病毒基因组保守序列设计引物组：外引物(N‑DAAV‑F3和N‑DAAV‑B3)、内引物(N‑DAAV‑FIP和N‑DAAV‑BIP)和环引物(N‑DAAV‑LF和N‑DAAV‑LB)。具体序列分别见SEQ ID NO.1‑6。根据所设计的引物组建立一种新型鸭依赖属病毒环介导等温扩增检测引物组及试剂盒。该试剂盒检测方法与鸭常见传染病病原不发生交叉反应。本发明的检测方法特异性强、准确性好、灵敏度高，无需昂贵仪器设备，便于基层临床现场使用，方便快速。
- 一种百合病毒LAV-1特异性检测靶序列、试剂盒及检测方法-202210312978.6
- 丁芳;霍妍妍;李晓婷;洪霓;王国平 - 华中农业大学
- 2022-03-28 - 2023-10-27 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种百合病毒LAV‑1特异检测靶序列、试剂盒及检测方法，所述靶序列的碱基序列如SEQ ID NO:1所示，所述检测试剂盒包括碱基序列如SEQID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物对，所述检测方法为：将待测样品用改进的Trizol法对RNA进行提取，逆转录得到cDNA，使用引物对进行PCR扩增进行凝胶电泳检测分析。本发明能够实现百合病毒LAV‑1的快速、特异性检测，为LAV‑1病毒的进一步研究提供了技术支持。
- 一种基于微流体扩增和胶体金试纸条的非洲猪瘟病毒快检试剂盒-202310771697.1
- 孔凡德;叶鹏;唐泰山;朱坤;储利民;苏静;龚艳清;曾韵颖 - 厦门海关技术中心;南京海关动植物与食品检测中心;苏州博利康生物科技有限公司
- 2023-06-28 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种基于微流体扩增和胶体金试纸条的非洲猪瘟病毒快检试剂盒，包括：试剂盒体，和设置在所述试剂盒体内部的微流体芯片，以及设置在所述试剂盒体内部的试纸条，其特征在于，所述微流体芯片包括：设置在所述试剂盒体顶部进液孔，以及通过连通管道依次连通在所述进液孔一侧的若干稀释腔室。在微流体芯片中，通过上锥筒顶部的直径和下锥筒底部的直径均大于连接筒的直径，上锥筒底部的直径和下锥筒顶部的直径均与连接筒的直径大小相同，进而形成锥形，液体流过时，在流动方向上会产生螺旋线的流动，降低流动时的压降，增大流速，缩短检测时间，并且提升了稀释液和样本液体的混合效率，从而保证了检测时的准确性，提高检测时的效率。
- 一种腹泻病毒多指标同检的嵌合引物、试剂盒及其使用方法-202211608975.3
- 丁小静;张倩;杨扬 - 江苏和创生物科技有限公司
- 2022-12-14 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明提供了一种用于腹泻病毒多指标同检的嵌合引物、试剂盒及其使用方法。
- 一种靶向检测血液中乙肝病毒前基因组RNA的检测体系和数字PCR检测方法-202310763370.X
- 王琪;费晶晶;余育超 - 苏州玄津生物科技有限公司
- 2023-06-27 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种靶向检测血液中乙肝病毒前基因组RNA的检测体系和数字PCR检测方法。检测体系包括：3对引物序列：HBV基因型B的正向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.1所示，反向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.2所示；HBV基因型C的正向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.3所示，反向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.4所示'；HBV基因型D的正向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.5所示，反向引物，其核苷酸序列如SEQ NO.6所示。通过靶向富集乙肝治疗患者的血清中游离的乙肝病毒前基因组RNA，设计针对pgRNA的特异性引物和优化扩增反应体系，开发一种更加灵敏和精确定量监测慢乙肝治疗疗效和安全停药的血液pgRNA的检测试剂盒和诊断方法。
- 一种高危型人乳头瘤病毒分型检测的引物探针组及其应用、试剂盒及检测方法-202311031128.X
- 张森;李贵喜;李三华;谢夏;郭琴;王少辉;郭曙光;霍清园;李丹阳;张鑫;齐华 - 河南赛诺特生物技术有限公司
- 2023-08-15 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明涉及一种高危型人乳头瘤病毒分型检测的引物探针组及其应用、试剂盒及检测方法。本发明提供的试剂盒中包含特异性引物探针组，并对反应体系进行合理优化，保证了对高危型人乳头瘤病毒分型检测的灵敏度和特异性，使其更加贴合对受试者尿液样本的检测。试剂盒中包含的标准品可以辅助完成对人乳头瘤病毒高危型别进行分型定量检测，搭配不受采样手法的不同而影响质量的尿液样本，能保证细胞量维持在一个相对均衡的水平，使定量检测的结果更有意义。同时，本发明提供的检测方法能够对受检者体内HPV病毒进行定量检测，从而观察受检者体内在一定时间段内病毒型别与载量的变化情况，从而给予临床医生更多帮助，有利于医生出具针对性的治疗方案。
- 一种RT-qPCR检测黄瓜花叶病毒的方法-202311143956.2
- 刘艳梅 - 南昌师范学院
- 2023-09-06 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明公开了一种RT‑qPCR检测黄瓜花叶病毒的方法，涉及生物技术领域。该方法包括以下步骤：(1)提取得到待检样品的总RNA，之后反转录得到cDNA；(2)以所述cDNA为模板，利用特异性引物对进行RT‑qPCR反应，根据Ct值判断所述待检样品中是否含有黄瓜花叶病毒：当15Ct值35时，为阳性，即为含有所述黄瓜花叶病毒；当Ct值≥35时，为阴性，即为不含有所述黄瓜花叶病毒。本发明针对黄瓜花叶病毒基因组编码外壳蛋白的基因保守区域，设计了特异性强的RT‑qPCR检测引物，并建立了一种高效的RT‑qPCR检测方法，可为黄瓜花叶病毒的准确高效监测防控提供了技术支持。
- 适用于15种植物检疫病毒的靶向测序建库及检测方法-202210150996.9
- 毛凌峰;孙凯;尹传林;俞晓平 - 杭州柏熠科技有限公司
- 2022-02-18 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明提供一种适用于15种植物检疫病毒的靶向测序建库及检测方法，设计针对15种植物检疫病毒的特异引物池，并将特异性多重反转录技术与纳米孔技术相结合，建立针对15种植物检疫病毒的靶向捕获测序方法，具备高灵敏度、高通量、低成本的优点，可实现单次建库测序检测15种植物检疫病毒的目标，可解决目前植物病毒检疫存在的检测通量低、检测目标单一的问题。
- 检测BK病毒的方法和组合物-201910529553.9
- F·陈;L·I·孔;J·陈;M·捷纳提保 - 焦点诊断公司
- 2006-07-25 - 2023-10-24 - C12Q1/70
- 本发明提供了用于快速、灵敏和高度特异性地基于核酸(例如，基于DNA)检测样品中的BK病毒的方法和组合物。一般地，所述方法涉及检测具有BK病毒基因组保守区域的靶序列的靶核酸。本发明也表征了用于本发明方法的组合物和试剂盒，所述组合物包括引物、探针。
- 猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法及应用-202310790990.2
- 朱旭;郝鹏;张燕红;王艳杰;张海宝;韩冬;李晓燕;孟书丽;赵嘉楠;赵飞飞;高晓宇;吴孟楠;李培艳;燕成义;杨晶;乌恩宝音;海丽丽;段可欣 - 金宇保灵生物药品有限公司;金宇共立动物保健有限公司
- 2023-06-29 - 2023-10-20 - C12Q1/70
- 本发明涉及微生物检测技术领域，尤其涉及一种猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法及应用。所述猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法包括如下步骤：使用灭活剂处理猫杯状病毒液，得到灭活抗原液；使用透析袋去除所述灭活抗原液中的灭活剂，得到纯化灭活抗原；所述透析袋的规格为80‑200kd；所述透析袋的透析时间为5‑12h；测定所述纯化灭活抗原的毒价。所述方法通过透析袋透析灭活剂处理后的灭活抗原，能精准的控制灭活剂的处理时间，进而缩短灭活周期。且使用透析袋可以去除灭活剂残留，在进行灭活检验时，不会因为灭活剂残留而影响灭活结果的判定。本发明所述方法无需多次抗原传代，即可获得抗原的灭活检验结果。
- 引物组和探针、试剂盒、检测猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的方法-202311144718.3
- 刘志成;勾红潮;沈海燕;张春红;乌日尼乐;聂晶晶;瞿云芝;张建峰 - 广东省农业科学院动物卫生研究所
- 2023-09-06 - 2023-10-20 - C12Q1/70
- 本发明属于生物技术领域，公开了一种引物组和探针，包含核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1‑6所示的FIP、BIP、F3、B3、LoopF和LoopB组成的引物组以及如SEQ ID NO：7‑8所示的荧光探针probe和淬灭探针Quencher，该引物组能够对猪流行性腹泻病毒野毒株、疫苗株均进行扩增，对于野毒株的ORF3基因保守区域开发出荧光引物，用于进行荧光的特征性反应，实现了对猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的高特异性、敏感性的快速定量检测。同时，本发明还提供了一种试剂盒、检测猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株的方法。
- 专利分类
