本发明属于分子生物学技术领域,特别涉及一种基于CO1基因测序的通用引物及其在多细胞种属鉴别和交叉污染检测中的应用。所述通用引物序列为:CO1正向引物(CO1‑FP):TGTAAAACGACGGCCAGTGCWGGAACWGGWTGAACAGT,SEQ ID NO:1,CO1反向引物(CO1‑RP):CAGGAAACAGCTATGACARRTTRCGRTCTGTWARTAG,SEQ ID NO:2。该通用引物可通过CO1基因扩增后产物测序,实现生物制品中5个常用哺乳动物类细胞的种属鉴定,同时具有杂物种细胞检出能力。